Estudio clínico y aplicación diagnóstica y pronóstica de los biomarcadores proteómicos salivares en el cáncer epidermoide faringolaríngeo

Author

Pelegrín Hernández, Juan Pablo

Director

Hellín Meseguer, Diego

Cabezas Herrera, Juan

Date of defense

2015-12-14

ISBN

978-84-608-6147-8

Pages

281 p.



Abstract

El Cáncer Epidermoide de Cabeza y Cuello (CECC) es una entidad neoplásica maligna que se origina en el epitelio que recubre la mucosa de la vía areodigestiva. Frecuentemente se diagnostica en etapas avanzadas de la enfermedad, lo que le confiere un pronóstico sombrío. En la actualidad resulta paradójico que, con los medios disponibles, no tenemos programas eficaces para la detección precoz de este tipo de tumores. Con esta Tesis nos proponemos, como objetivo general, analizar la capacidad diagnóstica y pronóstica de las sondas salivares ABPP (Activity Based Protein Profile) para la identificación de enzimas Serina Hidrolasas (SH), que, por su conocida relación con la proliferación celular y tumorogénesis, pueden ser utilizadas como Biomarcadores Proteómicos en el cáncer epidermoide faringolaríngeo. Como objetivos específicos nos planteamos la descripción de los factores clínicopatológicos clásicos y la estimación de la Supervivencia Global (SG) y Libre de Enfermedad (SLE) de los pacientes tratados quirúrgicamente en nuestro Hospital. Para alcanzar estos objetivos se diseñó un estudio observacional, longitudinal, ambispectivo y con componentes analíticos de todos los pacientes con diagnóstico de carcinoma epidermoide faringolaríngeo que cumplieron los criterios de inclusión y exclusión, previamente definidos, durante el período comprendido entre Enero de 2008 / Diciembre de 2012. Las muestras salivares fueron recogidas por profesionales del Servicio de Otorrinolaringología y procesadas en el Laboratorio de Terapia Molecular. El análisis estadístico se realizó mediante el software SPSS15.0; constó de una parte descriptiva y otra inferencial (prueba de “Chi cuadrado” para variables cualitativas y “T de Student” para cuantitativas). Se utilizó el estimador de “Kaplan-Meier” y la prueba de “Mantel-Cox” (Log Rank) para el estudio univariante de la SG y el “método Regresión de Cox” para el multivariante. Se analizó la validez de las sondas salivares ABPP como prueba diagnóstica, mediante curvas ROC y pruebas de Sensibilidad y Especificidad. Se incluyeron en el estudio un total de 112 pacientes, con una media de edad de 62,52 años (mínima de 38 y máxima de 87). La mayoría de ellos eran varones (97,3%), con una relación hombre/mujer de 36 a 1 y se encontraban en el momento diagnóstico en fases avanzadas de la enfermedad (58,9%). La localización laríngea fue la más frecuentemente afectada (87,5%). La cirugía endoscópica mediante láser CO2, fue la modalidad quirúrgica más empleada en tumores iniciales (T1) y la Laringectomía Total (LT) en tumores avanzados (80,4%). Los perfiles de las sondas salivares ABPP, establecidos mediante el análisis jerárquico por el método WARD, se asociaron de forma significativa con los factores pronósticos clásicos y mostraron diferencias en la estimación de la SG (p=0,044). La estimación de SG para la serie fue de 47,40 meses y la SLE de 55,22 meses. Los parámetros que mostraron mayor potencia estadística en el análisis multivariante de supervivencia fueron: la presencia de adenopatías metastásicas (Exp(b):5,14), la asociación de comorbilidades (2,37), el perfil proteómico de las sondas ABPP (3,33) y el estadio tumoral (5,07). El análisis conjunto de las bandas 33, 62-65 y 80 presentaron una Sensibilidad de 83,1, una Especificidad de 63,5 y un Área Bajo la Curva (AUC) de 0,80; encontrándose diferencias estadísticamente significativas entre el proteómico de las bandas 33 y 80, para el grupo control y los pacientes en estadios iniciales de la enfermedad (p=0,001). Se puede concluir que el marcaje de saliva con sondas ABPP tiene por un lado potencial para el desarrollo de programas de cribado que ayuden al diagnóstico en fases precoces de la enfermedad en pacientes con alto riesgo, y por otro potencial para predecir la evolución y el seguimiento en los pacientes con CECC, pudiendo complementar a los factores pronósticos clásicos conocidos.


The Head and Neck Squamous Cell Carcinoma (HNSCC) is a malignant neoplastic disease that originates in the epithelium that covers the mucous one of the areodigestive route. Frequently, it is diagnosed in advanced stages of the disease, which provides a difficult forecast. Nowadays, it turns out paradoxical that, with the available means, we do not have effective programs for the early detection of this type of tumours. Within this Thesis we propose, as a general aim, to analyse the diagnosis and prognosis capacity of the salivary probes ABPP (Activity Based Protein Profile) for the identification of enzymes Serine Hydrolases (SH), which, for his known relation with the cellular proliferation and tumorigenesis, can be used as Proteomics Biomarkers in pharyngolaryngeal cancer. As specific objectives, we propose the description of the classical clinicopathological factors and estimation of the Overall Survival (OS) and Disease Free Survival (DFS) of patients surgically treated in our hospital. To achieve these objectives, previously defined, observational, longitudinal, ambispective study with analytical components of all patients diagnosed with squamous cell carcinoma pharyngolaryngeal who met criteria for inclusion and exclusion study, was designed during the period from January 2008 to December 2012. Salivary samples were collected by professionals in the Department of Otolaryngology and they were processed at the Molecular Therapy Laboratory. Statistical analysis was performed using SPSS©15.0 software; it consisted of two different parts: a descriptive and an inferential (“chi square” test for qualitative variables, and Student´s T for quantitative variables."Kaplan-Meier" estimator and "Mantel-Cox" (log rank) proof were used for the univariate analysis of SG and the "Cox Regression method" were used for multivariate. The validity of the salivary ABPP probes as diagnostic test, using ROC curves, sensitivity and specificity were analysed. A total of 112 patients were included in the study, within an average age of 62.52 years (38-87). Most of them were male (97.3%), with a male / female ratio of 36-1 and they were at diagnosis in advanced stages of the disease (58.9%). Laryngeal site was the most frequently affected (87.5%). Endoscopic CO2 laser surgery was the most common surgical method in initial tumours (T1), and total laryngectomy (TL) in advanced tumours (80.4%). The reports of salivary ABPP probes, established by the hierarchical analysis by the WARD´s method, were significantly associated with traditional prognostic factors and they showed differences in the estimation of the SG (p = 0.044). SG estimation for the series was 47.40 months and 55.22 months for DFS. The parameters that showed greater statistical power in multivariate survival analysis were the presence of lymph node metastases (Exp (b):5,14), the association of comorbidities (2,37), the proteomic profile of ABPP probes (3,33) and tumour stage (5,07). The combined analysis of the bands 33, 62-65 and 80 had a sensitivity of 83.1, specificity of 63.5 and an area under the curve (AUC) of 0.80; within statistically significant differences between proteomic profile of the bands 33 and 80, for the control and patients in early stages of the disease (p = 0.001). It can be concluded that labeling of ABPP saliva probes has, on the one hand, potential for the development of screening programs to assist the diagnosis in the early stages of the disease in high-risk patients, and on the other hand, it has the potential to predict the evolution and monitoring in patients with HNSCC, which can be complemented by known classic forecast factors.

Keywords

Laringe-Cáncer; Cáncer-Tratamiento

Subjects

616 - Pathology. Clinical medicine; 616.2 - Pathology of the respiratory system. Complaints of the respiratory organs

Knowledge Area

Ciencias de la salud

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