Comparación de dos soluciones de lavado para el trasplante de progenitores hematopoyéticos sin dimetil sulfóxido

Abstract

La criopreservación de progenitores hematopoyéticos es un componente esencial del protocolo clínico de la mayoría de los trasplantes de progenitores hematopoyéticos. Es conocido el efecto tóxico del dimetil sulfóxido (DMSO) sobre la célula, pero además genera otros efectos adversos durante la infusión que habitualmente son dosis dependiente. Complicaciones que pueden ser leves como los mareos, o muy graves como el fallo renal agudo y la parada cardíaca, aunque las más frecuentes son las náuseas, el vómito, el dolor abdominal y los escalofríos. Nuestro grupo ya demostró la eficacia y seguridad del lavado del DMSO y de los productos derivados de la lisis celular provocada por la congelación y descongelación de los progenitores hematopoyéticos, tanto con solución salina suplementada con Albúmina (SSA) como con Hidroxietil Almidón (Voluven®). En nuestro estudio nos planteamos comprobar si existían diferencias en seguridad y eficacia entre ambas soluciones de lavado, siendo nuestra hipótesis de trabajo que ambas ofrecen resultados equivalentes. Estudiamos un total de 158 pacientes sometidos a trasplante de progenitores hematopoyéticos entre septiembre de 2008 y julio de 2014, distribuidos en dos subgrupos según la solución de lavado empleada (96 pacientes con SSA y 62 pacientes con Voluven). El número total de lavados realizados fue 411 (229 con SSA y 182 con Voluven), que procedían de la congelación de 211 procesos de aféresis (130 con SSA y 81 con Voluven). En ambos grupos se utilizó para el lavado un sistema automatizado y cerrado para la eliminación de DMSO, mediante un procesador celular que consta de una cámara centrífuga para la separación de componentes sanguíneos según su densidad y tamaño (Sepax®). Para el análisis de las variables del producto celular (CNT, células CD34+, cultivos de colonias, viabilidad y cultivos microbiológicos) se tomaron muestras del producto fresco obtenido de la recolección de aféresis, del producto descongelado y del producto lavado. Estudiamos la seguridad del procedimiento, analizando la cinética del injerto y la tasa de aislamientos microbiológicos en las bolsas. Por otra parte, estudiamos la seguridad en el paciente analizando la incidencia de reacciones adversas, los días de fiebre, los días de hospitalización, el riesgo de deterioro renal y los aislamientos microbiológicos. No encontramos diferencias significativas entre ambas soluciones en cuanto al recuento de las células CD34+, a la viabilidad total o al número de colonias obtenidas en los cultivos clonogénicos ensayados. Objetivamos una pérdida significativa de CNT tras el lavado con ambas soluciones, que resultó mayor en el subgrupo lavado con SSA. En ningún caso se vio afectado el potencial de injerto. En el estudio comparativo de la tasa de contaminación bacteriana antes y después del lavado, no encontramos diferencias significativas cuando realizamos el análisis conjunto del total de la muestra; sin embargo, en el análisis por tipo de solución de lavado, la tasa de aislamientos microbiológicos decrece de forma significativa tras el lavado en el subgupo de Voluven®. Ambas soluciones evitan las reacciones adversas relacionadas con la infusión de progenitores hematopoyéticos de sangre periférica criopreservados con dimetilsulfóxido. Por lo tanto, ambas soluciones son igual de eficaces para el lavado de PHSP criopreservados, asegurando una buena recuperación de células CD34+, y preservando su viabilidad y potencial de injerto. Voluven representa una excelente alternativa como solución de lavado fácil de usar, con menor riesgo de contaminación y libre de productos de procedencia humana.

The cryopreservation of hematopoietic stem cells is an essential component of the clinical protocol of most hematopoietic stem cell transplants. The toxic effect of dimethyl sulfoxide (DMSO) on cells is well known, but it also generates other usually dose-dependent adverse effects during the infusion of the thawed cells to the patient. Complications can be mild like dizziness, or very severe like acute renal failure and cardiac arrest. But the most common are nausea, vomiting, abdominal pain and chills. Our group has already demonstrated in two separate works the efficacy and safety of washing the DMSO and the cell lysis derived products from the thawed hematopoietic progenitors, both with saline supplemented with albumin (SSA) and with hydroxyethyl starch (Voluven®). We now pretend to study whether there is any difference in safety or efficacy between both solutions, our working hypothesis being that both solutions offer similar results. We studied a total of 158 patients undergoing hematopoietic stem cell transplantation between September 2008 and July 2014, divided into two subgroups according to the washing solution used (96 patients with SSA and 62 patients with Voluven). A total of 411 washes were performed (229 SSA and 182 Voluven), corresponding to 211 apheresis processes (130 SSA and 81 Voluven). In both groups an automated and closed system was used for the washing, consisting in a cell processor with a centrifugal chamber used to separate the blood components according to density and size (Sepax®). To analyze the cell product variables (TNC, CD34 + cells, colonies cultures, viability and microbiological cultures) we obtained samples from the apheresis collection fresh product, from the defrosted product and from the washed product. We studied the safety of the procedure analyzing the engraftment kinetics and the rate of microbiological isolates from the bags. On the other hand, we studied the patient safety analyzing the incidence of adverse reactions, days of fever, days of hospitalization, the risk of renal impairment and microbiological isolates. We did not find any significant difference between both washing solutions in the number of CD34 + cells, viability, or clonogenic colonies. However, there was a significant loss of TNC after washing with both solutions, but it was higher in the subgroup washed with SSA. The engraftment potential was never affected. In the comparative study of the bacterial contamination rate before and after washing, no significant differences were found when analyzing the total sample. However, in the analysis by type of washing solution, the rate of microbiological isolates decreased significantly after washing with Voluven®. Both solutions prevented the adverse reactions related to the infusion of dimethyl sulfoxide cryopreserved peripheral blood hematopoietic progenitor cells. Therefore, both solutions are equally effective for washing PHSP cryopreserved, ensuring good recovery of CD34 + cells, and preserving the cells viability and engraftment potential. Voluven represents an excellent alternative washing solution easy to use, with less risk of contamination and free of human derived products.