2024-03-30T08:17:38Zhttps://www.tdx.cat/oai/requestoai:www.tdx.cat:10803/1286702017-09-02T02:20:18Zcom_10803_1col_10803_105
TDX (Tesis Doctorals en Xarxa)
author
Tort Escribà, Núria
authoremail
nuria_tort2@hotmail.com
authoremailshow
false
director
Marco Colás, Ma. Pilar
director
Salvador Vico, Juan Pablo
tutor
Granados i Juan, Mercè
authorsendemail
true
2014-01-16T11:40:32Z
2014-01-16T11:40:32Z
2013-10-25
http://hdl.handle.net/10803/128670
B. 2146-2014
Aquesta tesi ha estat focalitzada en demostrar la possibilitat de crear plataformes de diagnòstic,
multiplexades i universals, a través de la hibridació de cadenes d'oligonucleòtids complementàries (DNA-directed immobilization, DDI). La multiplexació és possible degut al gran nombre de cadenes d'oligonucleòtids diferents que es poden crear al combinar les 4 bases nitrogenades de l'ADN (A, T, C i G), permetent detectar simultàniament tants analits diferents com cadenes d’oligonucleòtids es disposi. La universalitat, be donada per la possibilitat de regenerar una superfície amb una simple etapa de deshibridació, i reutilitzar-la per a la detecció d’analits de diferent naturalesa. Concretament, s'ha demostrat la possibilitat de crear microarrays d'haptens, emprant microarrays d'ADN i aprofitant l'especificitat de la reacció d'hibridació entre les cadenes d’oligonucleòtids immobilitzades en la superfície i les cadenes d'oligonucleòtids unides covalentment als diferents haptens. Com a prova de concepte, s'ha desenvolupat un microarray d’haptens esteroïdals per a l'anàlisi quantitatiu i multiplexat d'hormones anabolitzants amb detecció fluorescent. També s'ha demostrat la possibilitat d'utilitzar aquesta estratègia d'immobilització pel desenvolupament d'immunosensors òptics multiplexats basats en la ressonància del plasmó superficial per imatge (SPRi), evitant així la necessitat d’emprar marcadors per tal d’obtenir el senyal. Per altra banda, s'ha demostrat la universalitat de l'estratègia DDI, al emprar un microarray d'ADN per a la creació de superfícies nanoestructurades, posteriorment emprades com a transductors en immunosensors basats en la ressonància del plasmó superficial localitzat (LSPR). Concretament, cadenes d'oligonucleòtids han estat unides a nanopartícules d'or de diferents mides, que després han estat immobilitzades de forma controlada i selectiva sobre la plataforma, a través de la hibridació entre les cadenes d’oligonucleòtids complementàries. I finalment, també s’ha demostrat l’aplicabilitat de l’estratègia DDI per a la immobilització de proteïnes, al crear microarrays d’anticossos, en format estàtic i en flux, que han estat emprats per a la diferenciació de cèl•lules segons les proteïnes expressades en la membrana cel•lular.
cat
Nanopartícules
Nanopartículas
Nanoparticles
Oligonucleòtids
Oligonucleótidos
Oligonucleotides
Hormones
Hormonas
Enzimoimmunoassaig sobre fase sòlida
ELISA
Enzyme-linked immunosorbent assay
Xip d'ADN
Chip de ADN
DNA microarray
Desenvolupament d’una plataforma universal per a la multidetecció mitjançant la codificació espaial de cadenes d’ADN
info:eu-repo/semantics/doctoralThesis info:eu-repo/semantics/publishedVersion
URL
https://www.tdx.cat/bitstream/10803/128670/1/NTE_TESI.pdf
File
MD5
8ad439cf000b7175590a7f62fa7b23b7
14552265
application/pdf
NTE_TESI.pdf
URL
https://www.tdx.cat/bitstream/10803/128670/2/NTE_TESI.pdf.txt
File
MD5
49d34a8739a250599b07fa546b8f6f6a
924791
text/plain
NTE_TESI.pdf.txt