Estrés oxidativo y expresión de proteínas relacionadas en enfermedades de alto riesgo cardiovascular: estudio especial de la hipertensión arterial

Abstract

Entre las múltiples y variadas implicaciones fisiopatológicas del Estrés Oxidativo, los<br/>trastornos cardiovasculares son, sin duda, uno de los objetivos prioritarios y motivo de<br/>interés de un gran número de investigadores biomédicos.<br/>Uno de los principales factores de riesgo es el desarrollo de una serie de enfermedades<br/>frecuentes en nuestra población como son la hipertensión arterial y las dislipemias.<br/>Éstos trastornos, tienen una vinculación más o menos estrecha, directa o indirecta con el<br/>fenómeno que conocemos como estrés oxidativo y los 3 tipos de patologías poseen<br/>aumentados los niveles de EO de manera que se potencia el riesgo de aparición de eventos<br/>cardiovasculares.<br/>Objetivo de este estudio es comparar los niveles de EO en las diferentes patologías<br/>cardiovasculares seleccionadas (HTA con y sin Síndrome Metabólico asociado, HF y HFC)<br/>midiendo la respuesta de las células mononucleares frente al EO crónico a través de la<br/>medida de los niveles de ARNm de las actividades antioxidantes en cada una de ellas.<br/>Dicho estudio comparativo se va a realizar mediante el análisis de los siguientes<br/>parámetros oxidativos en orina, plasma y en células circulantes de los grupos seleccionados<br/>y el grupo control:<br/>1.- Estudio de los productos de oxidación, marcadores de EO y metabolitos relacionados<br/>(GSH, GSSG, 8-oxo-dG nuclear, mitocondrial y urinaria, MDA, proteínas carboniladas y<br/>niveles de NO3/NO2 .<br/>2.- Determinación de la actividad de los principales sistemas antioxidantes y prooxidante<br/>(SOD Cu-Zn y Mn, Cat, GPx, GSR y XO) .<br/>3.- Cuantificación de los niveles de ARNm por RT-PCR cuantitativo a tiempo real, de los<br/>genes que codifican dichas actividades enzimáticas, además de OGG1 y G6PDH.<br/>CONCLUSIONES<br/>· 1) En las tres patologías, HTA, HF y HFC, los resultados obtenidos sugieren que el<br/>EO representa un mecanismo común y subyacente en la patogenicidad de dichos<br/>procesos y posiblemente contribuya al desarrollo de complicaciones<br/>cardiovasculares, si bien, el mecanismo bioquímico-molecular responsable del<br/>proceso oxidativo presenta características diferenciales entre ellas, así como la<br/>intensidad de respuesta al EO.<br/>· 2) Los niveles elevados de EO en estas patologías no dependen exclusivamente de<br/>un aumento en su producción ya que existe una menor actividad antioxidante. La<br/>disminución de los mecanismos antioxidantes se debe principalmente a:<br/>- Actividad reducida de los genes antioxidantes y del sistema GSH.<br/>- Menores niveles de ARNm, disminuyendo así su capacidad de producir enzimas<br/>y sistemas protectores frente a EO.<br/>· 3) Los pacientes de HTA sin tratamiento se encuentran peor protegidos frente a<br/>EO que los controles, a pesar de la activación de algunos sistemas antioxidantes<br/>como el sistema Tiorredoxina y la enzima Manganeso Superóxido Dismutasa.<br/>· 4) Los pacientes de HTA con y sin síndrome metabólico asociado no presentan<br/>diferencias significativas entre sí, lo que nos confirma que es la HTA el factor<br/>asociado al estrés oxidativo, siendo indiferentes las otras características que<br/>determinan el diagnóstico de síndrome metabólico.<br/>· 6) La hipertensión arterial progresa con una marcada oxidación del material<br/>genético que se verifica por el aumento en la producción de la base modificada y<br/>mutagénica 8-oxo-dG como resultado del estrés oxidativo y de la disminución de<br/>enzima reparadora OGG1 en las células mononucleares de los pacientes hipertensos.<br/>· 7) De los marcadores analizados, la liberación de 8-oxo-dG en orina es el parámetro<br/>más representativo del estrés oxidativo en la hipertensión arterial.<br/>· 8) Los tres modelos de EO crónico analizados poseen un aumento en los niveles de<br/>EO pero distinta intensidad en su respuesta. Los pacientes se encuentran<br/>desprotegidos frente al EO.

The main aim of this study is to compare the EO levels in some different cardiovascular<br/>diseases, previously selected (control, HTA with and without an associate metabolic<br/>syndrome, HF and HFC), by measuring the response of mononuclear cells against the<br/>chronicle EO through the RNAm level in the antioxidant activity of each one.<br/>This comparative study is carried out in different groups by the analyse of different<br/>oxidative parameters in urine, plasma and circulated cells.<br/>1.- Study of oxidation products , EO markers and related metabolites.<br/>2.- Main antioxidant and prooxidant systems activity determination.<br/>3.- RNAm level quantification by a real time quantitative RT-PCR.<br/>CONCLUSIONS:<br/>1.- The results of the three pathologies (HTA, HF and HFC) propose that EO represents a<br/>common and underlying mechanism in their pathologies process and probably it<br/>contributes to develop cardiovascular complications, although the responsible<br/>biochemistry-molecular mechanism of the oxidative process shows many different<br/>features between them.<br/>2.- The high levels of EO in these pathologies do not exclusively depends on an increase<br/>of its production because the oxidant activity is lower.<br/>3.- HTA patients without a treatment are worse protected against EO that the controled<br/>ones, despite of the activation of some antioxidant systems like Tiorredoxine System<br/>and SOD Mn enzyme.<br/>4.- HTA patients with and without the associated metabolic syndrome do not show<br/>great differences between them, so it confirms that HTA is the associated factor to the<br/>oxidative stress.<br/>5.- The High blood pressure progresses with a high oxidation of the genetic material,<br/>that it is verified by the increase of the production of modify base and mutagenig 8-<br/>oxo-dG as a result of oxidative stress and the decrease of repairing enzyme OGG1 in<br/>the mononuclear cells.<br/>6.- In analysed markers, the 8-oxo-dG liberation in urine is the most representative<br/>parameter of oxidative stress in high blood pressure.<br/>7.- The three EO chronicle models analysed have an increase on EO level but different<br/>intensity in their response so patients are unprotected against EO.