2024-03-29T15:20:37Zhttps://www.tdx.cat/oai/requestoai:www.tdx.cat:10803/71982024-03-15T10:57:32Zcom_10803_236col_10803_690278
Assessing human growth hormone variants to determine their potential relevance in anti-doping and clinical analysis
Such Sanmartin, Gerard
Gutiérrez Gallego, Ricardo
Segura Noguera, Jordi
amplificació de senyal
superficial
ressonància de plasmó
caracterització d'anticossos
anticossos
anticossos anti-GH
dicroisme circular
síntesi en fase sòlida
thermolisinòlisis
thermolisina
purificació
generació
fragmentació de pèptids
fragmentació de proteïnes
proteòlisis limitada
GH44-191
GH1-191
22 kDa
GH1-43
20 kDa
17 kDa
5 kDa
humana
fragments de la hormona de creixement humana
isoformes de la hormona de creixement
variants de la hormona de creixement humana
Hormona de creixement humana
protocol
C-reactive protein
mannanbinding lectin
serum purification
blood purification
MALDI
mass spectrometry
western blot
immunoassay
SPR-based method
signal enhancement
surface plasmon resonance
anti-GH antibodies
characterisation of antibodies
antibodies
circular dichroism
solid phase synthesis
thermolysinolysis
thermolysin
generation
purification
fragmentation
peptide
protein fragmentation
mètode basat en SPR
limited proteolysis
GH1-191
GH44-191
GH1-43
22 kDa
20 kDa
17 kDa
5 kDa
human growth hormone fragments
human growth hormone isoforms
human growth hormone variants
Human growth hormone
immunoassaig
western blot
MALDI
espectrometria de massa
purificació de sang
purificació de sèrum
proteïna C-reactiva
mannan binding lectin
protocol
Human growth hormone (GH) participates in human longitudinal growth, lipid and carbohydrate metabolism, and comprises a remarkably number of proteins with similar sequences, generated either genetically or post-translationally, that in some cases show clearly differentiated biological activities. Current methods employed for its quantification are mainly based on a specific immunodetection of the most concentrated GH variants in blood circulation. However, it is not clear neither which variants are recognised in each case, nor which is the real concentration of some of these variants. Probably related, present immunoassays show a disparity of results between them that difficults the comparison of data from different assays, with direct consequences in the clinical field. Within a doping context, the illegal administration of recombinant GH constitutes a complex challenge, given the fact that the pharmaceutical variant and the native 22 kDa GH variant do not show any structural difference that allows a direct detection. However, the administration of the pharmaceutical inhibits the natural production of the hormone, resulting in modifications between the relative concentration of some of these variants. In this case, which variants are detected is of utmost importance, since these constitute the base of this anti-GH doping method. Here, the relevance of some GH variants is addressed, including their generation, characterisation, analysis through specific antibodies and their detection on biological samples.
L'hormona de creixement humana (GH) participa en el creixement post-longitudinal i en el metabolisme de lípids i carbohidrats, i comprèn un extraordinari nombre de proteïnes de seqüències similars, generades tant genèticament com posttranslacional, que en alguns casos mostren activitats biològiques clarament diferenciades. Els mètodes actuals emprats per la seva quantificació es basen principalment en una immunodetecció específica de les variants de GH més concentrades en circulació sanguínia. Tanmateix, no resta clar quines variants es reconeixen en cada cas, ni quina és la concentració real d'algunes d'aquestes variants. Possiblement relacionat, els immunoassaigs actualment utilitzats mostren una disparitat de resultats que dificulten la comparació de dades d'assaigs diferents, amb conseqüències directes en el camp clínic. Dins d'un context de dopatge, l'administració il·legal de GH recombinant constitueix un desafiament complex, donat el fet que la variant farmacèutica i la variant de GH nativa de 22 kDa no mostren cap diferència que permeti una detecció directa. No obstant, l'administració del medicament farmacèutic inhibeix la producció natural de la hormona, derivant en canvis entre la concentració relativa d'algunes d'aquestes variants. En aquest cas, és de màxima importància quines variants són detectades, ja que això constitueix la base d'aquest mètode d'antidopatge de GH. Aquí, s'estudia la rellevància d'algunes variants de GH, incloent-hi la seva generació, caracterització, anàlisi via anticossos específics i la seva detecció en mostres biològiques.
2010-04-09
2010-04-09
2010-04-09
2010-01-28
info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
9788469327265
http://www.tdx.cat/TDX-0409110-143047
http://hdl.handle.net/10803/7198
B.19112-2010
eng
ADVERTIMENT. L'accés als continguts d'aquesta tesi doctoral i la seva utilització ha de respectar els drets de la persona autora. Pot ser utilitzada per a consulta o estudi personal, així com en activitats o materials d'investigació i docència en els termes establerts a l'art. 32 del Text Refós de la Llei de Propietat Intel·lectual (RDL 1/1996). Per altres utilitzacions es requereix l'autorització prèvia i expressa de la persona autora. En qualsevol cas, en la utilització dels seus continguts caldrà indicar de forma clara el nom i cognoms de la persona autora i el títol de la tesi doctoral. No s'autoritza la seva reproducció o altres formes d'explotació efectuades amb finalitats de lucre ni la seva comunicació pública des d'un lloc aliè al servei TDX. Tampoc s'autoritza la presentació del seu contingut en una finestra o marc aliè a TDX (framing). Aquesta reserva de drets afecta tant als continguts de la tesi com als seus resums i índexs.
info:eu-repo/semantics/openAccess
Universitat Pompeu Fabra
TDX (Tesis Doctorals en Xarxa)