Aplicación diagnóstica de PCR para detección de Streptococcus constellatus en pericoronaritis.

Abstract

La pericoronaritis es una patologia infecciosa que suele producirse con frecuencia alrededor del tercer molar, cuando este erupciona. Suele manifestarse con mayor frecuencia en molares inferiores, cursando clinicamente con dolor y exsudado, traendo implicaciones y complicaciones severas al paciente si el diagnóstico y el enfoque terapeutico no sea el correcto. Por su naturaleza polimicrobiana la pericoronaritis tiene un caracter patogeno puesto de manifiesto onde se describen con mayor problemas de cultivo los Streptococcus responsábles por esta patologia, o sea, el grupo milleri. Por todo esto se ha empleado la tecnica molecular de PCR para comprovar si los cebadores diseñados, en el estudio empirico anteriormente presentado, serian especificos para cada una de las cepas bacterianas descritas. Se ha extraido el DNA de las colonias aisladas, mediante un protocolo previamente elaborado. Se ha ajustado la PCR a cada par de cebadores, empleando las cepas de Streptococcus grupo milleri como controles positivos. Para comprovar la especificidad empírica de los cebadores diseñados se realizaron pruebas cruzadas de DNA aislado de otras cepas del género Streptococcus y otras bacterias orales. Por fin, se llevó a cabo la analisis de muestras clínicas de casos de pericoronaritis y controles, analizando por duplicado cada par de cebadores en cada una de ellas. Cada bacteria ha sido examinada con dos juegos de primers, con el fin de reducir la posibilidad de falsos negativos derivados de una variabilidad en la secuencia genética. La viasualizacion de resultados se ha realizado por electoforesis en gel de agarosa a 1% con gel red.