2024-03-28T16:29:52Zhttps://www.tdx.cat/oai/requestoai:www.tdx.cat:10803/71492024-03-15T10:57:25Zcom_10803_236col_10803_690278
00925njm 22002777a 4500
dc
Zapater Enrique, Meritxell
author
2006-12-01
En el llevat Saccharomyces cerevisiae els canvis en les condicions osmòtiques del medi extracel.lular són sensades per la MAP cinasa Hog1, la qual permet dur a terme l'adaptació cel.lular mitjançant la modulació de l'expressió gènica, de la traducció i de la progressió del cicle cel.lular. A l'inici d'aquest projecte de tesi, els mecanismes pels quals Hog1 controla l'expressió gènica no eren del tot coneguts. El nostre objectiu va ser caracteritzar el mecanisme molecular pel qual Hog1 modula la transcripció en resposta a estrès osmòtic. Hem aconseguit demostrar que el reclutament de Hog1 als promotors sensibles a estrès osmòtic per part del factor de transcripció és essencial per al reclutament i activació de la RNA polimerasa II, mecanisme que podria estar conservat en les cèl.lules eucariotes. També hem identificat noves activitats remodeladores de cromatina implicades en la resposta gènica a osmoestrès mediada per Hog1. Vàrem realitzar un cribatge genètic per identificar mutacions que provoquessin osmosensibilitat i una reducció en l'expressió de gens de resposta a estrès osmòtic. Aquest cribatge ens va permetre identificar nous reguladors de la transcripció mediada per osmoestrès: la histona deacetilasa Rpd3 i els complexes SAGA i mediador. Els nostres resultats permeten, doncs, definir un important paper per a Rpd3, SAGA i mediador en la inducció gènica mediada per Hog1, i han estat importants per assolir una millor visió de com les cinases activades per estrès regulen la iniciació de la transcripció.
In Saccharomyces cerevisiae, changes in the extracellular osmotic conditions are sensed by the HOG MAPK pathway, which elicits the program for cell adaptation, including modulation of gene expression, translation and cell-cycle progression. At the beginning of this PhD Project, the mechanisms by which Hog1 was controlling gene transcription were not completely understood. Our main objective was to characterize the molecular mechanisms by which the Hog1 MAPK modulates transcription upon osmostress. We have shown that anchoring of Hog1 to osmoresponsive promoters by the transcription factor is essential for recruitment and activation of RNA polymerase II, a mechanism that might be conserved among eukaryotic cells. In addition, we identified novel chromatin modifying and remodelling activities involved in the Hog1-mediated osmostress gene expression. We performed a genome-wide genetic screening searching for mutations that render cells osmosensitive and displayed reduced expression of osmoresponsive genes. Rpd3 histone deacetylase, SAGA and Mediator complexes were identified as novel regulators of osmostress-mediated transcription. Thus, our results define a major role for Rpd3, SAGA and Mediator in the Hog1-mediated osmostress gene induction, and have been important to achieve a better view of how a SAPK regulates transcription initiation.
9788469248461
http://www.tdx.cat/TDX-0713109-112447
http://hdl.handle.net/10803/7149
B.32335-2009
Rpd3 histone deacetylase
genetic screening
mediator
SAGA
Hot1
RNA polymerase II
saccharomyces cerevisiae
gene transcription
osmostress
stress-activated kinase (SAPK)
MAP kinase
Hog1
promotors de resposta a osmoestrès
immunoprecipitació de cromatina (ChIP)
osmosensibilitat
cribatge genètic
Rpd3 histona deacetilasa
mediador
SAGA
Hot1
RNA polimerasa II
saccharomyces cerevisiae
transcripció gènica
estrès osmòtic
cinasa activada per estrès (SAPK)
MAP cinasa
Hog1
osmosensitivity
chromatin immnunoprecipitation (ChIP)
osmoresponsive promoters
Control of transcription initiation by the stress activated hog1 kinase