TDX/TDR - Departament de Medicina Preventiva, Salut Pública, Bromatologia, Toxicologia i Medicina Legal

Alimentación universitaria: aspectos nutricionales, microbiológicos y toxicológicos

Tue, 12 Jun 2012 12:09:43 GMT

Alimentación universitaria: aspectos nutricionales, microbiológicos y toxicológicos Sospedra López, Mª Isabel En las últimas décadas la restauración colectiva universitaria ha adquirido gran importancia. Es importante garantizar la calidad y variedad de los menús desde un aspecto nutricional como microbiológico o toxicológico. El control del nivel de compuestos polares en aceites y grasas usados es una medida de prevención frente a tóxicos de origen químico. El estudio de la prevalencia de Anisakis simplex en muestras de pescado es una medida para garantizar la seguridad alimentaria. Los servicios de restauración deben cumplir determinadas normas de higiene para la elaboración, distribución y comercio de comidas preparadas con la finalidad de mantener una calidad microbiológica adecuada. El riesgo producido por la presencia de microorganismos en los alimentos no viene representado únicamente por las bacterias presentes sino, también por las toxinas bacterianas. Entre ellas merecen especial atención las de E. coli y S. aureus. E. coli es una bacteria frecuentemente asociada con toxiinfecciones e intoxicaciones alimentarias. En condiciones normales, constituye una parte esencial de la flora bacteriana humana, sin embargo, existen cepas capaces de provocar alteraciones graves en forma de enteritis. Este grupo de cepas se denomina E. coli enterotoxigénico (ETEC) y se transmiten a través de los alimentos o el agua contaminada por heces animales o humanas. La toxina termo-lábil (HLT) es su principal factor de virulencia. S. aureus es la bacteria enterotoxigénica más corriente de los alimentos. Las cepas toxigénicas de S. aureus pueden producir más de una enterotoxina aunque la enterotoxina del tipo A es la que con más frecuencia aparece en los brotes de intoxicación alimentaria, seguida de los tipos B y D. Merece especial atención la toxina 1 del síndrome del shock tóxico (TSST-1). El desarrollo de técnicas rápidas y selectivas para la identificación y cuantificación de toxinas bacterianas contribuirá a garantizar la seguridad alimentaria.; The catering service at university has become very important in all developed countries in recent decades. Consumers are increasingly demanding healthy and safe food, with better nutritional properties. Meals served must ensure the nutritional quality and limit the exposure to different contaminants that can be found in food. It is therefore important to ensure the quality and variety of menus offered daily, from a nutritional viewpoint as microbiological or toxicological. University students have a special interest because many of them assume, for the first time, responsibility for their meal. Dietary habits established by university students when they are away from home, can have a significant effect on their health, determining or modifying the risk of nutrition-related diseases. In addition to the nutritional hazards it is desirable to identify, assess and prevent hazards from physical, chemical or biological origin that can affect food safety, in order to implement appropriate measures to reduce or eliminate hazards to acceptable health standards. University restaurants are catering services, where transformation of food is done to serve customers. The food served must have adequate sanitary and organoleptic quality, it is also important to safeguard the safety, as these foods may be responsible for food poisoning. Monitoring of polar compounds (legislated in Spain) in oils and fats used is a preventive measure against toxic chemical hazards. These are compounds formed in used oils as a result of changes in fats and oils during frying processes. The presence of external substances with biological origin in foods can also be cause of foodborne disease (FBD). Products consumed in university establishments can be vectors of several biological contaminants, mainly parasites and bacteria. It is therefore important to have systematic monitoring of the microbiological quality of the food served. A large number of marine and freshwater fish can serve as a source of medically important parasitic zoonoses. The most important of the fish-borne helminthes are anisakid nematodes (particularly Anisakis simplex). On the other hand, restaurants must meet certain hygiene standards for production, distribution and trade of ready meals in order to assess the quality and microbiological safety of food. The toxicological hazard caused by the presence of microorganisms in food is not represented only by bacteria present in food; but also bacterial toxins in foods eaten are important. Among them deserve particular attention for E. coli and S. aureus toxins. E. coli is a bacteria often associated with outbreaks and food poisoning. Under normal conditions, constitutes an essential part of human bacterial flora, however, there are strains capable of causing serious diseases as enteritis. This group of strains is called enterotoxigenic E. coli (ETEC) and is transmitted through food or contaminated water by animal or human feces. ETEC labile toxin (LT) is the major virulence factor of ETEC. S. aureus is the most common toxigenic bacteria in food. It is responsible for most annual cases of food poisoning caused by ingestion of foods where enterotoxins have been preformed. Toxigenic strains of S. aureus can produce more than one enterotoxin although enterotoxin type A is the most frequently found in outbreaks, followed by types B and D. S. aureus produce also toxic shock syndrome toxin 1 (TSST-1), previously classified as enterotoxin F, which has not been extensively studied in restaurants. The development of rapid and effective techniques for enterotoxin isolation and identification represent a great advantage for the evaluation of its toxicity and to quantify the amount of toxin produced by strains isolated from food. This will contribute to food security and thereby safeguard consumers´ health in university restaurants.

Evaluación del estado de salud y nutricional de pacientes celiacos de la Comunidad Valenciana

Tue, 12 Jun 2012 10:48:50 GMT

Evaluación del estado de salud y nutricional de pacientes celiacos de la Comunidad Valenciana Pelegrí Calvo, Cristina Celiac disease is an autoimmune pathology characterized by a chronic inflammation of the proximal part of the small intestine, caused by exposure to a vegetable protein present in some cereals called gluten. These cereals are wheat, barley, rye and, possibly by cross-contamination issues, oats. Due to a cell-mediated immune response towards gluten, changes in the structure and function of the small intestine mucosa occur, so the gut loses its ability to digest and absorb nutrients from food. The main symptoms are among others, chronic diarrhea, nutritional deficiencies of iron, vitamin B12, vitamin D, increased risk of developing T-cell lymphoma, bloating and abdominal pain, steatorrhea, malnutrition, short stature, delayed puberty, normal fatigue, depression, infertility, rickets, osteopenia, muscle cramps, dental hypoplasia and injury in the pancreas, liver and thyroid. OBJECTIVES: - To evaluate energetic and nutritionally celiac patients from Valencia and verify if their intakes fit with the recommended intake and nutritional goals for the Spanish population. - To determinate delays in the diagnosis of disease, symptoms suffered, recovery after the diagnosis, quality of life and social disruption, the prevalence of other diseases, reproductive problems, prevalence of celiac disease in close relatives and the recommendations of the patient. - To evaluate de utility of the educational workshops to acquire knowledge in celiac children. PATIENTS AND METHODS: A total of 166 patients, 98 adults and 66 children aged 2-14 years with celiac disease were assessed in the survey during the years 2009-2010. RESULTS: In adults, the mean delay in diagnosis was eleven years and the mean of doctors consulted before setting de diagnostic was six. Celiac patients failed to perform many activities because of their particular diet: eating at restaurants, traveling, going to birthday parties, etc... The prevalence of osteoporosis or osteopenia was twice as frequent among those who were diagnosed in the adult stage. 95% of celiacs found difficulties about reading food labels. In children, knowledge about celiac disease and healthy nourishment increased with the educational workshop.; INTRODUCCIÓN La enfermedad celíaca es una enfermedad autoinmune caracterizada por una inflamación crónica de la parte proximal del intestino delgado, causada por la exposición de una proteína vegetal llamada gluten de algunos cereales en la dieta: trigo, cebada, centeno y posiblemente avena. Debido a los cambios en la estructura y función de la mucosa del intestino delgado, se pierde la capacidad de digerir y absorber los nutrientes de la comida. La principal causa de este trastorno es una reacción inmunológica mediada por células, hacia los componentes del gluten. La diana de la respuesta inmunológica es la gliadina, proteína presente en el gluten. Los principales síntomas son debidos a la pérdida de las vellosidades normales del intestino delgado, con la consiguiente disminución de la superficie de absorción de nutrientes. Entre otros, destacan la diarrea crónica, carencias nutritivas vitaminas y minerales, aumento del riesgo de desarrollar un linfoma de células T, distensión y dolor abdominal, esteatorrea, desnutrición, talla baja, retardo puberal, fatiga extrema, depresión, infertilidad, raquitismo, osteopenia, calambres musculares, hipoplasia dentaria y lesiones en páncreas, hígado y tiroides. OBJETIVOS: -Evaluar energética y nutricionalmente a los pacientes celíacos de la Comunidad Valenciana. -Conocer la tardanza en el diagnóstico de la enfermedad, los síntomas padecidos, la recuperación, la calidad de vida, la prevalencia de otras enfermedades, alteraciones en la reproducción, prevalencia en familiares próximos y las recomendaciones del enfermo. -Comprobar la eficacia de los talleres de alimentación infantil. MATERIALES Y MÉTODOS: 166 pacientes completaron un cuestionario de salud internacional para celíacos, 98 adultos y 68 niños. En la evaluación nutricional participaron 139 personas, 71 adultos y 68 niños. RESULTADOS: Se aprecia una progresiva merma de peso y talla medios desde las edades inferiores hasta la adolescencia. El perfil de distribución de nutrientes energéticos está descompensado, con déficit de carbohidratos y fibra y exceso de proteínas. Tras la asistencia de los niños celíacos a un taller educativo, se incrementaron las calificaciones de un test conocimientos sobre alimentación saludable y específica para celíacos. En adultos, el retraso medio en el diagnóstico fue de once años y la media de seis médicos consultados antes de confirmarse la EC, lo cual sugiere la necesidad de una mayor concienciación entre los facultativos sobre la variedad de manifestaciones clínicas. Las altas prevalencias de EC en grupos de riesgo sugieren que la utilización de tests de anticuerpos podrían reducir los retrasos en los diagnósticos. Los hechos de que todos los pacientes que padecen osteoporosis u osteopenia hayan sido diagnosticados en la edad adulta y de que sean casi dos veces más frecuente entre los que tardaron más de cinco años en ser diagnosticados confirman que un diagnóstico temprano de la EC reduciría la prevalencia de estas patologías. Dada la dificultad de determinar si los alimentos contienen o no gluten, sería necesario que los fabricantes aportaran un etiquetado completo y preciso de las fuentes de gluten y que los servicios de restauración proveyeran de una información rigurosa sobre la cantidad de gluten de la comida servida. El impacto de la DSG sobre la calidad de vida es muy alto. Al 85% de los celíacos le parece muy difícil el seguir una dieta estricta sin gluten, el 78% evita los restaurantes; el 46% los viajes y el 92% viaja con comida sin gluten. Entre los niños, el 29% dejó de hacer actividades en el colegio o con amigos a causa de la EC, el 66% se sintió diferente a los demás niños, el 27% sintió vergüenza al llevar alimentos sin gluten a fiestas y el 67% se ha enfadado por tener que seguir una dieta especial.

Interacción genético-ambiental en la modulación de adipocitoquinas y marcadores de inflamación en su asociación con obesidad y otros factores de riesgo cardiovascular en población mediterránea

Mon, 28 May 2012 09:54:08 GMT

Interacción genético-ambiental en la modulación de adipocitoquinas y marcadores de inflamación en su asociación con obesidad y otros factores de riesgo cardiovascular en población mediterránea Ortega Azorín, Carolina La obesidad es una enfermedad metabólica resultado del desequilibrio entre el consumo y el gasto energético, con el consecuente aumento de la cantidad de grasa corporal. Este aumento de grasa corporal produce un desequilibrio en la secreción de adipocitoquinas y marcadores de inflamación relacionado con diversas complicaciones clínicas asociadas con la obesidad y otros factores de riesgo cardiovascular. Las investigaciones de las últimas décadas han permitido un notable aumento en la compresión de los mecanismos moleculares que regulan la homeostasis de la energía, poniendo de manifiesto la importancia de los factores ambientales en la modulación de las reservas energéticas. Además, la variabilidad individual en la respuesta a estos factores ambientales refleja la influencia de la carga genética en la regulación de la energía, demostrando la existencia de una relación sinérgica entre los genes, la conducta y el medio ambiente en el desarrollo de la obesidad. De ahí estriba la importancia del estudio de las interacciones gen*ambiente en el desarrollo de las enfermedades de origen multifactorial como es el caso de la obesidad. Entre los distintos factores ambientales en la prevención de la obesidad, tras décadas en las que las recomendaciones dietéticas estaban basadas en una dieta baja en grasa, en los últimos años la dieta mediterránea se esta imponiendo como alternativa más saludable. Actualmente en España se está llevando a cabo el estudio PREDIMED (Prevención con Dieta MEDiterránea); ensayo prospectivo, aleatorizado, multicéntrico y controlado de intervención para analizar los efectos de la dieta mediterránea en la prevención primaria de la enfermedad cardiovascular. Nuestro grupo investigador participa como el nodo de Valencia donde se han reclutado 1050 participantes con elevado riesgo cardiovascular constituyendo el tamaño muestral de esta tesis doctoral. Se realizó un estudio transversal del estudio PREDIMED de Valencia, centrándonos en los datos de la visita basal. Se analizó la concentración de adiponectina, leptina y ácidos grasos no esterificados (AGNE) y su modulación por factores ambientales (tabaco, actividad física y dieta), así como la influencia de polimorfismos en genes candidatos (ADIPOQ, ADIPOR1, LEP, RLEP, GHRL, GHSR, PYY, MC4R, CNR1, BDNF, NPY2R, KCNJ11, ABCC8, ENPP1, TSPAN8, CD36, MLXIPL, MCM6 y NR1H3) y su asociación con obesidad y otros factores de riesgo cardiovascular, como con parámetros relacionados (datos bioquímicos y antropométricos, presión arterial y marcadores de inflamación) y las variaciones fenotípicas expresadas en función de las interacciones gen*gen y gen*ambiente. Los resultados más relevantes han mostrado que, la concentración plasmática de adiponectina en esta población se relaciona con un perfil lipídico más favorable y una menor presencia de factores de riesgo cardiovascular. En cambio, las concentraciones de leptina y AGNE se muestran aumentadas en individuos con mayor peso y un perfil de riesgo cardiovascular más desfavorable. También algunas de las variantes genéticas estudiadas han mostrado importantes asociaciones significativas con los fenotipos de interés (niveles de adipocitoquinas y de AGNE, parámetros bioquímicos y antropométricos y presión arterial), además de una elevada relevancia en el riesgo de obesidad y otros factores de riesgo cardiovascular. Paralelamente, se han detectado interacciones gen*gen en la determinación de factores relacionados con la obesidad. Estas interacciones muestran que el impacto de una variante genética sobre un fenotipo también puede depender de la presencia de otra variante en otro gen distinto. Del mismo modo, hemos encontrado interacciones gen*ambiente, donde se observa que los efectos de determinadas variantes genéticas pueden ser modulados por distintos factores ambientales. Por lo que la detección de estas modulaciones constituye una evidencia de la importancia de la consideración tanto de factores genéticos como ambientales en el estudio de la obesidad y otros factores de riesgo cardiovascular.; Obesity is a metabolic disease associated with several cardiovascular risk factors (CVRF). Environmental factors have a major impact on the obesity modulation, however, individual variability in response to these factors highlights the influence of genetic profile. That is the reason of the importance of the study of gene*environment interactions in determining obesity and other CVRF. We have carried out a cross-sectional study on participants in PREDIMED (PREvención DIeta MEDiterránea) trial who were recruited in the Valencia field center. This study is a randomized interventional trial, to assess the effects of the Mediterranean Diet on the primary prevention of cardiovascular disease. We included 1050 participants and baseline concentrations of adiponectin, leptin and non-esterificated fatty acids (NEFA) were analyzed. Moreover, the modulation of these parameters by environmental factors (smoking, physical activity and diet), and the influence of polymorphisms in candidates genes (ADIPOQ, ADIPOR1, LEP, RLEP, GHRL, GHSR, PYY, MC4R, CNR1, BDNF, NPY2R, KCNJ11, ABCC8, ENPP1, TSPAN8, CD36, MLXIPL, MCM6, and NR1H3) was analyzed. In addition, the associations and interactions between these polymorphisms and environmental factors in determining obesity and other CVRF including biochemical and anthropometric data and blood pressure were studied also focusing on gene*gene and gene*environment interactions. Our results have shown that the plasma concentration of adiponectin was associated with a lower cardiovascular risk profile. However, the increased leptin and NEFA concentrations were associated with a less favourable cardiovascular risk profile. Moreover, some of the genetic variants studied showed significant associations with concentrations of adiponectin, leptin and NEFA. In addition, other biochemical and anthropometric parameters and blood pressure were associated with the selected polymorphisms. We have detected some gene*gene interactions in the evaluation of obesity related factors. These interactions showed that the impact of a genetic variant on the selected phenotype may also depend on the presence of another variant in another different gene. Similarly, several gene*environment interactions were found, indicating that the effects of a particular genetic variants are modulated by environmental factors. So, the detection of these modulations is an evidence of the importance of considering both genetic and environmental factors in the study of obesity and other CVRF.

Potencial de peptidos y enzimas con capacidad antimicrobiana para el control de microorganismos alterantes de vino

Wed, 23 May 2012 08:02:27 GMT

Potencial de peptidos y enzimas con capacidad antimicrobiana para el control de microorganismos alterantes de vino Enrique López, María Los problemas derivados del uso del anhídrido sulfuroso en vinificación, junto a la tendencia actual a reducir el empleo de aditivos en la industria alimentaria, justifican la búsqueda de nuevos compuestos activos y estrategias de control que lo sustituyan o minimicen su empleo, de una manera eficaz y segura para los consumidores. Dos alternativas prometedoras para el control de las contaminaciones microbianas de los vinos son el empleo de péptidos antimicrobianos y la utilización de preparados enzimáticos capaces de degradar la pared celular fúngica. Durante el desarrollo de este trabajo hemos evaluado la actividad antimicrobiana de distintos péptidos y/o un preparado enzimático comercial rico en actividad β-glucanasa frente a las principales especies de levaduras y bacterias lácticas alterantes de vino. La caracterización de su actividad antimicrobiana in vitro reveló perfiles de actividad diferentes, dependiendo de la especie evaluada, e incluso a nivel de cepa, en el caso de la especie Dekkera bruxellensis. Además, a pesar de poseer diferente modo de acción el perfil de actividad de varios de los péptidos fue muy similar al correspondiente al preparado de β-glucanasas frente a varias levaduras alterantes, hecho que sugiere que la estructura y composición de la pared celular modula la acción de estos agentes antimicrobianos. Su aplicación en vino o mosto de uva reveló un significativo descenso en su eficacia antimicrobiana en estas matrices alimentarias. En las condiciones ensayadas el único péptido activo en vino fue el derivado de lactoferrina bovina LfcinB17-31, frente a las especies D. bruxellensis y Zygosaccharomyces bisporus, hecho que sugiere su potencial aplicación en bodega para el control de las contaminaciones producidas por estas especies de levadura, tanto en vino embotellado como durante la fermentación alcohólica, dada su especificidad de acción antimicrobiana. Así mismo, su demostrada actividad antibacteriana durante el proceso fermentativo lo convierte también en una alternativa para el control de bacterias lácticas alterantes durante la vinificación. Teniendo en cuenta que el único péptido activo en vino, LfcinB17-31, es un derivado de la lactoferrina bovina, el empleo de hidrolizados de esta proteína se plantea como alternativa más económica y natural a la utilización de péptidos sintéticos. Por su parte, el preparado de β-glucanasas fue activo en vino frente a D. bruxellensis y también en el caso de Z. bailii y S. cerevisiae, especies sobre las que la alternativa de los péptidos sintéticos no había resultado eficaz para su control. Su demostrada eficacia, junto al hecho de que este tipo de preparados enzimáticos ya se utiliza en vinos con otros fines, los convierte en buenos candidatos para el control de levaduras alterantes en vinificación, en este caso con un exhaustivo control de la dosis para no alterar el correcto desarrollo de la fermentación alcohólica.; Sulphur dioxide (SO2) is a chemical preservative used to control the growth of unwanted microorganisms and prevent undesired oxidation during winemaking. However, due to increasing health concerns, consumer preference, and a tighter legislation regarding preservatives, there is a worldwide trend to reduce wine SO2 levels. In this context there is an increasing indication of the potential application of antimicrobial peptides and cell wall degrading-enzymes as food preservatives. In this study, the antimicrobial effects of lactoferricin B-related peptides and of a lactoferrin hydrolysate (LFH) against wine spoilage yeasts and lactic acid bacteria (LAB) have been evaluated. A commercial β-glucanase preparation, which is currently used in winemaking to improve the clarification and processing of must and wine, has been also assayed for antimicrobial activity. In vitro experiments in broth showed that different peptides had distinct activity profiles depending on the microorganism, and in the case of Dekkera bruxellensis the efficacy was found to be straindependent. Despite their different mode of action, the activity profile of the peptides against yeasts was very similar to that of the β-glucanase preparation, suggesting that the structure and cell wall composition modulates the action of both antimicrobials. The efficacy of peptides is reduced when used in must or wine. In wine, only the bovine lactoferrinderived peptide LfcinB17-31 showed activity against D. bruxellensis and Zygosaccharomyces bisporus, suggesting its potential application for spoilage control. Moreover, we have demonstrated that the antibacterial activity of LfcinB17-31 and its antimicrobial specificity could contribute to the selective control of certain spoilage LAB during the fermentation process, without affecting the activity of Saccharomyces cerevisiae. Results obtained also suggest the potential use of LFH for spoilage control as a more natural and cheaper alternative than the use of synthetic peptides. Finally, this study has revealed the potential of the β-glucanase preparation to inhibit the growth of wine spoilage yeasts, since it was active against D. bruxellensis, Zygosaccharomyces bailii and S. cerevisiae in wine. Remarkably the synthetic peptides tested were not effective against the latter two species. Thus, we have found an additional application for β-glucanase preparations already used in winemaking

Multi-residue methods for the analysis of pesticides in airborne particulate matter by LC_MS/ and GC-MS/MS. Monitoring levels in the atmosphere

Tue, 22 May 2012 09:20:21 GMT

Multi-residue methods for the analysis of pesticides in airborne particulate matter by LC_MS/ and GC-MS/MS. Monitoring levels in the atmosphere Coscollà Raga, Clara Los plaguicidas actualmente utilizados en agricultura (CUPs) pueden encontrarse en la atmósfera como consecuencia de su uso intensivo en zonas agrícolas sobre todo durante el periodo de aplicación. Más de 300 sustancias activas están actualmente aprobadas por la UE y pueden ser aplicadas en distintos cultivos según la Directiva 91/414/CEE. La cantidad total de plaguicidas utilizados en la (EU-27) durante el 2008 fue de unas 310.011 toneladas de sustancia activa, con Francia (25.3%), España (12.9%) e Italia (13.3%) como los tres países con mayor consumo. La emisión de los plaguicidas durante la aplicación, la volatilización desde el suelo y las plantas después de su aplicación y la erosión del suelo con partículas cargadas con plaguicidas son los procesos fundamentales por los que los plaguicidas pueden llegar a la atmósfera. Una vez en el aire ambiente los plaguicidas pueden someterse a mecanismos de transporte, degradación y deposición. El objetivo fundamental de esta tesis es desarrollar métodos analíticos para analizar estos CUPs en la fase particulada del aire y proporcionar información sobre concentraciones de estos plaguicidas en dos regiones europeas (Région Centre y Comunidad Valenciana), en Francia y España. Esta tesis se compone de un estudio de revisión y cuatro capítulos experimentales. El estudio de revisión se fundamenta en una revisión bibliográfica sobre métodos de muestreo y análisis, y sobre concentraciones detectadas en la literatura de plaguicidas en el aire ambiente. En el primer capítulo se desarrolló un método analítico para determinar nueve CUPs en PM 2.5. Los CUPs fueron extraídos utilizando PLE y se analizaron por LC-MS/MS. Las condiciones del PLE y de la fuente de ionización ESI se optimizaron utilizando el diseño estadístico de experimentos. En el segundo capítulo, se desarrolló un método analítico para analizar treinta CUPs en PM 2.5. Los CUPs fueron extraídos por MAE y se analizaron mediante LC-MS/MS. Las condiciones del MAE también se optimizaron utilizando un diseño estadístico de experimentos. En el tercer capítulo, una metodología analítica para determinar cuarenta CUPs en PM 10 se desarrolló por CG-MS/MS. Se introdujo en este capítulo una purificación por GPC. Las metodologías analíticas desarrolladas en los capítulos 1, 2 y 3 se aplicaron para el análisis de muestras en la fase particulada del aire en la atmósfera de la Comunidad Valenciana durante los años 2007-2010 para evaluar la presencia de los plaguicidas en el aire ambiente. La Comunidad Valenciana es una región con muchos cultivos de cítricos y con una importante actividad agrícola. El muestreo se realizó en distintas estaciones rurales, urbanas y remotas. El capítulo 4 trata de un estudio sobre presencia de los CUPs en la Región Centre de Francia durante los años 2006-2008. La Región Centre es una de las regiones más grandes de Francia con una intensa producción agrícola, especialmente de cultivos intensivos como el trigo o el maíz. En este capítulo estudios sobre la distribución espacial y temporal de los plaguicidas, así como la influencia de las condiciones meteorológicas como la humedad y la dirección del viento fueron evaluadas y estudiadas para comprender el comportamiento de los plaguicidas en el aire. Como consecuencia de los pocos trabajos publicados en la literatura sobre plaguicidas en el aire ambiente, además de desarrollar nuevas metodologías analíticas y estudiar la presencia de los plaguicidas en la atmósfera para aportar un mejor conocimiento de estos contaminantes en el ámbito científico, los trabajos realizados y los resultados obtenidos pueden ser una aportación útil, junto con posteriores estudios, para futuras reglamentaciones de la UE sobre plaguicidas en aire, pues actualmente existe un vacío legal en este aspecto.; Currently used pesticides (CUPs) appear in the atmosphere as a consequence of its massive use in agricultural areas during application periods. More than 300 active substances are nowadays authorised by the European Union for their application on different crops according to the Directive 91/414 of CEE. The total use of plant protection products in the European Union (EU-27) during 2008 was about 310 011 tons of active ingredients, with France (25.3%), Spain (12.9%) and Italy (13.3%) as the three main consumer countries. The emissions of pesticides during application, volatilization from soil and plants after application and wind erosion of soil particles containing sorbed pesticides are the key processes driving to their presence in ambient air. Once in the air pesticides can suffer different mechanisms such as transportation, degradation and deposition. The research aim of this thesis was to develop different analytical methods for the determination of currently used pesticides in airborne particulate matter and to provide information about the levels of these pesticides in two European regions (France and Spain). This thesis is composed of one review study and four experimental chapters. The scope of the review study is focused on current collection and analytical methods for determination of CUPs in ambient air. Additional considerations about the occurrence of pesticides in ambient air are included. In the first chapter an analytical method was developed in order to determine nine CUPs in PM 2.5. Pesticides were extracted by PLE and analyzed by LC-MS/MS. PLE conditions as well as parameters in the ESI source ionization were optimized using a statistical design of experiments. In the second chapter an analytical method for analysing 30 CUPs in PM 2.5 was developed. Pesticides were extracted by MAE and analyzed by LC-MS/MS. MAE conditions were also optimized using a statistical design of experiments. In the third chapter an analytical methodology in order to analyze 40 CUPs in PM 10 by CG-MS/MS triple Q was developed. A GPC clean-up was introduced in this study. The analytical methods developed in chapters 1, 2 and 3 were applied to analyze real samples in Valencia region (Spain) during 2007-2010 in order to evaluate the presence of pesticides in ambient air. Valencia region has an intensive agricultural production mainly of citrus fruits. Samples were collected in different sampling sites focused on rural, urban and remote stations. Chapter 4 describes a study about the presence of CUPs in Centre region (France). Centre region is one of the country´s largest regions with many agricultural activities focused mainly in arable crops. Some spatial and temporal studies were carried out. The influence of the meteorological conditions, such as humidity and wind direction were also evaluated. Rural and urban stations were sampled from 2006 to 2008 in Centre region. The analytical methods developed and the concentration levels of CUPs provided by this thesis could be very useful in order to establish a monitoring and surveillance network of pesticides in ambient air around different countries of the European Union.

Evaluación de ácidos siálico y gangliósidos en leche y preparados infantiles

Tue, 15 May 2012 11:35:06 GMT

Evaluación de ácidos siálico y gangliósidos en leche y preparados infantiles Lacomba Perales, Ramón La leche materna es el alimento idóneo para satisfacer las necesidades del lactante, durante las primeras etapas de la vida. No obstante, en algunas situaciones se recurre a la alimentación con preparados infantiles, cuya composición en macronutrientes y oligoelementos esenciales (vitaminas y minerales) tiende a ser semejante a la de la leche humana. El ácido siálico y los gangliósidos son componentes bioactivos, presentes en leche que desempeñan un papel fundamental en distintos procesos de reconocimiento celular. Actualmente, con el fin de mejorar la composición de los preparados infantiles, se realizan investigaciones sobre componentes bioactivos esenciales, como ácido siálico y gangliósidos, cuyas cantidades y perfiles difieren entre la leche humana y los preparados infantiles. El objetivo general de esta tesis es conocer la composición en ácido siálico y gangliósidos de preparados infantiles comercializados y compararla con los presentes en leche humana, así como conocer la influencia de la utilización de concentrados proteicos de suero lácteo ricos en estos componentes en preparados infantiles. Para alcanzar este objetivo se ponen a punto y validan dos métodos de determinación de ácido siálico, uno que permite la cuantificación diferenciada de sus formas más abundantes (N-acetil y N-glicolil) por HPLC-fluorescencia y otro que permite la determinación de ácido siálico total por espectrofotmetría de absorción molecular. Atendiendo a los resultados obtenidos, los métodos validados se consideran idóneos para ser aplicados a preparados infantiles y leche humana. Los métodos validados se aplican a la determinación del ácido siálico y gangliósidos en preparados comerciales (para lactantes y de continuación), sueros lácteos a base de -lactoalbúmina y membranas de glóbulos grasos de la leche ricos en ácido siálico y gangliósidos (utilizados en la elaboración de preparados experimentales que contienen estos ingredientes) y leche humana. Los resultados indican que el suero a base de membranas de glóbulos grasos de la leche presenta un mayor contenido de ácido siálico y gangliósidos que el de -lactoalbúmina, con lo que los preparados elaborados con este ingrediente son los que presentan un mayor contenido de ambos componentes bioactivos, si bien sus contenidos son inferiores a los encontrados en la leche humana, y sus perfiles individuales difieren, excepto el perfil de gangliósidos del preparado de continuación experimental. A partir de los contenidos obtenidos de ácido siálico y gangliósidos, en los preparados para lactantes, se calculan sus ingestas diarias; estas no alcanzan las ingestas aportadas por la leche humana durante las primeras semanas de vida (20-30 mg/kg/día vs. 210 mg/kg/día). Se evalúa la bioaccesibilidad de ácido siálico y gangliósidos en la fracción soluble de preparados infantiles y leche humana obtenida tras una digestión gastrointestinal simulada en dos etapas (gástrica e intestinal). La etapa gástrica es la principal responsable de la reducción de la bioaccesibilidad de ambos compuestos, comprobándose que no es debido a una insolubilización de los mismos. En leche humana se obtiene la mayor bioaccesibilidad para el ácido siálico, seguida del preparado para lactantes y de continuación; mientras que en el caso de los gangliósidos el orden, de mayor a menor bioaccesibilidad, corresponde a preparado de continuación, leche humana y preparados para lactantes. Con el fin de iniciar estudios de biodisponibilidad se caracteriza el contenido y perfil de ácido siálico y gangliósidos en la línea celular Caco-2, células diferenciadas y no diferenciadas, evaluándose la citotoxicidad de los principales gangliósidos (GM3 y GD3) a las concentraciones halladas en las fracciones solubles de las muestras analizadas, mediante ensayos de viabilidad celular (azul tripán) e integridad mitocondrial (MTT), no observándose ningún efecto tóxico.; Breast milk is the most suitable food in order to satisfy the needs of the unweaned baby at the earliest stage of its life. However, in some situations infant formulas are used instead. Nowadays, with the aim of improving the composition of infant formulas, research is performed on essential bioactive components, such as sialic acid and gangliosides, whose amounts and profiles differ from human milk and infant formulas, and plays a a fundamental role in different processes of cellular recognition. The main objective of this thesis is to identify the composition of sialic acid and gangliosides in manufactured infant formulas and to compare it with the ones found in human milk, and to discern the influence of the use of whey protein concentrates, rich in components found in infant formulas. Validated methods are applied to the determination of sialic acid and gangliosides in manufacturated preparations (starter and follow-on formulas), whey made of -lactalbumin and milk fat globule membranes rich in sialic acid and gangliosides (utilized in the production of experimental preparations containing these ingredients), and human milk. The results point out that the whey made of milk fat globule membranes presents a higher sialic acid and gangliosides content than the one consisting of -lactalbumin. Therefore, the preparations made with this ingredient are the ones that present a higher content of both bioactive components. However, their contents are lower than the ones found in human milk and their individual profiles differ. Evaluation of the bioaccessibility of sialic acid and gangliosides in the soluble fraction of child food and human milk is performed, both obtained after a two stage simulated gastrointestinal digestion (gastric and intestinal). The gastric stage is the main stage responsible for the reduction of the bioaccessibility of both compounds, showing that it is not due to an insolubilisation of them. In sialic acid the highest bioaccessibility is obtained for human milk, followed by starter formulas and follow-on ones. On the other hand, in the case of gangliosides, the order, from the higher to the lower bioaccessibility, corresponds to the follow-on formulas, human milk and finally, starter formulas

Promoción de la salud en adolescentes mediante un programa de intervención de mejora de la condición física y del estilo de vida

Thu, 29 Mar 2012 09:20:44 GMT

Promoción de la salud en adolescentes mediante un programa de intervención de mejora de la condición física y del estilo de vida Clemente Bosch, Eva La adolescencia es una etapa clave para la promoción de estilos de vida saludables, tales como el incremento de la actividad física y la mejora de la condición física. El objetivo de este estudio ha sido conocer el nivel de práctica de actividad física habitual en adolescentes y analizar su influencia en la salud, especialmente cardiovascular. Así como, diseñar y llevar a cabo un programa de intervención de mejora de la condición física y el estilo de vida en esta misma población. Se evaluó, pre-intervención, nivel de práctica de actividad física y tiempo dedicado a actividades sedentarias; y pre- y postintervención, presión arterial, frecuencia cardiaca en reposo, composición corporal, y condición física orientada a la salud. Concluimos que el nivel de práctica de actividad física de los adolescentes es bajo, asociándose los chicos a un nivel de práctica muy superior al de las chicas. El sexo tiene una alta influencia en los hábitos de práctica de actividad física, por lo que se debería tener muy en cuenta a la hora de llevar a cabo programas de intervención. Los adolescentes que practican más actividad física tienen mayor probabilidad de presentar mejor salud cardiovascular y la prevalencia de adolescentes que posee una capacidad aeróbica indicativa de riesgo cardiovascular futuro es alta, por lo que sería aconsejable realizar programas de intervención para aumentar el nivel de práctica de actividad física y de condición física de los adolescentes, especialmente en las chicas. El programa de intervención aplicado ha tenido un efecto positivo en la circunferencia de la cintura, índice cintura/cadera y porcentaje de grasa corporal; y en la forma física, en resistencia aeróbica, fuerza-resistencia y fuerza muscular, siendo estas las cualidades físicas que más nos interesaba mejorar desde el punto de vista de la salud cardiovascular.; Adolescence is a key stage to promote healthy lifestyles like increased physical activity and improved physical condition. This study aims to know the usual level of practicing physical activity among adolescents and to analyse its influence on health, particularly cardiovascular health. The other aim is to design and carry out an intervention programme to improve this population’s physical condition and lifestyle. A pre-intervention assessment was done of level of practicing physical activity and time spent on sedentary activities, and a pre- and post-intervention assessment was done of blood pressure, cardiac frequency at rest, build and physical condition in health terms. We conclude that the level of practicing physical activity is low, and males are associated with a much higher level of practice than females. Gender has a high influence on practicing physical activity habits, and should be taken into account when carrying out intervention programmes. There is a greater likelihood of presenting better cardiovascular health among adolescents who practice more physical activities. The prevalence of those adolescents with aerobic capacity indicative of future cardiovascular risk is high. Therefore, intervention programmes would be advisable to increase the level of practicing physical activity and the physical condition of adolescents, especially females. The applied intervention programme has had a positive effect on waist circumference, waist:hip ratio and percentage of body fat, and on physical fitness, aerobic resistance, force resistance and muscle strength, these being physical qualities which need improving the most from the cardiovascular health viewpoint.

Impacto des uso de tecnologías no térmicas sobre distintos parámetros nutricionales y de calidad en alimentos líquidos. / Non-thermal technologies impact on nutritional and quality parameters in liquid foods.

Wed, 28 Mar 2012 11:09:38 GMT

Impacto des uso de tecnologías no térmicas sobre distintos parámetros nutricionales y de calidad en alimentos líquidos. / Non-thermal technologies impact on nutritional and quality parameters in liquid foods. Barba Orellana, Francisco José In the last decade have appeared in the Spanish market new products based on mixtures of fruit juices and milk as well as beverages mixtures of fruit and/or vegetables, which have a good acceptance by consumers and with a high nutritional value largely due to its high content in bioactive compounds as well as antioxidant capacity. Traditionally, liquid food such as fruit and/or vegetables juices, as well as milk, have been preserved by thermal treatment such as pasteurization and sterilization. However these processes can cause loss of compounds responsible for the organoleptic and nutritional quality of food. Currently there is a growing demand by the consumer for minimally processed food and which in turn are safe from the microbiological point of view, a fact that is driving the development of new conservation methods. Nonthermal processes such as high hydrostatic pressure, pulsed electric fields and ultrasound, which can be used with this goal without affecting the quality of food. Although the effectiveness of these treatments is known for safe food, is now when is possible to produce the greater technological advances for it to marketing. In the present doctoral thesis, the main objective is to establish the conditions of nonthermal processing to obtain beverages with a high content in bioactive compounds as well as antioxidant capacity. In addition it is important to compare the effects of these treatments on the organoleptic and nutritional characteristics, with those occurring after the implementation of a traditional heat treatment. Subsequently, also it was studied the degree of permeability of the cell membranes of blueberries using the extent of the impedance, to optimize the parameters of processing and use thermal and nonthermal processing in the extraction of bioactive compounds with antioxidant capacity.; En la última década han aparecido en el mercado español nuevos productos basados en mezclas de zumos de frutas y leche así como bebidas mezclas de vegetales, que presentan una buena aceptación por parte del consumidor y con un gran valor nutricional, debido en gran parte a su alto contenido en compuestos bioactivos así como capacidad antioxidante. Tradicionalmente los alimentos líquidos como zumos de fruta y/o vegetales, así como la leche, han sido conservados mediante técnicas por calor como la esterilización. Sin embargo estos procesos pueden provocar una pérdida de compuestos responsables de la calidad organoléptica y nutricional de los alimentos. Actualmente existe una demanda creciente por parte del consumidor de alimentos mínimamente procesados y que a la vez sean seguros desde el punto de vista microbiológico, hecho que está impulsando el desarrollo de nuevos métodos de conservación. Procesos no térmicos como las altas presiones hidrostáticas, pulsos eléctricos de alta intensidad y ultrasonidos, pueden utilizarse con este objetivo sin que se vea afectada la calidad de los alimentos. Aunque la eficacia de estos tratamientos se conoce para obtener alimentos seguros, es ahora cuando se están produciendo los mayores avances tecnológicos para hacer posible su comercialización. En la presente tesis doctoral, el objetivo principal es establecer las condiciones de procesado no térmico para obtener bebidas con un alto contenido en compuestos bioactivos así como capacidad antioxidante. Además se comparan los efectos de estos tratamientos sobre las características nutricionales y organolépticas con los que se producen tras la aplicación de un tratamiento térmico tradicional. Posteriormente, se estudia el grado de permeabilidad de las membranas celulares de arándanos utilizando la medida de la impedancia, para optimizar los parámetros del procesamiento y poder utilizar los tratamientos térmicos y no térmicos en la extracción de compuestos bioactivos con capacidad antioxidante.

Modulación genética y ambiental de parámetros bioquímicos y clínicos en población mediterránea de alto riesgo cardiovascular

Thu, 22 Mar 2012 08:30:11 GMT

Modulación genética y ambiental de parámetros bioquímicos y clínicos en población mediterránea de alto riesgo cardiovascular Carrasco Espí, Paula Las enfermedades cardiovasculares (ECV), siguen siendo la primera causa de mortalidad a nivel mundial. Por ello, representan un gran desafío para la Salud Pública, poniendo de manifiesto la necesidad de intensificar los esfuerzos en investigación para mejorar la prevención primaria y su tratamiento. La epidemiología cardiovascular clásica no incorporaba en sus estudios el componente genético de la enfermedad porque se carecía de información sobre ello. La secuenciación del genoma humano, ha posibilitado que se implante con fuerza la nueva epidemiología genómica cardiovascular, que tiene como objetivo la integración de la información genética y ambiental en el estudio de la etiología de las ECV, lo que permitirá caracterizar interacciones gen*ambiente y así, obtener conocimiento para poder realizar modificaciones efectivas de los estilos de vida en aquellas personas con una mayor susceptibilidad genética que actúen sobre el riesgo cardiovascular. Pero para ello se necesitan estudios capaces de proporcionar, por su diseño experimental, evidencia científica de primer nivel. El estudio PREDIMED (PREvención DIeta MEDiterránea) constituye una magnífica oportunidad puesto que se trata de un ensayo de campo prospectivo, aleatorizado, multicéntrico y controlado de intervención que pretende estudiar los efectos de la dieta mediterránea (DM) en la prevención primaria de la ECV. Nuestro grupo investigador participa como el nodo de Valencia y ha reclutado 1050 participantes con elevado riesgo cardiovascular. Esta tesis doctoral se enmarca en este proyecto que ha permitido validar el cuestionario de frecuencia de consumo alimentario (CFCA) utilizado en este estudio, analizar los efectos sobre fenotipos intermedios de ECV de una DM con respecto a una dieta baja en grasas tras tres meses de intervención dietética, realizar el estudio de asociación de polimorfismos en genes candidatos (CETP, LIPC, LPL, APOE, APOA1, ABCA1, PON1, p22phox, MTHFR, IL-6, COX-2, FTO, PPARG2, PPARGC1, TCF7L2 y genes de las subunidades de AMPK,) y fenotipos intermedios de ECV como perfil lipídico, obesidad, diabetes, presión arterial marcadores de estrés oxidativo e inflamación, así como el análisis de interacciones gen*ambiente (tabaco, actividad física y dieta) e interacciones gen*gen. Este trabajo se ha completado con el estudio de interacciones gen*ambiente sobre fenotipos finales de ECV a través de un estudio de casos y controles de la cohorte EPIC-España. Los resultados más relevantes han mostrado que, el CFCA del estudio PREDIMED, ha mostrado una buena validez y fiabilidad y que mayor adherencia a la DM se asocia significativamente con cambios favorables en las concentraciones plasmáticas de lípidos, glucosa y marcadores de inflamación. También se ha observado que la mayoría de estos polimorfismos se asocian significativamente con fenotipos intermedios de ECV (lípidos, marcadores de estrés oxidativo e inflamación, presión arterial, obesidad, diabetes), replicando asociaciones ya descritas en otras poblaciones e incluso encontrando asociaciones nuevas, descritas por primera vez. Se ha encontrado también importantes interacciones gen*gen considerando variantes en distintos genes que actúan sobre el mismo fenotipo, y las variables ambientales, fundamentalmente del estilo de vida, también presentan interacciones con los polimorfismos estudiados determinando fenotipos intermedios de riesgo cardiovascular. Algunos de estos polimorfismos también se asocian con mayor riesgo de ECV, presentando asimismo modulaciones ambientales, por lo que podemos concluir que en las variables bioquímicas y clínicas estudiadas relacionadas con el riesgo cardiovascular, existe una importante interacción entre factores genéticos y ambientales que las determinan, cuyo conocimiento en profundidad permitirá establecer estrategias más eficaces de prevención personalizada en base al genoma y a las distintas variables ambientales con las que interactúa.; Cardiovascular disease (CVD) is the leading cause of death worldwide, therefore knowledge about its pathogenesis is a priority for primary prevention and treatment. Current evidence supports the concept that gene*environment interactions modulate intermediate phenotypes and CVD risk. However, to study gene*environment interactions studies than offer the highest level of evidence are needed. The present study has been conducted within the frame of PREDIMED (PREvención DIeta MEDiterránea) trial, a large randomized intervention study, aimed at assessing the effects of the mediterranean diet (MD) on the primary prevention of CVD. Our group in Valencia participates with 1050 participants. In the current study we assessed validity of the food-frequency questionnaire (FFQ) used in PREDIMED, we examined the effect of a MD compared to a low-fat diet on intermediate phenotypes, after 3-months of diet intervention, and studied the association between polymorphisms of candidate genes (CETP, LIPC, LPL, APOE, APOA1, ABCA1, PON1, p22phox, MTHFR, IL-6, COX-2, FTO, PPARG2, PPARGC1, TCF7L2, AMPK) and intermediate phenotypes of CVD (lipids, oxidative stress and inflammation markers, blood pressure, obesity, diabetes), gene*environment (smoking, diet, physical activity) and gene*gene interactions. This study has been completed with the analysis of some gene*diet interactions of clinical CVD phenotypes (myocardial infarction) through a case-control study on the EPIC-Spain cohort. The most significant results have shown the FFQ used in PREDIMED has a good validity and reliability. Greater adherence to the MD was associated with favorable changes in lipids, glucose and inflammatory markers. It has also been observed that most of polymorphisms are associated with intermediate phenotypes of CVD, replicating associations already described in other populations and even finding new of these, first described, and these associations were found modulated by lifestyle variables. We also found significant gene*gene interactions and some polymorphisms were also associated with increased risk of CVD, also presenting environmental modulations. In conclusion, in the studied clinical and biochemical variables related to cardiovascular risk, there is significant interaction between genetic and environmental factors that determine them, and a deeper understanding of it will develop strategies for more effective personalized prevention based on genome and environmental factors with which it interacts.

Mejora del diagnóstico precoz de cáncer de mama en pacientes valencianas

Tue, 13 Dec 2011 08:03:09 GMT

Mejora del diagnóstico precoz de cáncer de mama en pacientes valencianas Pastor Climente, Ismael Pascual INTRODUCCIÓN: El cáncer de mama adquiere cada vez mayor relevancia por ser la enfermedad maligna que afecta a mujeres más común del mundo desarrollado. Aunque la mortalidad por cáncer de mama ha descendido, en los últimos años la incidencia de cáncer de mama se ha mantenido estancada. Se vuelve, por tanto, fundamental realizar esfuerzos encaminados a la prevención de esta enfermedad, siendo necesario para ello conocer el perfil de la paciente diagnosticada de cáncer de mama en la actualidad para valorar los posibles cambios producidos en este perfil en los últimos tiempos. Este estudio pretende obtener el perfil actual de las pacientes diagnosticadas de cáncer de mama en el momento de la detección, en el que se ponga de manifiesto la relación, si la hubiera, entre una serie de factores a estudiar y el desarrollo de cáncer de mama, con el fin de poder diseñar un programa de prevención de cáncer de mama. Se pretende, también, comprobar si el método definido por Gail es aplicable y predictivo en la población de mujeres valencianas, y por último, conocer la influencia que sobre la supervivencia global de los pacientes con cáncer de mama tienen ciertas variables de estudio. PACIENTES Y MÉTODOS: Se realizó un estudio retrospectivo mediante revisión de la información obtenida por el facultativo en la primera visita a casos incidentes de cáncer de mama, que habían sido atendidos en el Hospital Clínic Universitari de Valencia y en la Fundación Instituto Valenciano de Oncología durante el periodo comprendido entre enero de 2000 y diciembre de 2001. Se realizó un estudio de casos y controles, un análisis multivariante y, por último, se evaluó la supervivencia global de los pacientes con cáncer de mama, así como la supervivencia obtenida en función de determinados factores. Además, se realizó un estudio sobre la aplicación del método de Gail de cálculo de riesgo en la población de estudio. RESULTADOS: Los resultados obtenidos demuestran que las patologías benignas de mama, particularmente las lesiones calificadas como proliferativas, incrementan el riesgo de desarrollar cáncer de mama. Se corroboró la importancia del autoexamen mamario en la mujer. Se obtuvo una disminución del riesgo para aquellas mujeres con menos un hijo. Y la menopausia>55 años aumentó significativamente el riesgo. El método de Gail sólo habría detectado al 41% de las pacientes que han desarrollado un cáncer de mama. CONCLUSIONES: Sería recomendable incorporar la variable patología mamaria previa en los criterios de selección de mujeres para el cribado del cáncer de mama. Se confirma la paridad como un importante factor protector El método de Gail no parece adaptarse a la población valenciana. En nuestra población sería útil para mujeres de edades avanzadas con antecedentes de cáncer de mama.; INTRODUCTION: Breast cancer is the most common malignant disease affecting women in the developed world. It seems essential to make efforts at the prevention of breast cancer, being necessary to know the profile of the patient diagnosed with breast cancer nowadays to assess possible changes. This study seeks to obtain a current profile of patients diagnosed with breast cancer at the time of detection, to highlight the relationship between a number of factors and breast cancer, in order to improve the prevention programs for breast cancer. It is to check whether the method defined by Gail is applicable and predictive in Valencian women and know the influence on overall survival of certain variables. PATIENTS AND METHODS: A retrospective method was carried out by a review of information obtained at the first sight of incident cases treated at the University Hospital of Valencia and the Valencian Institute of Oncology Foundation between January 2000 and December 2001. It realized a case-control study, a multivariate analysis and assessed the overall survival of patients, the survival obtained in certain factors. Besides, it examined the application of the method of Gail risk calculation. RESULTS: Breast benign pathologies, particularly those classified as proliferative lesions, increase the risk of developing breast cancer. It confirmed the importance of breast self-examination in women. It was obtained a reduction of risk for women with at least one child and menopause > 55 years old significantly increased the risk. I would only have detected 41% of patients who have developed breast cancer using the Gail method. CONCLUSIONS: It would be advisable to incorporate the variable previous breast disease screening criteria for breast cancer. Parity is confirmed as an important protective factor. The method of Gail does not seem to fit in the population of Valencia. It would be useful in our population for older women with a history of breast cancer.

Actividad antioxidante y biodisponibilidad mineral de zumos de frutas adicionados de minerales y/o leche

Thu, 16 Jun 2011 11:02:51 GMT

Actividad antioxidante y biodisponibilidad mineral de zumos de frutas adicionados de minerales y/o leche Cilla Tatay, Antonio En los últimos años, la industria alimentaria ha incrementado su interés en el desarrollo de alimentos funcionales, siendo el enriquecimiento de bebidas a base de zumo de frutas con vitaminas y minerales uno de los métodos empleados. Esta estrategia persigue mejorar el estado nutricional de la población, o de grupos específicos de población y/o corregir posibles deficiencias en la ingesta diaria de vitaminas o minerales, debidas a cambios en los hábitos alimentarios. No obstante, se precisa un mayor conocimiento sobre las interacciones que puedan producirse entre los compuestos bioactivos de las bebidas a base de zumo de frutas y los minerales adicionados, o viceversa. Para ello, se estudia la influencia del almacenamiento en refrigeración (2-4 ºC) y digestión gastrointestinal simulada en las muestras objeto de estudio (bebidas a base de zumo de frutas (uva-naranja-melocotón) con o sin leche y/o minerales (Fe y Zn)) sobre la capacidad antioxidante total (métodos ORAC y TEAC), polifenoles solubles totales y contenido de ácido ascórbico. Se observa que las propiedades antioxidantes de las bebidas no disminuyen durante su período de vida útil (135 días) tras el almacenamiento en refrigeración así como después de un proceso de digestión gastrointestinal in vitro. Destacar que la presencia de hierro y/o cinc y/o leche, disminuye el contenido de polifenoles solubles totales, observando, sin embargo, un efecto positivo del cinc sobre los flavan-3-oles tras la digestión gastrointestinal. Asimismo, se evalúan los efectos biológicos, en cultivos celulares, de las fracciones bioaccesibles de las bebidas objeto de estudio a través de la actividad citoprotectora frente a estrés oxidativo inducido y mediante la actividad antiproliferativa en células tumorales de cáncer de colon (Caco-2 y HT-29). Las bebidas a base de zumo de frutas que contienen cinc y cinc-leche son aquellas con mayores efectos beneficiosos, ya que ejercen un efecto citoprotector manteniendo la integridad mitocondrial y metabólica de las células, inducen la enzima GSH-Rd, ejercen una respuesta adaptativa del ciclo celular y previenen de la apoptosis caspasa-dependiente. Además, inhiben la proliferación de las células de cáncer de colon a través de un efecto citostático, debido al bloqueo en la progresión del ciclo celular en la fase S, acompañado de un descenso en la expresión de las ciclinas B1 y D1. Por otra parte, se determina la influencia del consumo de las bebidas objeto de estudio sobre el estatus antioxidante de mujeres sanas en edad fértil. Tras el estudio de intervención, no se mejora de la capacidad antioxidante total sérica por el bajo estrés oxidativo endógeno y la ausencia de cambios drásticos en los hábitos alimentarios de la población de estudio, aunque se induce la actividad de la enzima superóxido dismutasa , la cual podría ejercer un efecto protector en forma de "tolerancia" frente a un daño oxidativo posterior. Finalmente, se determina la bioaccesibilidad de hierro y cinc tras el proceso de digestión gastrointestinal simulada, junto a la biodisponibilidad de hierro en células Caco-2 utilizando la síntesis de ferritina como criterio estimador de la misma. La interacción negativa del cinc sobre la bioaccesibilidad del hierro es contrarrestada en presencia de leche, posiblemente debido a los caseinofosfopéptidos formados durante el proceso de digestión, mientras que la síntesis de ferritina es 3 veces superior en las bebidas que contienen leche y hierro, poniendo de manifiesto que la presencia de caseinofosfopéptidos mejora la captación celular de hierro.; In last years food industry has focused its interest in the development of functional foods, being fortification of fruit beverages with vitamins and minerals one of the methods employed. However, more knowledge about interactions between bioactive compounds of fruit beverages and minerals is needed. To do this task, it was evaluated total antioxidant capacity (ORAC and TEAC methods), total soluble phenolic compounds and ascorbic acid content as influenced by cold storage (2-4 ºC) and an in vitro simulated gastrointestinal digestion in fruit beverages supplemented with/without iron and/or zinc and/or milk. Results showed that antioxidant properties did not diminish after cold storage and the digestion process. Likewise, biological effects such as cytoprotection against H2O2-induced oxidative stress and antiproliferative activity were determined using the bioaccesible fraction of fruit beverages upon cell cultures (Caco-2 and HT-29 cells). Fruit beverages with zinc and zinc-milk conferred the biggest effects against oxidative stress maintaining the functionality of cells and showing an antiproliferative activity due to a cytostatic mode of action. On the other hand, it was evaluated the impact of fruit beverage consumption upon antioxidant status in healthy woman of fertile age. After the intervention study, serum total antioxidant capacity was not improved but increase erythrocyte superoxide dismutase activity what could imply a protective effect in the form of “tolerance” to a subsequent larger challenge. Finally, iron and zinc bioaccessibility together with iron bioavailability determined by means ferritin synthesis in Caco-2 cells was assessed. The negative interaction of zinc on iron bioaccessibility was overcome in the presence of milk probably due to caseinophosphopeptides formed during the digestion process, while ferritin synthesis was 3-fold higher in fruit beverages with iron and milk, what implies that possibly caseinophosphopeptides could improve iron cellular uptake.

Análisis comparativo de las funciones de predicción del riesgo cardiovascular SCORE y Framingham y sus versiones calibradas, SCORE calibrada y REGIDOR: Estudio de incidencia de complicaciones cardiovasculares

Thu, 26 May 2011 07:32:44 GMT

Análisis comparativo de las funciones de predicción del riesgo cardiovascular SCORE y Framingham y sus versiones calibradas, SCORE calibrada y REGIDOR: Estudio de incidencia de complicaciones cardiovasculares González Monte, Carmen Introducción: Las recomendaciones del ATPIII y las SSCC europeas en prevención primaria cardiovascular aconsejan para la estimación del riesgo individual las funciones de Framingham y SCORE respectivamente. Ambas disponen de versiones calibradas para la población española. Todas, excepto Framingham(ATPIII), han sido derivadas para aplicarlas en un rango de edad limitado. Por otra parte, ninguna de estas funciones predice el riesgo cardiovascular total, ya que SCORE y SCORE calibrada sólo estima el riesgo de muerte y Framingham(ATPIII) y REGICOR el riesgo coronario. Sin embargo todas las medidas preventivas van dirigidas a la prevención de la enfermedad cardiovascular globalmente y las funciones son utilizadas como proxi del riesgo cardiovascular total. El objetivo es determinar cuál de estas funciones de estimación del riesgo cardiovascular es más útil para seleccionar al mayor número de pacientes con incidencia total de episodios cardiovasculares elevada. Método: Estudio observacional de cohortes de 1642 pacientes de 20 a 79 años no diabéticos, sin enfermedad cardiovascular establecida, en una Unidad de Hipertensión y Riesgo Vascular, seguidos un tiempo mediano de 3,8 años (rango 1- 10 años). Se registraron todos los episodios cardiovasculares mayores incidentes. Se calculó el riesgo predicho individual utilizando cada función. Se analizó el grado de concordancia para clasificar en grupos de riesgo utilizando los puntos de corte ≥5% en SCORE y SCORE calibrada, >20% para Framingham(ATPIII) y ≥10% en REGICOR. Se estimó para cada función la sensibilidad, especificidad, CPP, CPN, Odds ratio diagnóstica y exactitud. Se estimó la densidad de incidencia por el método de Mantel-Haenzel, y la incidencia acumulada en grupos de riesgo obtenidos al aplicar los algoritmos y compararlos mediante análisis de Kaplan-Meier. Se compararon las curvas de supervivencia mediante test de Breslow. Resultados: SCORE calibrada clasificó de alto riesgo a un 13,5%, SCORE a un 9,8%, Framingham(ATPIII) al 8,8% y REGICOR a un 3,5%. Durante el seguimiento 74 pacientes presentaron un primer episodio cardiovascular. La concordancia a la hora de clasificar en grupos de riesgo entre Framingham y SCORE (Kappa=0,37), y entre SCORE calibrada y REGICOR (Kappa=0,34) fue débil. Para cada función, el grupo de alto riesgo presentó un HR superior a 4 respecto al grupo de riesgo moderado/bajo. Todas las funciones presentaron una baja sensibilidad sin diferencias significativas, así como una exactitud moderada para discriminar pacientes con episodio cardiovascular. Al comparar SCORE vs Framingham(ATPIII) y SCORE calibrada vs REGICOR, la incidencia de episodios cardiovasculares en los grupos con discordancia en la clasificación de alto riesgo no presentó diferencias significativas. SCORE excluyó un 4,8% de pacientes de alto riesgo frente a un 5,8% por Framingham(ATPIII). SCORE calibrada excluyó un 0,4% de pacientes de alto riesgo frente a un 10,3% en el caso de REGICOR. Además, SCORE calibrada seleccionó un 4,2% más de pacientes respecto a SCORE con una incidencia significativamente más elevada que el grupo de riesgo moderado/bajo. En las mujeres por falta de potencia estadística no se observaron diferencias significativas. En los hombres SCORE excluyó un 7,1% de pacientes de alto riesgo frente a un 10,6% por Framingham(ATPIII), mientras que SCORE calibrada excluyó un 0,4% de pacientes de alto riesgo frente a un 16,1% por REGICOR con una probabilidad acumulada de ECV a los 5 años del 19%. Además, SCORE calibrada incluyó un 5% más de pacientes que SCORE con una probabilidad acumulada de episodios cardiovasculares a los 5 años del 17%. Conclusión: En prevención primaria, aunque el rendimiento de las cuatro funciones analizadas no presenta diferencias significativas, la concordancia entre ellas es débil, siendo SCORE calibrada la más útil para seleccionar al mayor número de pacientes con una incidencia de episodios cardiovasculares aumentada.; Background: The recommendations of ATPIII and the European scientific societies in cardiovascular primary prevention advise the estimate of the individual risk by Framingham and SCORE functions respectively. Both have versions calibrated for the Spanish population. The objective is to determine which of these functions is more useful to select to the greater number of patients with high cardiovascular incidence. Method: Longitudinal study of 1642 non-diabetic patients, without previous history of cardiovascular disease attending to a Hypertension and Vascular clinic. High-risk patients were considered those with ≥5% risk according to SCORE and calibrated SCORE, >20% on Framingham(ATPIII) and ≥10% on REGICOR. Major cardiovascular events were collected during a 3 year median follow-up (range 1-10 años) and analysed by Kaplan-Meier. Results: 13,5% of patients was considered of high-risk with calibrated SCORE function, 9,8& with SCORE, 8,8% with Framingham(ATPIII) and 3,5% with REGICOR. The concordance between SCORE and Framingahm(ATPIII) (Kappa=0,37), and between calibrated SCORE and REGICOR (Kappa=0,34) was poor. During follow-up 74 cardiovascular events occurred. The incidence of cardiovascular events in groups with disagreement in high risk classification, did not present differences, upon compared SCORE vs Framingham(ATPIII) and calibrated SCORE vs REGICOR. SCORE excluded a 4,8% of high risk patients as compared to a 5,8% by Framingham(ATPIII). Calibrated SCORE excluded a 0,4% of high risk patients as compared to a 10,3% in the case of REGICOR. Furthermore, calibrated SCORE selected 4,2% patients more than SCORE with incidence of cardiovascular events significantly highest that moderate/low risk group. In women, by lack of statistics power, it’s not observed meaningful differences. In the men SCORE excluded 7,1% of high risk patients as compared to 10,6% by Framingham(ATPIII). Calibrated SCORE excluded 0,4% of high risk patients as compared to 16,1% by REGICOR with acumulative probability of cardiovascular events at 5 years of 19%. Furthermore, calibrated SCORE included a 5% of men more than SCORE with an acumulative probability of cardiovascular events at 5 years of 17%. Conclusions: In primary prevention, calibrated SCORE is the most useful to select the greater number of patients with a cardiovascular events incidence increased.

Variación de compuestos bioactivos y con capacidad antioxidante en una bebida de zumo y leche al aplicar tecnologías no térmicas de conservación

Thu, 26 May 2011 07:16:25 GMT

Variación de compuestos bioactivos y con capacidad antioxidante en una bebida de zumo y leche al aplicar tecnologías no térmicas de conservación Zulueta Albelda, Ana Mª En los últimos años han aparecido en el mercado nuevas bebidas, combinación de zumos de fruta y leche con una buena aceptación por parte de los consumidores. Tradicionalmente, los alimentos líquidos como zumos de fruta y/o vegetales, así como la leche han sido conservados mediante técnicas por calor como la pasterización o esterilización. Sin embargo, los procesos térmicos de conservación dañan tanto a microorganismos y enzimas, como a nutrientes y otros compuestos químicos responsables de la calidad nutricional y organoléptica de los alimentos. En la última década, investigadores y tecnólogos, demandado por la industria alimentaria, han estudiado la aplicación de tecnologías de conservación alternativas al calor como los pulsos eléctricos de alta intensidad (PEAI). La aplicación de los PEAI es una técnica desarrollada para la conservación de alimentos líquidos a través de la exposición de éstos a un campo eléctrico de determinada intensidad durante un tiempo del orden de microsegundos, basándose en la propiedad que tienen los alimentos líquidos (principalmente, compuestos por agua y nutrientes) de ser buenos conductores eléctricos. La tecnología de PEAI es capaz de destruir microorganismos e inactivar enzimas preservando en mayor grado las características nutricionales y organolépticas de los alimentos tratados. En la presente tesis doctoral, se estudian los efectos de la aplicación de los PEAI sobre los compuestos bioactivos (ácido ascórbico, carotenoides, compuestos fenólicos), la capacidad antioxidante total (ORAC y TEAC) y otros parámetros físico-químicos y de calidad (pH, ºBrix y color) de una bebida mezcla de zumo de naranja y leche (50:20, v/v). Durante el estudio se ensayan cuatro intensidades de campo eléctrico (15, 25, 35 y 40 kV/cm) y seis tiempos de tratamiento para cada uno de dichos campos (desde 40 hasta 700 μs). Los resultados obtenidos tras la aplicación de los pulsos se comparan con los obtenidos tras la aplicación de un tratamiento tradicional por pasterización (90ºC, 20 s). Posteriormente, se evalúa la variación de las características nutricionales y organolépticas durante el almacenamiento de la bebida en refrigeración (4 y 10ºC) y se calcula la vida útil. Además, para evaluar el efecto de los PEAI sobre el perfil de ácidos grasos se realizan también ensayos con los dos campos eléctricos más intensos (35 y 40 kV/cm) en una bebida de zumo de naranja y leche enriquecida con ácidos grasos omega 3 y oléico. Por otro lado, debido a la falta de métodos oficiales para la determinación de la capacidad antioxidante total, en el trabajo se presenta una comparativa de dos de los métodos más utilizados (ORAC y TEAC) para la determinación de dicha capacidad antioxidante en la bebida de zumo y leche. La bebida tratada por PEAI presenta una mayor retención de compuestos bioactivos y mayor semejanza al producto fresco respecto a las tratadas por pasterización. Sin embargo, durante el almacenamiento, las bebidas tratadas por pulsos muestran una mayor inestabilidad según indican los parámetros físico-químicos (ºBrix, pH y densidad).; New ready-to-drink beverages combination of fruit juices and milk have been appeared in the market based on consumer claims for convenience and health. Traditionally, liquid foods such as fruit juices, vegetables soups or milk, has been treated by thermal treatments such as pasteurization or sterilization in order to prolong their shelf-life. The application of these treatments causes a reduction on microorganisms and enzymes, but also a reduction of nutrients and other substances related to product quality. In the last decades, owing to consumer demands for safe but high-quality natural foods (with minimal or no chemical preservatives), producers have been exploring innovative processing methods with minimal heat treatment such as pulsed electric fields (PEF). PEF is a novel and innovative non-thermal minimal processing technology which has the potential to pasteurize several foods via exposure to high-voltage short pulses (μs). PEF technology is able to destroy microorganisms and enzymes preserving the nutritional and quality characteristics of the product treated. The main objective of this doctoral thesis was to study the effect of PEF on bioactive compounds (ascorbic acid, carotenoids, phenolic compounds), total antioxidant capacity (ORAC and TEAC) and physico-chemical characteristics (colour, pH and ºBrix) of an orange juice-milk beverage. Results were compared with that obtained after pasteurization (90ºC, 20 s). Additionally, the shelf-life of this beverage treated by PEF was evaluated during storage at 4 and 10ºC. In order to evaluate the effect of PEF on fatty acids, a study of the application of 35 kV/cm and 40 kV/cm was carried out in a beverage added with omega-3 and oleic acid. On the other hand, due to the lack of an oficial method to determinate total antioxidante capacity, the current work presents a comparision about ORAC and TEAC methods to determinate this capacity in the orange-milk beverage. Immediately after treatment, PEF-treated beverages showed a major retention of bioactive compounds compared with pasteurized ones. However, during storage, fermentation signs appeared for PEF-treated beverages stored at 10ºC.

Dislipemias en el trasplante renal y su relación con la morbimortalidad cardiovascular: un estudio longitudinal en Valencia.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:54 GMT

Dislipemias en el trasplante renal y su relación con la morbimortalidad cardiovascular: un estudio longitudinal en Valencia. Beneyto Castelló, Isabel Objetivos: Conocer la prevalencia y características de las alteraciones del metabolismo lipídico en la población trasplantada de nuestro medio. Estudiar su relación con la aparición de eventos cardiovasculares y con el desarrollo de nefropatía crónica del injerto. Analizar su repercusión sobre la supervivencia de injerto y paciente. Material y método: Se incluyen en el estudio 77 pacientes trasplantados en el Hospital La Fe en un periodo de 14 meses llevándose a cabo un seguimiento longitudinal de los mismos a lo largo de cuatro años. Se realizó una evaluación clínico-analítica de los pacientes en los distintos periodos de seguimiento (pretrasplante, 6 meses, 1, 2, 3 y 4 años postrasplante). El procesamiento de los datos se realizó mediante SPSS v.8, utilizándose técnicas de análisis estadístico tanto uni como multivariante. Resultados: Tras el trasplante se apreció un incremento en las cifras de colesterol total, colesterol LDL y HDL, así como de apolipopreteina B y especialmente en los niveles de Lipoproteína (a) [Lp(a)]. Por el contrario, los niveles de triglicéridos y de apolipoproteína A1 tendieron a disminuir. Los parámetros que, en el análisis multivariante, se mostraron como factores de riesgo para la aparición de eventos cardiovasculares en el postrasplante fueron: la edad, la HTA pretrasplante, la Lp(a)>30 mg/dl pre y postrasplante, la hipertrigliceridemia pre y postrasplante, la creatinina a los 6 meses y el sobrepeso al segundo año. En lo referente al desarrollo de nefropatía crónica del injerto, los parámetros que se comportaron como factor de riesgo independiente fueron: la Lp(a) > 30 mg/dl pre y postrasplante, la hipertrigliceridemia pre y postrasplante y la elevación de VLDL solo en el pretrasplante, por el contrario la edad y la dosis de Ciclosporina > 5 mg/Kg/día se mostraron como factores protectores. Conclusiones: En nuestra serie han sido la elevación de la Lp(a) y la hipertrigliceridemia las principales alteraciones del metabolismo Lipídico que se comportaron como factores de riesgo para la aparición de eventos cardiovasculares y de nefropatía crónica del injerto.; Background Chronic allograft disease (CAD) is the leading cause of late graft failure. Its patogenesis is poorly understood. The importante of the vascular lesions and its similarities with the atherosclerotic process have sugested that lipids may play a pathogenic role. Methods In order to determine the association between different lipid abnormalities and fibrinogen levels in the appareance of CAD we study a group of 77 kidney trasplant patients We make a follow‐up of them with clinical and laboratory parameters befote and annually after trasplantation during four years. Multiple regression analysis was carried out in order to determine which alterations were independent risk factors for CAD. Results Duing the study 19 patients (24,7%) presented CAD. Between the pretransplant parameters analyzed in the multivariate model, the independent risk factors for CAD were the hypertrigliceridemia, VLDL > 25 mg/dl and the Lp (a)> 30 mg/dl. In the same way, the analysis of postrasplant parameters show that again the hypertriglyceridemia and the Lp(a) > 30 mg/dl at one year alter transplantation were independent risk factors for CAD. HDL > 45 mg/dl at one year and dosage of CsA > 5 mg/kg at two years, were related again with a decreased risk to develop CAD. Conclusions Our results show that hypertriglyceridemia and Lp(a) elevation are risk factors for CAD appearance, indeed when they are present before trasplantation. In this context it seems to have a major importance to get an adequate control of hyperlipidemia that could help to preseve renal function as possible.

Gastroenteritis aguda por rotavirus en población infantil ingresada en unidades de lactantes de Valencia.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:53 GMT

Gastroenteritis aguda por rotavirus en población infantil ingresada en unidades de lactantes de Valencia. Gutiérrez Gimeno, Mª Victoria Esta tesis doctoral presenta los resultados obtenidos del estudio epidemiológico observacional descriptivo, de corte transversal, con componente de seguimiento prospectivo y multicéntrico sobre la gastroenteritis aguda (GEA) debida a rotavirus realizado en 3 hospitales de la provincia de Valencia representativos de los tres niveles de atención hospitalaria (H. La Fe, H. Dr. Peset, H. Lluís Alcanyís).
Además de estudiar la prevalencia de la GEA por rotavirus y la incidencia de GEA nosocomial por rotavirus junto a sus características demográficas, clínicas, genotípicas y económicas también se realizó la determinación de otros virus productores de GEA como adenovirus, astrovirus y calicivirus.
La población de estudio incluyó aquellos niños con edades comprendidas entre 1-23 meses ingresados en las unidades de lactantes de los centros participantes durante el periodo de estudio (Octubre-06 a Marzo-07). Se realizó el seguimiento de la población desde el ingreso hasta las 72 horas posteriores al alta y se recogieron los datos pertinentes de todos los pacientes con síntomas de gastroenteritis aguda (GEA= al menos 1 deposición líquidas o 2 semilíquidas en un periodo de 24h), así como una muestra de heces para la determinación en laboratorio centralizado (sección de virus productores de gastroenteritis del Centro Nacional de Microbiología del Instituto de Salud Carlos III) de los diferentes genotipos G y P de rotavirus mediante RT-PCR y de otros virus productores de GEA.
Con los resultados incluidos en esta tesis se dispone de más datos para dar respuesta a cuántos casos de rotavirus y otros virus productores de GEA se dan en nuestro entorno, qué genotipos circulan, cuándo se producen, con qué gravedad, cuántos originamos por la hospitalización y cuánto coste económico supone entre otras preguntas importantes y necesarias a la hora de valorar un problema para poder con posterioridad resolverlo.; This doctoral thesis presents the results obtained in an epidemiological descriptive observational and multicenter study in 3 hospitals (H. La Fe, H. Dr. Peset, H. Lluís Alcanyís), with prospective follow-up on acute gastroenteritis (AGE) due to rotavirus. The centres are representative of the three levels of hospital care in the province of Valencia ( Spain).
This study estimates the prevalence of rotavirus AGE and the incidence of rotavirus nosocomial AGE, the demographic and clinical characteristics, the circulating genotipes and the economic impact of the disease. At the same time, other viruses which produce AGE, such as Adenovirus, Astrovirus and Calicivirus, are identified.
The study population included those children aged between 1-23 months hospitalized in the breast-fed babies units in the participant centres during the study period (October-06 to March-07). The follow-up of the population was performed from the first day of hospitalization until 72 hours after discharge, and the pertinent information was gathered for all the patients with symptoms of acute gastroenteritis (AGE = at least 1 deposition liquid or 2 in a 24h period), as well as a feces sample for the determination of the different genotypes G and P of rotavirus by RT-PCR and other viruses in a centralized laboratory (National Center of Microbiology of the Institute of Health Carlos III).
With the results included in this thesis, there is more information to assess how many cases of rotavirus and other viruses producers of AGE are in our environment, what genotypes circulate, when they emerge, with what severity, how many originated in the hospital and how much economic impact is felt. These and other important and necessary questions are addressed in order to contribute to the assessment and resolution of this problem.

Rendimiento diagnóstico de la tomografía de emisión de positrones por coincidencia (PET-c) en la estadificación del carcinoma pulmonar de célula no pequeña (CPCNP).

Tue, 12 Apr 2011 19:11:52 GMT

Rendimiento diagnóstico de la tomografía de emisión de positrones por coincidencia (PET-c) en la estadificación del carcinoma pulmonar de célula no pequeña (CPCNP). Reyes Ojeda, Mª Dolores Se analiza el rendimiento diagnóstico de la tomografía de emisión de positrones por coincidencia (PET-c) en la estadificación del cáncer de pulmón de célula no pequeña (CPCNP). El proyecto consta de dos partes realizadas de forma sucesiva:

En primer lugar, se diseña y elabora una parte experimental mediante un fantoma para establecer la resolución espacial máxima del equipo utilizado (gammacámara de coincidencia de triple cabezal detector), teniendo en cuenta el efecto de la corrección de atenuación. Se utiliza un fantoma cilíndrico con esferas de diferentes diámetros para simular lesiones pulmonares y distintas condiciones experimentales referidas a la concentración de actividad entre las esferas y el fondo.

En segundo lugar, se analiza el rendimiento diagnóstico de la PET-c tras TAC basado en una cohorte retrospectiva de 188 pacientes con diagnóstico confirmado de CPCNP y tamaño de lesión mayor o igual al establecido previamente como límite de resolución del equipo. La estadificación clínica se establece inicialmente con TAC y en segundo lugar con PET-c y se categoriza en estadios operables e inoperables (según clasificación TNM) para establecer la indicación quirúrgica. La estadificación patológica (pTNM) en los pacientes intervenidos se considera el patrón oro. El análisis de los datos consiste en:
a) Estudio de concordancia (índice de acuerdo observado, kappa simple y kappa ponderado) y
b) Análisis del rendimiento diagnóstico evaluado mediante los parámetros usuales en la valoración de pruebas diagnósticas (Sensibilidad, Especificidad, Valor Predictivo Positivo y Valor Predictivo Negativo) y el cálculo del estadístico C para el análisis de curvas ROC.

La estadificación clínica y tras cirugía de la PET-c tras TAC muestra valores de concordancia que se sitúan en niveles "bueno" y "excelente" respectivamente, siendo superiores a los de la TAC y mostrando diferencias estadísticamente significativas. La PET-c tras TAC permite establecer las estadificación de todos los casos en que la TAC no logra hacerlo, al quedar como "indeterminada" la información, en algunos casos, de los descriptores N y M.

El rendimiento diagnóstico de ambas pruebas al agrupar los pacientes en función de operabilidad / inoperabilidad respecto al patrón oro muestra valores superiores para la PET-c (S: 80%, E: 98%, VPP: 80% y VPN: 98% y estadístico C: 0,89) frente a la TAC aunque no se detectaron diferencias significativas.

Pese a la falta de poder estadístico existente, los resultados del estudio contribuyen a consolidar las ventajas de añadir una PET-c a la TAC en la estadificación del CPCNP, puesto que supone una mejora diagnóstica que resulta trascendental en términos de pacientes inoperables que no son operados y pacientes operables que sí son intervenidos.; The purpose is to analyze the diagnostic performance of coincidence positron emission tomography (PET-c) in the staging of non-small cell lung cancer (NSCLC).

Firstly, we designed an experimental study using a phantom to establish the spatial resolution of the equipment used (a triple head-detector coincidence gammacamera) assessing also the influence of attenuation correction. We used a cylindrical phantom with spheres of different diameters simulating lung lesions. The experimental conditions related to the activity into the spheres and background were modified.

Secondly, we revised 188 patients in order to analyze the accuracy of PET-c after computarized tomography (CT). All patients had confirmed diagnosis of NSCLC and lesions greater than or equal to the limit of resolution of the gammacamera. The clinical stage was initially established with CT and after with PET-c. Patients were classified into operable and non-operable. The pathological stage was considered the gold standard. Data were analyzed by means of a concordance test (agreement index, and kappa value), accuracy (sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value) and analysis of ROC curves.

When performing PET-c after CT, concordance for both the clinical stage and the pathologycal stage showed values "good" and "excellent" respectively, being higher than CT alone. They showed statistically significant differences. The PET-c after CT allowed the staging of all cases in which the CT was unable to stage (cases "unspecified" for descriptors N and M).

The results of the diagnostic performance of both tests are grouped in categories for the surgical indication and compared to the gold standard. PET-c showed higher values (S: 80%, E: 98%, PPV: 80% and NPV: 98% C value: 0.89), than those obtained for the CT, but non significant differences were detected.

Despite the fact that non statistical power exists, these results support the benefits of adding a PET-c in the staging of NSCLC. PET-c improves the diagnostic selection of patients who must not be operated and patients who will obtain surgical benefit.

Obesidad y alteraciones metabólicas: Factores genéticos y ambientales en población mediterránea española.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:52 GMT

Obesidad y alteraciones metabólicas: Factores genéticos y ambientales en población mediterránea española. Sorli Guerola, Jose Vte. INTRODUCCIÓN: La obesidad es una enfermedad metabólica crónica que se define como un exceso de grasa corporal, que suele ir acompañado de un peso superior al considerado como normal para una persona con la misma talla, edad y sexo. La etiología de este síndrome es heterogénea, multifactorial y compleja, caracterizada por el aumento de tejido adiposo, influida por factores metabólicos, fisiológicos, genéticos, celulares, moleculares, culturales y sociales.
HIPÓTESIS Y OBJETIVOS: La obesidad es una enfermedad multifactorial, resultado de la interacción entre la susceptibilidad genética y de factores ambientales, entre los cuales la dieta, el ejercicio físico, el estrés, los acontecimientos vitales, así como el consumo de tabaco, de alcohol y de otras drogas, desempeñan un papel fundamental. Además, el exceso de peso actúa como un importante factor etiológico de dislipemias, hipertensión, hiperuricemia y diabetes, fenotipos que confieren un mayor riesgo en las enfermedades cardiovasculares. Conocer la prevalencia de obesidad y sobrepeso en la población general de la Comunidad Valenciana, y analizar las variables del estilo de vida asociadas a la misma. Estimar la contribución genética y ambiental al índice de masa corporal y a las alteraciones del metabolismo lipídico en la población general y en una muestra de obesos de origen hospitalario de la Comunidad Valenciana.
MATERIAL Y MÉTODOS: Estudio transversal en una muestra aleatoria de pacientes que acuden al Centro de Salud de Paiporta y al Hospital General de Valencia, en aquellos que de forma voluntaria aceptaron participar en éste. Se les realizaron análisis bioquímicos, genéticos, toma de medidas antropométricas, de tensión arterial y finalmente se les administró un cuestionario sobre datos sociodemográficos, hábitos dietéticos, encuesta alimentaria, antecedentes personales y familiares, ejercicio físico, y otras variables del estilo de vida. Posteriormente se creó una base de datos con el paquete estadístico SPSS, donde se recogieron todas las variables incluidas en el cuestionario, así como las variables analíticas obtenidas, para su análisis estadístico.
RESULTADOS: Existe una alta prevalencia, mayor en mujeres, de sobrepeso y obesidad en la población de Atención Primaria de la Comunidad Valenciana. Este exceso de peso corporal se asocia con otras variables del metabolismo lipídico e hidrocarbonado, tensión arterial y otros factores de riesgo cardiovascular. Al estudiar la relación entre los polimorfismos genéticos en los genes candidatos seleccionados, se han obtenido varias asociaciones estadísticamente significativas con las distintas variables antropométricas, con el metabolismo lipídico, con la ingestión de alimentos y hábitos dietéticos, así como con enfermedades relacionadas con la obesidad. Se hallaron interacciones gen-gen entre los polimorfismos analizados entre los genes de la APOE y CETP, leptina y receptor de la leptina, y lipoproteinlipasa y receptor beta 3 adrenérgico.
CONCLUSIONES: Existe una gran complejidad de las múltiples contribuciones genéticas y ambientales en la etiología de la obesidad y parámetros relacionados, que es necesario seguir estudiando y analizando desde la integración genómica y ambiental para obtener un mejor conocimiento que posibilite una mayor individualización en la prevención y tratamiento.; INTRODUCTION: Obesity is a chronic metabolic disease with a weight excess. This syndrome is due to some heterogeneous, multifactorial and complex causes. It is characterized by an increased fat tissue and it is influenced by metabolics, physiologicals, genetics, cellular, molecular, cultural and socials factors.
HYPOTHESIS AND OBJECTIVES: Obesity is a multifactorial disorder which is the result of the interaction between genetics and environmental factors like diet, physical activity, stress, or smoke, alcohol and drugs consumption. Weight gain is related to lipid disorders, hypertension, diabetes and an increased cardiovascular risk. The aim of this study is to investigate the obesity and overweight prevalence in the general population from the Comunidad Valenciana analizing the associated lifestyle factors, and to estimate the genetic and environmental contribution to the body mass index and to the lipid metabolism in this general population and in an obese group of a hospital population from the Comunidad Valenciana.
MATERIAL AND METHODS: A cross-sectional study has been carried out in patients who were consecutively referred to the Primary Care Center of Paiporta and the General Hospital of Valencia. Anthropometrical parameters were measured. Demographic, lifestyle, anthropometric, biochemical and clinical variables were obtained. DNA was extracted and some polymorphisms were determined. Statistical analyses including logistic regression and means comparison were carried out by means of SPSS statistical program. Multivariate regression models with interaction terms were applied to test gene-gene interactions.
RESULTS: There is a high prevalence of overweight and obesity in the Primary Care population from Comunidad Valenciana. Excess weight was associated with increased lipid and glucose concentrations, hypertension and others cardiovascular risk factors. Statistically significant associations were found between some polymorphisms with anthropometrics measures, lipid concentrations, food habits and diseases related to obesity. We observed gene-gene interactions between APOE and CETP, leptin and leptin receptor, lipoproteinlipase and beta 3 adrenergic receptor.
CONCLUSION: Obesity is produced by the action of complex environmental and genetic factors. It is necessary to study and to analyse this disease from an integration model of the genomic and environmental factors to obtain a better knowledge which can be tailored to an individual prevention and treatment.

Desarrollo de métodos rápidos para el control del Bacillus cereus en alimentos.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:51 GMT

Desarrollo de métodos rápidos para el control del Bacillus cereus en alimentos. Martínez Blanch, Juan Fco. Bacillus cereus es un bacilo Gram positivo esporulado contaminante habitual de alimentos tanto frescos como procesados. La detección y cuantificación de este patógeno de alimentos se realiza habi-tualmente por técnicas culturales. Dichas técnicas consumen mucho tiempo y, en ocasiones, llevan a identificaciones erróneas. Como alternativa, las técnicas moleculares basadas en la PCR tienen como ventaja una mayor rapidez y seguridad en la identificación del microorganismo, e incluso permiten su cuantificación mediante PCR a tiempo real (Q-PCR). En este estudio se han desarrollado diferentes métodos para el control de este microorganismo en alimentos, basados en la técnica de la PCR.

A partir de una colección de cepas de referencia y aislados de alimentos, identificados previamente por métodos fenotípicos, (ISO 7932 y API-50CH/B) y genotípicos, (ISR-PCR y RAPD), se determinó la presencia de genes relacionados con factores de virulencia mediante PCR convencional. El gen pc-plc se detectó en un mayor porcentaje en las cepas del "grupo B. cereus", y dado que se encuentra en una única copia por genoma, fue seleccionado como gen diana. Se diseñaron 4 oligonucleótidos para el desarrollo de procedimientos de Q-PCR en modo SYBR Green y Taqman. Se optimizaron los parámetros de la reacción de cuantificación, y se evaluó su especificidad para el "grupo B. cereus", resultando más adecuado el procedimiento de SYBR Green Q-PCR. A continuación se ensayó la capacidad para la detección y cuantificación en alimentos contaminados artificialmente: huevo líquido y leche en polvo infantil. Como resultado el sistema desarrollado ha demostrado su capacidad para la cuantificación de B. cereus entre 105 y 100 ufc/ml a partir de la matriz ensayada, que corresponde al mismo nivel que el método de referencia por recuento en placa.
Dado que B. cereus puede estar presente en alimentos tanto en forma vegetativa como esporulada, para su detección por PCR se abordó, asimismo el desarrollo de un protocolo para asegurar la liberación del DNA a partir de esporas. Se partió de suspensiones calibradas de esporas que fueron sometidas a diferentes tratamientos: a) térmicos y b) adición de germinadores en diferentes combinaciones. Tras los tratamientos, se realizó la extracción de DNA con DNeasy Tissue kit (Qiagen), se cuantificó y se evaluó el rendimiento espectrofluorimétricamente (PicoGreen, Invitrogen) y mediante PCR convencional y SYBR Green Q-PCR. El tratamiento de germinación con 0,5 mM L-alanina/inosina resultó el más eficiente en suspensiones concentradas de esporas. Sin embargo, cuando se ensayó en alimentos inoculados (104 - 100 esporas/ml), la extracción con DNeasy Tissue Kit, sin necesidad de tratamientos previos, resultó satisfactorio.

Por último, se realizó una aproximación cuantitativa para la detección de formas viables de B. cereus. Para ello se desarrolló un procedimiento de PCR a tiempo real con transcripción inversa (Q-RT-PCR) utilizando como diana el RNA mensajero del gen pc-plc, como indicador del estado de viabilidad celular. El nivel de sensibilidad obtenido por Q-RT-PCR fue de 30 células/reacción a partir de suspensiones celulares, y de 847 células/reacción tras su aplicación en huevo líquido.

Los procedimientos de Q-PCR y Q-RT-PCR desarrollados en este estudio han mostrado ser eficientes para detectar la presencia de las especies del "grupo B. cereus" en alimentos, al menos al mismo nivel que el método de referencia, permitiendo además la cuantificación incluso de formas viables.; Bacillus cereus is a rod-shaped, Gram-positive sporeforming bacterium widely recognized as a food poisoning organism. Detection of this pathogen in food is usually carried out by culture techniques that are time consuming and frequently lead to misidentifications. As an alternative, molecular genetic techniques allow rapid, sensitive and accurate detection. In the present work, PCR based systems were applied for a rapid and unequivocal detection of "B. cereus group" which would be very valuable in food safety assessment.

The presence of virulence genes was tested by PCR amplification in a collection of reference strains and food isolates that had been phenotypically and genotypically characterized. The pc-plc gene showed the highest prevalence among the tested strains and five oligonucleotides were designed in order to develop SYBR Green and TaqMan real-time PCR (Q-PCR) procedures. The SYBR Green Q-PCR was applied on spiked liquid egg and dried infant formulae showing suitable quantification results in a range of 105 to 100 ufc/ml, and high degrees of correspondence between Q-PCR assays and plate counts. To assess detection of B. cereus spores by PCR procedures, several DNA isolation methods were tested on spore suspensions: i) heat treatment and ii) germination triggered by nutrient germinants followed by DNA isolation (DNeasy tissue kit, Qiagen). Recovery of DNA was evaluated by PCR, Q-PCR, and PicoGreen fluorescence (Invitrogen). Germination with L-alanine 0.5 mM/inosine 0.5 mM rendered the maximum rate of DNA at 108 spores/ml. However, DNA extraction without any modifications rendered similar DNA recovery on 105 to 100 spores/ml range. Spore detection was established in 3-4 spores/reaction using both spore suspensions and spiked food samples. Besides pathogen detection, cell viability is important in food safety. Thus a one-step Q-RT-PCR detection system, was established to investigate the presence of metabolically active cells. By using this approach, 30 cells/reaction and 847 cells/reaction were detected in cell suspensions and spiked liquid egg samples, respectively.

The developed Q-PCR and Q-RT-PCR systems proved to be highly sensitive and specific for the rapid and accurate detection and quantification of species of the "B. cereus group" in food, and constitute a promising tool in the detection of B. cereus including spores as well as viable cells.

Factors personals i laborals associats als accidents de treball mortals.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:50 GMT

Factors personals i laborals associats als accidents de treball mortals. Villanueva Ballester, Vicent La investigació de les causes dels accidents de treball mortals (ATM) es justifica per l'impacte des del punt de vista qualitatiu i per la necessitat de basar les estratègies preventives en l'evidència científica. Els objectius d'aquest treball són: descriure la distribució territorial i sectorial dels ATM a Espanya, avaluar-ne l'impacte, analitzar el paper de determinats factors de caire individual o agregat en la producció d'ATM, tant personals (edat, sexe) como laborals (ocupació, tipus de contracte, grandària de l'empresa, centre de treball i tasca habitual o no, hora del dia de l'accident, hora de la jornada de l'accident, dia de la setmana i circumstàncies de l'accident), així com de determinades magnituds macroeconòmiques (PIB i PIB per càpita, creixement econòmic, Jornada efectiva, Hores treballades i Índexs de temporalitat i rotació), i elaborar una proposta estructurada de mesures preventives a través d'un mètode estandarditzat. Per a assolir aquestos objectius s'ha fet l'anàlisi dels Anys Potencials de Vida Perduts (APVP) deguts a ATM, s'han calculat les incidències d'ATM (I) per comunitat autònoma, crues i estandarditzades per sector econòmic, s'ha fet una anàlisi ecològica la unitat d'anàlisi de la qual han estat les comunitats autònomes, s'ha fet un contrast estadístic de les circumstàncies dels ATM (forma de producció, agent causant, naturalesa i ubicació de les lesions) mitjançant la prova de xi quadrat, s'ha fet una anàlisi de casos i controls simple i multivariant mitjançant l' ajust d'una funció de regressió logística, i s'ha fet una anàlisi discriminant que incorpora totes les variables personals, laborals i de circumstàncies de l'accident. Finalment, s'ha elaborat una proposta de mesures preventives a través del mètode de la matriu de Haddon tridimensional. Els resultats indiquen que i) s'han trobat diferències sectorials i territorials estadísticament significatives en relació amb l'impacte (APVP) i la freqüència dels ATM (I), sense patró aparent de distribució territorial; ii) les diferències territorials no s'han trobat associades als indicadors macroeconòmics considerats; iii) els ATM difereixen de manera estadísticament significativa pel que fa als accidents de treball no mortals quant a la forma de producció, l'agent causant, el tipus de lesió i la part del cos lesionada; iv) l'edat avançada, el sexe masculí, el treball en els sectors d'agricultura i construcció, el treball en un centre no habitual o en una tasca no habitual, les empreses de 50 treballadors o menys, l'hora avançada de la jornada laboral i el treball de vesprada o nit estan associats significativament al resultat mortal dels accidents de treball. Aquests resultats poden servir com a punt de partença per al disseny de programes preventius en relació als ATM.; Research on the causes of fatal occupational injuries (FOI) is justified by their qualitative impact and the need of basing preventive strategies on the scientific evidence. The objectives of this work were: to describe the distribution of FOI in Spain by autonomous community and economic sector, to assess their impact, to analise the role of some individual or aggregate factors in the occurrence of FOI: personal (age, sex), occupational (job, type of contract, company size, usual or unusual workplace or job, hour of the day, hour of the workshift, day of the week and circumstances of the accident), or macroeconomic (GDP and GDP per head, economic growth, overall and mean worked hours and job temporarity or rotation), and to develop a structured proposal of preventive measures through a standardised method. To achieve these aims, an analysis of the Years of Potential Life Lost (YPLL) due to FOI, a calculation of FOI incidence (I) by autonomous community -raw and standardised by economic activity-, an ecologic analysis with autonomous communities as a unit of analysis, a chi square test on FOI circumstances (way of production, causing agent, nature and part of the body injured), a case-control analysis with the adjustment of a logistic regression function, and a discriminant analysis including all variables considered, were performed. Finally, a proposal of preventive measures through the three-dimensional Haddon matrix was done. Results show that i) statistically significant differences by economic activity and autonomous community on impact (YPLL) and incidence of FOI (I) were found, without any apparent pattern of territorial distribution, ii) territorial differences were not found to be related to the macroeconomic indicators considered, iii) FOI show statistically significant differences compared to non FOI regarding way of production, causing agent, nature and part of the body injured, iv) older age, male gender, working on agriculture and construction, working in an unusual workplace or job, companies with 50 workers, later workshift hours and working on the evening or night were significantly related to a fatal result of an occupational injury. These findings can serve as a starting point to design preventive programmes on FOI.

Estrés oxidativo en el glaucoma primario de ángulo abierto. Prevención de la ceguera por glaucoma.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:50 GMT

Estrés oxidativo en el glaucoma primario de ángulo abierto. Prevención de la ceguera por glaucoma. Zanón Moreno, Vicente Con este estudio hemos pretendido demostrar que los mecanismos de estrés oxidativo y nitrosativo están relacionados con el glaucoma primario de ángulo abierto (GPAA), y que los neurotransmisores están implicados en las señales que relacionan la hipertensión ocular (HTO) con la muerte por apoptosis de las células ganglionares de la retina y la pérdida subsecuente de las fibras del nervio óptico, lo que conduce a la atrofia óptica y a la ceguera glaucomatosa.
Este estudio de casos y controles lo hemos realizado en muestras de humor acuoso y plasma de sujetos con glaucoma primario de ángulo abierto y sujetos con cataratas no patológicas (grupo comparativo), seleccionados de entre aquellos que acudieron a las consultas de oftalmología del Hospital Universitario Dr. Peset (Valencia), Centro de Especialidades de Monteolivete (Valencia) y Hospital Punta de Europa (Algeciras).
A cada individuo se le realizó un examen oftalmológico completo (presión intraocular, agudeza visual, fondo de ojo, campo visual y análisis de fibras nerviosas por GDx).
Se evaluó el estrés oxidativo mediante la determinación del malonildialdehído (MDA, producto de la peroxidación lipídica), la determinación de la actividad antioxidante de las enzimas superóxido dismutasa (SOD) y glutation peroxidasa (GPx) y la determinación del estado antioxidante total (AOXT). El estrés nitrosativo mediante la determinación de la concentración total de óxido nítrico (ON). Los niveles de serotonina (5-HT) y su principal metabolito (ácido 5-hidroxiindolacético, 5-HIAA) se determinaron por HPLC; y la expresión de la proteína poli (ADP-ribosa) polimerasa-1 (PARP1) mediante western blot e immunoblotting.
Los niveles de MDA, SOD, GPx y ON resultaron superiores significativamente en el grupo de sujetos con glaucoma respecto al grupo de cataratas. El estado antioxidante total observado en el grupo glaucoma fue significativamente inferior al observado en el grupo cataratas. Se observó una disminución en los niveles de 5-HT en los sujetos con glaucoma frente a los sujetos con cataratas, aunque la diferencia no fue significativa; y un aumento significativo en los niveles de 5-HIAA en el grupo glaucoma frente al grupo cataratas. Por último, la expresión de PARP1 resultó significativamente superior en el grupo de sujetos con glaucoma respecto al de sujetos con cataratas.
Hemos demostrado un aumento del estrés oxidativo y del estrés nitrosativo en el glaucoma primario de ángulo abierto frente a las cataratas. La serotonina y su metabolito actúan facilitando la alteración de la homeostasis del humor acuoso en pacientes con glaucoma, permitiendo el aumento de la presión intraocular. El aumento de la expresión de la proteína poli (ADP-ribosa) polimerasa-1 demuestra que en el glaucoma se produce un aumento de la muerte por apoptosis de las células, tanto de las células de la malla trabecular y de las células ganglionares de la retina.
Las moléculas analizadas en el presente estudio podrían ser utilizadas como marcadores de la progresión de la enfermedad glaucomatosa, facilitando el control de la misma y, de este modo, frenando la progresión hacia la ceguera irreversible.; The aim of this study is to demonstrate that oxidative and nitrosative stress mechanisms are related to primary open-angle glaucoma (POAG) and that neurotransmitters are involved with the signals that linked the ocular hypertension (OHT) with the retinal ganglion cell death by apoptosis and the loss of optic nerve fibers, which lead to optic atrophy and glaucomatous blindness.
This case-control study has been carried out in aqueous humor and plasma samples of subjects with POAG and subjects with non-pathological cataracts (comparative group), selected from Dr. Peset University Hospital (Valencia), Monteolivete Specialities Centre (Valencia) and Punta de Europa Hospital (Algeciras).
Oxidative stress has been tested by means the malodialdehyde determination (MDA, a product of lipid peroxidation), the antioxidant activity determination of superoxide dismutase (SOD) and glutatión peroxidase (GPx) enzymes and the total antioxidant status assay (TAS). Nitrosative stress has been evaluated by analyzing the total nitric oxide concentration (ON). Serotonin (5-HT) and hydroxiindolacetic acid (5-HIAA) levels have been determined by HPLC. Finally, the expression of poly (ADP-ribose) polymerase-1 (PARP1) has been tested by western blot and immunoblotting.
We have demonstrated with this study an increase of oxidative and nitrosative stress in POAG subjects with respect to cataracts subjects. Serotonin and its metabolite act facilitating the alteration of the homeostasis of the aqueous humor in glaucoma patients, leading to an increase in intraocular pressure. Results of PARP1 expression prove that there is an increase of cell death by apoptosis in primary open-angle glaucoma.
The molecules tested in this study may be used as markers of glaucoma progression and might help us to prevent the glaucomatous blindness.

Estudio de la evolución de la fracción lipídica de productos destinados a la alimentación infantil durante el almacenamiento.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:49 GMT

Estudio de la evolución de la fracción lipídica de productos destinados a la alimentación infantil durante el almacenamiento. García Llatas, Guadalupe En la actualidad, se comercializa una amplia variedad de productos para la
alimentación infantil. La calidad de las materias primas, los tratamientos
tecnológicos y las condiciones de almacenamiento pueden modificar el valor
nutritivo de su fracción lipídica e influir en su seguridad por la formación de
compuestos tóxicos.
El conocimiento de la calidad de la fracción lipídica de los alimentos infantiles
permite evaluar los efectos que el procesado y/o almacenamiento ejercen sobre ella
y optimizar los procesos tecnológicos utilizados en su elaboración.
El objeto del estudio es conocer la evolución, a lo largo de su vida útil, de la
fracción lipídica en papillas de cereales con leche (PCL) listas para el consumo
destinadas a la alimentación infantil.
Los parámetros analizados son: perfil lipídico, TBARS, compuestos volátiles,
esteroles y sus productos de oxidación (SOP). Para evaluar la influencia del tiempo
y de la temperatura de almacenamiento en la estabilidad de la fracción lipídica de
las muestras, se aplica un diseño factorial completo con 3 factores: a) Tiempo de
almacenamiento (0, 1, 2, 4, 5, 7, 8 y 9 meses), b) Temperatura de
almacenamiento (25, 30 y 37 ºC) y c) Tipo de muestra (A- con miel y B- con
frutas).
Las conclusiones más relevantes son:
- La determinación de TBARS es poco útil para monitorizar el estado de oxidación,
ya que, debido a las reacciones entre los distintos componentes de las papillas, se
producen durante el almacenamiento aumentos y disminuciones del
malondialdehido.
- El método por SPME-CG, puesto a punto y validado para la determinación de
compuestos volátiles, es útil para evaluar la estabilidad de la fracción lipídica de
fórmulas para lactantes (FL) y PCL.
- A lo largo del almacenamiento disminuyen los contenidos de pentanal, hexanal y
heptanal de las PCL, mientras que el de pentano aumenta; en ambos casos influye
la temperatura. Se propone un modelo predictivo útil para estimar el tiempo de
almacenamiento de las PCL a partir de los contenidos de pentanal y heptanal.
- El aumento del contenido de pentano durante el almacenamiento indica que la
degradación lipídica iniciada en el procesado continúa. Su determinación puede
usarse para evaluar la oxidación de las PCL.
- El hexanal es el compuesto volátil mayoritario de PCL y FL. El mayor contenido de
hexanal de las FL puede atribuirse a su menor actividad del agua y su mayor
contenido de grasa (25%).
- Las PCL tienen un contenido de esteroles de 6.4%, de los cuales el 5.1% son
fitosteroles. El β-sitosterol es el mayoritario (3.4%), seguido del campesterol
(1.2%); estigmasterol y brassicasterol son menos abundantes.
- Se han detectado y cuantificado un total de 22 compuestos distintos procedentes
de la oxidación de esteroles, siendo mayoritario el 7-cetositosterol. El
almacenamiento no influye en los contenidos de esteroles oxidados, a excepción del
epoxicampesterol y el sitostanotriol.
- Las diferencias obtenidas entre los SOP, con respecto a los esteroles de
procedencia, indican el distinto grado de oxidación de la grasa de la leche y los
aceites vegetales; estas diferencias pueden atribuirse a las distintas condiciones a
que han sido sometidos durante su procesado.
Como conclusión general del estudio realizado se señala que durante la vida útil de
las PCL, el grado de oxidación de los ácidos grasos y de los esteroles es bajo. Sin
embargo, los potenciales efectos negativos para la salud de los productos de oxidación lipídica hacen necesario su control. Es de destacar la gran influencia que
ejercen la calidad de las materias primas y el proceso de elaboración sobre el
estado de la grasa del producto final, pues sus efectos son superiores a los del
almacenamiento.; The quality of raw materials, technological treatments and storage conditions of
products for infant feeding can modify the nutritional value of their lipid fraction
and affect their safety due to formation of toxic compounds.
The objective is to know the evolution of the lipid fraction in cereals and milk-based
ready-to-eat foodstuffs for infant feeding (MCF) throughout their shelf-life.
The parameters analysed are: fatty acid profile, TBARS, volatile compounds, sterols
and their oxidation products (SOP). In order to evaluate the influence of storage
time and temperature, a three-factor design is applied: Storage time (0-9 months),
storage temperature (25, 30 and 37 ºC) and kind of sample (honey and fruits).
The most relevant conclusions are:
- TBARS determination is not useful for monitoring the oxidation stage, due to
reactions between the different components of the MCF, increases and decreases on
MDA contents are produced.
- The SPME-GC method, developed and optimized, for the determination of volatile
compounds, is useful to evaluate the stability of the lipid fraction.
- Pentanal, hexanal and heptanal contents decrease through storage, whereas
pentane content increases. A predictive model useful for estimating the storage
time of the MCF from pentanal and heptanal contents is proposed.
- The increase in pentane content throughout storage points out that lipid oxidation
initiated during processing continues. Its determination can be used in order to
evaluate the oxidation in MCF.
- The sterol content of MCF is 6.4%, from which a 5.1% are phytosterols. β-
Sitosterol is the most representative, followed by campesterol, stigmasterol and
brassicasterol.
- A total of 22 different SOP have been identified and quantified, being the 7-
ketositosterol the most abundant.
- The differences obtained between SOP, with respect to the original sterols,
indicate the different oxidation level of milk and vegetable oils; these differences
may be attributed to the quality of the raw materials and different conditions
applied during processing.
As a final conclusion it can be stated that during the shelf-life of MCF, fatty acids
and sterols show a low oxidation pattern. However, the potential negative health
effects of the lipid oxidation products confirm the need of their control.

La migraña. Su impacto y repercusión laboral.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:49 GMT

La migraña. Su impacto y repercusión laboral. Vicente Herrero, Mª Teofila En el ámbito de la medicina del trabajo la cefalea como concepto general y la migraña en particular, constituyen un problema de salud frecuente y resulta ser también el primer motivo por el que los pacientes requieren asistencia neurológica especializada y de atención primaria dentro del sistema público de salud. Para los médicos del trabajo, constituyen no sólo un motivo de consulta, sino un problema de salud con implicaciones laborales, económicas y personales. Las crisis de dolor pueden producir una importante limitación en la actividad laboral del trabajador enfermo en relación con la intensidad del dolor, con su duración y con su recurrencia, pudiendo interferir de forma importante en las relaciones personales y familiares, en las actividades de ocio e incluso en el desarrollo profesional o educacional cuando comienzan en etapas precoces como la infancia o la adolescencia. Pero además, la cefalea tiene una repercusión importante en absentismo laboral y en la disminución de la productividad en la mayoría de los pacientes afectados. Aunque se trata de una patología conocida desde la antigüedad y estudiada durante años, aspectos importantes como su repercusión socioeconómica o laboral en un problema de salud tan prevalente, siguen estando todavía no totalmente definidos. En los últimos años, y fundamentalmente desde 1988 en que la IHS (International Headache Society) estableció los criterios diagnósticos de cefaleas, que han sido recientemente actualizados en el 2003, han proliferado los estudios clínicos sobre cefaleas, y especialmente sobre las dos más prevalentes, migraña y cefaleas tensionales. Entre estos trabajos se encuentran los primeros dedicados a la evaluación objetiva de la repercusión de la cefalea en la vida diaria del paciente y en la cuantificación de su impacto económico-laboral. Estos datos, junto a los generales de prevalencia, nos han permitido cuantificar mejor la carga individual (repercusión en su calidad de vida) y global (repercusión socioeconómica) que la enfermedad representa, información imprescindible a la hora de planificar los recursos sanitarios y las acciones preventivas y terapéuticas.
En los últimos años, se han realizado múltiples estudios en distintos países occidentales, tendentes a determinar los costes de la cefalea tanto directos como indirectos. Los costes directos son relativamente bajos, suponiendo la pérdida de productividad y el absentismo (costes indirectos) el mayor determinante de los mismos. El objetivo fundamental del estudio realizado en Correos es conocer la prevalencia de la enfermedad, la demanda de servicios sanitarios y la satisfacción con la asistencia recibida, así como, la repercusión de la migraña en la productividad y absentismo laboral en un sector público cuantitativamente importante y para el que no existen datos previos. El estudio realizado en Correos, muestra un beneficio empresarial con un descenso en el equivalente de días perdidos desde 0,48 antes de la intervención (basal), a 0,20 (visita 1) y 0,07 (visita 2) post-intervención p<0,0001, con una repercusión en costes por migraña desde los 34 /paciente (basal), a 14 euros/paciente (visita 1) y 5 /paciente (visita 2) (p<0.0001). Se adentra este estudio, como novedad, en otros aspectos de repercusión laboral no cuantificables, pero con implicaciones empresariales y personales para el trabajador tales como, la conflictividad laboral en relación a la enfermedad y su frecuencia, la demanda de cambio de puestos de trabajo y la limitación en oportunidades laborales relacionadas con la migraña. Las conclusiones del estudio destacan la rentabilidad de las acciones intervencionistas o educacionales relacionadas con cefalea y migraña desde los Servicios Médicos del trabajo y la eficacia obtenida con la actuación en los trabajadores en cuanto a valoración asistencial y de control y seguimiento posterior de la enfermedad migrañosa desde los Servicios de Prevención de las empresas.; Migraine is associated with a significant productivity loss to employers, who may benefit from making a migraine intervention available to their employees. The Objective of this study is to discover the prevalence of headache and to evaluate changes in migraine-related productivity and non-workplace impairment associated with a migraine intervention program from the employer perspective. The Method used, has been a survey that was sent to 61.665 post office employees and in a second phase, a pre-test post-test study of Spanish Postal Service employees with migraine. The intervention consisted of counselling from occupational health physicians and symptomatic treatment, additional medications for migraine prophylaxis, and rescue medications. Migraine-related work loss and non-workplace impairment (interference with daily and social activities) were self-reported at baseline (pre-intervention) and separately following each migraine headache (post-intervention) with the aid of a diary. Migraine related work loss was reported as work loss due to absenteeism, reduced productivity while at work, and the sum of the two (total lost work day equivalents [LWDE]). An employer perspective was taken for the cost analysis, and this productivity costs were the only costs considered. The results obtained have been: A low answer survey rate, a high headache Prevalence, a low medical care demand and a very-low qualification with the previous medical care obtained. The intervention program included 436 patients that comprised the population for analysis. The number of migraine-related LWDE per migraine attack were 0.48 days per migraine headache in the month before the intervention, decreasing to 0.20 days and 0.07 days per migraine headache during the first and second migraine headaches following the intervention (p < 0.0001 vs. baseline). Total migraine-related productivity costs per migraine headache were 34/patient before the intervention, decreasing to 14/patient and 5/patient during the first and second headaches following the intervention (p < 0.0001). Conclusion: This study documents the value of a workplace migraine intervention program, which focused on migraine prevention and symptomatic treatment. It also highlights the important role occupational health clinics can play in helping employers and employees reduce the burden of migraine.

Análisis de residuos de contaminantes orgánicos en alimentos por técnicas cromatográficas.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:48 GMT

Análisis de residuos de contaminantes orgánicos en alimentos por técnicas cromatográficas. Juan García, Ana La contaminación de los alimentos por sustancias químicas es un problema de salud pública de gran preocupación a escala mundial. El motivo puede ser consecuencia de la contaminación ambiental que puede alcanzar a las cadenas alimentarias a través del aire, del agua y del suelo. Contribuye también el uso intencionado de diversos productos químicos, tales como pesticidas, fármacos o sustancias administradas a los animales, y de otros productos agroquímicos (abonos, etc). Algunos aditivos utilizados en alimentos así como la fabricación y el procesamiento de los mismos también pueden aportar contaminantes.
Por tanto son muchos los contaminantes orgánicos que pueden estar presentes en alimentos, como micotoxinas, plaguicidas, y otros compuestos asociados a la contaminación ambiental o bien sustancias que por el procesado, conservación y/o envasado pueden encontrarse en los alimentos.
Para vigilar la seguridad alimentaria, diversas agencias medioambientales y de calidad se encargan de que la legislación se cumpla de forma rigurosa, mediante la aplicación de métodos analíticos adecuados para la detección de contaminantes en alimentos de forma rápida y eficaz, utilizando metodologías multirresiduo y realizando muestreos y controles sobre los alimentos en fase de comercialización.
A lo largo del último siglo, los avances logrados en las condiciones sanitarias de las producciones vegetales y animales junto con el establecimiento de los sistemas veterinarios de higiene e inspección de los alimentos, han conducido a una situación de garantías sanitarias excelentes. A pesar de ello, el interés de la población por la "seguridad alimentaria" se ha convertido en una exigencia por parte de los ciudadanos en tanto que son consumidores responsables.
El análisis de contaminantes orgánicos en alimentos engloba muchas disciplinas incluidas la química, bioquímica y la microbiología. Están presentes a unas concentraciones extremadamente bajas, en mezclas complejas de compuestos de los alimentos naturales. Sin embargo, cualquier técnica que se utilice en el análisis de alimentos debe alcanzar o ser capaz de separar los compuestos de la matriz y la identificación de los contaminantes a niveles traza.
En esta tesis, el objetivo principal fue la determinación de residuos de diferentes contaminantes orgánicos (plaguicidas y medicamentos veterinarios) por diferentes técnicas cromatográficas a fin de obtener resultados que permitan poner de manifiesto el grado de seguridad alimentaria.
Para ello, se abordan diversos objetivos parciales: 1.-Extracción de residuos de plaguicidas y medicamentos veterinarios por procedimientos clásicos de extracción en fase sólida, y otros más innovadores, como extracción sobre barras magnéticas y extracción presurizada con disolventes. 2.- Análisis de plaguicidas por cromatografía líquida-espectrometría de masas previa utilización de los métodos de extracción en fase sólida y extracción sobre barras magnéticas. 3.-Comparación de las técnicas de preconcentración en línea, para el análisis de plaguicidas a fin de alcanzar unos límites de detección adecuados para su determinación en frutas y verduras por electroforesis capilar. 4.-Estudiar el empleo de la espectrometría de masas como técnica de determinación acoplada a la electroforesis capilar en sus variantes electroforesis capilar-simple cuadrupolo y electroforesis capilar-trampa de iones para llevar a cabo la detección de residuos de plaguicidas y medicamentos veterinarios. 5.-Aplicación de los procedimientos de análisis seleccionados a diversos alimentos de origen vegetal como, uva, fresa, tomate, lechuga, melocotones, y nectarinas, y alimentos de origen animal como pescado y carne de pollo y cerdo.
Se concluyó que la determinación simultánea y cuantitativa en muestras de alimentos procedentes de la Comunidad Valenciana, mediante la utilización de extracción en fase sólida, extracción sobre barras magnéticas o extracción presurizada con disolventes y electroforesis capilar con detector de filas de diodos o espectrometría de masas, pone de manifiesto la utilidad de la electroforesis capilar en la determinación de residuos de plaguicidas en matrices complejas hortofrutícolas como uva, lechuga, tomate, fresa, melocotón y nectarinas y residuos de medicamentos veterinarios en alimentos de origen animal como pescado y carne de pollo y cerdo.
La presencia de residuos de contaminantes orgánicos en alimentos, aunque en un pequeño porcentaje de muestras y generalmente a bajas concentraciones, hace necesario el desarrollo y la optimización de métodos para que su correcta determinación permita una adecuada seguridad alimentaria.; Food contamination by chemical substances is a Public Health problem, all over the world. The cause could be as a consequence of environmental contamination that food chains could rise through air, water and soil as it occurs in the case of metals, PCBs, dioxins, etc. Contribute also the deliberate (intentionate) use of several chemical products, as pesticides, drugs or different substances administrated to animals and other agrochemical products. Few additives used in food as manufacturing and processing that can also contribute to add contaminants.
In order to control food safety, several environmental and quality agencies take care of the compliance of legislation, through the application of adequate analytical methods to determinate in quick and efficient of contaminants in food by using multirresidue methodologies and carrying out sampling and food controls in food in commercializing phase.
To analyze organic contaminants in food is a hard task which implies different and many disciplines as chemistry, biochemistry and microbiology. It is not a easy task, and many contaminants could be enumerated. They are presented at very low concentrations, complex matrices and among compounds of natural food. However, to analyze samples with complex matrices and with analytes at very low concentrations makes necessary to apply separation techniques in analytical procedures with the double objective of improve selectivity and sensibility. In this context, different separation analytical techniques, being of special relevance chromatographic techniques has been developed, because of the importance in actual analytical chemistry.
The objective of this thesis is the determination of residues of two organic contaminants, pesticides and veterinary drugs, by using different chromatographic techniques to evaluate the degree of food safety.
For this, partial objectives have to be approached:
1.-Pesticide and veterinary drugs residues extraction by using classical extraction procedures, as solid phase extraction and other more innovatives, as stir bar sorptive extraction and pressurized solvent extraction.
2.-Pesticide analysis by liquid cromatography-mass spectrometry previous the use of the extraction methods like solid phase extraction and stir bar sorptive extraction.
3.-Comparison of on-line preconcentration techniques, for the pesticide analysis in order to reach adequated limits of detection for its determination in fruits and vegetables by capillary electrophoresis.
4.-Study the use of mass spectrometry as a determination technique coupled to capillary electrophoresis using different mass analyzers, capillary electrophoresis-single quadrupole and capillary electrophoresis-ion trap to carry out these techniques in pesticide and veterinary drugs residue detection.
5.-Apply the selected analytical procedures to different vegetable products as grapes, strawberry, tomato, lettuce, peaches and nectarines, as well as to animal food such as fish, chicken and pork.
It was concluded that the quantitative and simultaneous determination in food samples from Valencian Community, through solid phase extraction, sitr-bar sorptive extraction or pressurized liquid extraction and by capillary electrophoresis with diode array or mass spectrometry detection, make known the utility of capillary electrophoresis for pesticide residues determination in complex fruit and vegetable matrices as grape, lettuce, tomato, strawberry, peach and nectarines and veterinary drug residues in animal origin food as fish and chicken and pork meat.
The presence of organic contaminants residues in food, although in few samples percentage and often at a low concentrations, makes necessary to develop and optimize methods in order to ensure that its correct determination allows an appropriate food safety.

Análisis de aflatoxinas y ocratoxina A en alimentos y evaluación de la ingesta poblacional.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:48 GMT

Análisis de aflatoxinas y ocratoxina A en alimentos y evaluación de la ingesta poblacional. Juan García, Cristina Las micotoxinas son sustancias producidas por determinados hongos presentes en alimentos destinados para alimentación humana o animal, y por su carácter tóxico pueden dar lugar a las enfermedades denominadas micotoxicosis.
De ellas son las aflatoxinas (AFs) y la ocratoxina A (OTA) las que mayor preocupación han generado en el Comité Científico de Alimentación Humana de la Unión Europea, debido a los riesgos que el consumo continuado de estas micotoxinas a través de los alimentos comporta para la salud humana, por su poder mutagénico y cancerígeno, que se ha visto demostrado en animales expuestos a alimentos contaminados por ellas.
La presencia natural de AFs y OTA está asociada a diferentes alimentos, por el crecimiento de especies fúngicas. Así las AFs se pueden encontrar en maíz, cacahuetes, arroz, vino y semillas de soja, debido al crecimiento en ellos de las especies fúngicas Aspergillus flavus, A. parasiticus y A. nomius. Mientras que la OTA se ha encontrado en cereales y derivados, legumbres, café, especias, cacao, frutos secos, malta y bebidas como la cerveza, por el crecimiento de los hongos Penicillium verrucosum y A. ochraceus.
Las medidas legislativas sobre micotoxinas son recientes y en la actualidad cuentan con regulación específica a nivel comunitario las AFs y la OTA, entre otras. Y sólo para algunos alimentos se han establecido contenidos máximos admisibles, ingestas diarias y semanales tolerables y protocolos para su control, en el análisis y toma de muestras.
Por este motivo los objetivos de esta tesis han sido:
- Estudiar la extracción de AFs y OTA.
- Estudiar la determinación de AFs y OTA por cromatografía líquida con diferentes técnicas de detección.
- Aplicar los métodos seleccionados al análisis de materias primas y alimentos elaborados.
- Calcular la ingesta diaria de AFs y OTA y su comparación con las ingestas diarias admisibles establecidas por el comité mixto de expertos de la FAO/OMS sobre aditivos alimentarios.

Para ello se han empleado la técnica de extracción clásica con disolventes orgánicos, la extracción acelerada, dispersión de matriz en fase sólida, extracción con fluidos supercríticos y extracción con columnas de inmunoafinidad. Y se ha realizado estudio de la determinación de AFs y OTA por cromatografía líquida con las técnicas de detección fluorescencia, espectroscopia de masas y masas-masas. Estos métodos se han aplicado para el análisis de cereales y derivados, frutas, frutos secos y piensos procedentes de España, Portugal y Marruecos.Con los datos obtenidos se ha realizado el cálculo de la ingesta diaria de AFs y OTA utilizando los datos de consumo de cada país. El riesgo que implica el consumo de estas micotoxinas se ha evaluado comparando la ingesta diaria real con las ingestas diarias admisibles establecidas por el comité mixto de expertos de la FAO/OMS sobre aditivos alimentarios.
Con el trabajo realizado, se puede concluir que:
La extracción líquida presurizada de OTA ha proporcionado los resultados más exactos, precisos y reproducibles.
La confirmación de la OTA por espectrometría de masas de triple cuadrupolo proporciona resultados más selectivos aunque la sensibilidad es ligeramente superior con la detección de fluorescencia.
La incidencia de OTA en arroz ha sido del 13 % para las muestras procedentes de Portugal, 14 % para las de España y 39 % para las de Marruecos. En las muestras de pan analizadas esta incidencia ha sido del 39 % para las procedentes de Portugal y un 48 % para las de Marruecos. En los frutos secos procedentes de Marruecos, se ha obtenido una incidencia del 31 %.
La incidencia de AFs en cereales, frutos secos y piensos comercializados en Marruecos es del 51, 26 y 67 %, respectivamente. De ellas, la AFB1 es la más frecuente y de mayor concentración.
Las ingestas diarias estimadas de OTA por el consumo de los alimentos analizados son: 1 ng/kg pc/día para España, 4.27 ng/kg pc/día para Portugal y 125.5 ng/kg pc/día para Marruecos. La ingesta diaria estimada de AFs para la población de Marruecos es de 15.22 ng/kg pc/día.; Mycotoxins are receiving increasing attention for its toxic effects and high incidence in a wide range of food commodities. Sufficient experimental evidence for carcinogenicity in animal studies has led to the classification of ochratoxin A as a possible human carcinogen (group 2B) and aflatoxin B1 as carcinogen (group 1) by the International Agency for Research on Cancer (IARC 1993). The Joint Committee FAO/WHO of Experts on Food Additives (JECFA) has established a provisional tolerable weekly intake (PTWI) of OTA at 100 ng kg/ of body weight corresponding to approximately 14 ng /kg body weight/day (JECFA 2001) and for aflatoxins as low are possible (ALARA).

In Mediterranean and North African (Morocco) Area the climatic conditions characterized by high humidity and temperature and inadequate storage contribute to the potential for a significant mycotoxins exposure of population. Due to the significant health risks, it is important to establish a data collection on the occurrence of aflatoxins and ochratoxin A in foods. Much attention has been paid recently in the world to monitor the presence of aflatoxins and ochratoxin A in agricultural products intended for consumption and/or exportation.

So that the objectives of this thesis were: study different OTA extraction methods in several matrices; analyze AF and OTA by liquid chromatography using different detection techniques; study different confirmatory processes of AF and OTA; evaluate the presence of AF and OTA in cereals, cereal products, dry fruits and poultry feed, purchased from supermarkets and markets from Spain, Portugal and Morocco; estimate daily intake of AF and OTA for Spanish, Portuguese and Moroccan population through analyzed samples; and compare AF and OTA estimated daily intake with tolerable daily intake proposed by official organisms, in order to evaluate the risk of exposing to both mycotoxins.

Resistencia frente a la infección por Penicillium digitatum durante la postcosecha de los frutos cítricos. Bases moleculares y metabolismo de fenilpropanoides.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:47 GMT

Resistencia frente a la infección por Penicillium digitatum durante la postcosecha de los frutos cítricos. Bases moleculares y metabolismo de fenilpropanoides. Ballester Frutos, Ana Rosa Penicillium digitatum es el agente causal de la podredumbre verde de los frutos cítricos y constituye uno de los patógenos más importantes durante la postcosecha de los mismos, llegando a causar hasta el 80 % de las podredumbres. Aunque el control de este patógeno se realiza en la actualidad con fungicidas químicos, existe una tendencia al abandono de los mismos y al empleo de estrategias alternativas de control. La inducción de resistencia natural en los frutos constituye una de estas alternativas. En el presente trabajo se pretende profundizar en las bases biológicas y moleculares de la inducción de resistencia en los frutos cítricos frente a un ataque por P. digitatum.
Se han evaluado distintos métodos de inducción de resistencia frente a P. digitatum con el fin de optimizar y seleccionar uno de ellos con el que abordar los estudios posteriores. Se compararon diversos tratamientos químicos (metil jasmonato, ácido β aminobutírico y Brotomax®) y biológicos (hongos no patógenos de cítricos y paredes celulares de P. digitatum), así como un tratamiento de infección previa con P. digitatum y posterior inactivación térmica del patógeno. Se seleccionó este último sistema atendiendo a los buenos niveles de resistencia alcanzados (la incidencia se redujo más de un 70 % y la severidad más de un 85 %) y a la reproducibilidad del mismo.
El tratamiento seleccionado se empleó para estudiar los cambios globales de expresión génica durante la inducción de resistencia. Estos cambios se analizaron en el flavedo y el albedo de frutos cítricos empleando dos micromatrices de cDNA desarrolladas por el Consorcio de Genómica Funcional de Cítricos, denominadas 7k y 12k, que contienen aproximadamente 7.000 y 12.000 genes respectivamente. Las mayores inducciones se detectaron en genes que codifican enzimas del metabolismo de fenilpropanoides, especialmente metiltransferasas (OMTs), de la síntesis de etileno, entre los que se encuentran varios genes ACO (ácido 1-metilciclopropano 1-carboxílico oxidasa), proteínas relacionadas con la patogénesis (proteínas PR) y oxidorreductasas. También se observó una importante reducción de la expresión de genes regulados por bajas temperaturas, de genes inducibles por la luz y de otros de función desconocida. El análisis de anotación funcional por ontologías génicas mostró que los procesos relacionados con el metabolismo de aminoácidos y de fenilpropanoides se indujeron en los frutos sometidos al tratamiento de inducción de resistencia respecto a los frutos no tratados, siendo estos cambios mayores en el tejido interno.
Una vez finalizado el tratamiento de inducción de resistencia tiene lugar un aumento de la producción de etileno, que es comparable al que se observa en frutos infectados por P. digitatum. Sin embargo, en los frutos en los que se induce resistencia no hay desarrollo del hongo, por lo que todo el etileno procede del fruto. Mediante análisis Northern se ha comprobado que este aumento de los niveles de etileno coincide con una elevada inducción de la expresión del gen CsACO, al igual que ocurre en frutos infectados. Es de reseñar que las mayores inducciones tienen lugar en el albedo.
Para profundizar en el estudio de la implicación de la ruta de fenilpropanoides se procedió a analizar la expresión de genes que codifican las enzimas PAL, 4CL, F3H, IRL1, CADs, SAD y OMTs mediante hibridación Northern. Se observó que la expresión de la mayor parte de estos genes aumentaba en respuesta al tratamiento inductor, con un patrón similar en ambos tejidos. Aunque en general los niveles de expresión fueron superiores en el flavedo, las mayores inducciones se detectaron en el albedo. Además, se realizó un estudio de la expresión de estos genes en respuesta a la infección por P. digitatum, observándose que los cambios fueron, en general, similares a los inducidos por el tratamiento de inducción de resistencia.
El estudio de esta ruta se completó con la determinación del perfil metabólico de compuestos secundarios en los frutos cítricos mediante HPLC. En los frutos no tratados se observó en general una mayor abundancia y concentración de compuestos fenólicos en el flavedo respecto al albedo. Sólo la concentración de algunas flavanonas fue mayor en el albedo. La escoparona, 6,7-dihidroxicumarina, fue el compuesto con mayor inducción en respuesta al tratamiento inductor. Sin embargo, el mayor número de cambios como consecuencia de la infección y posterior inactivación térmica se observó en los derivados del ácido benzoico. Al igual que en respuesta al tratamiento inductor, durante la infección por P. digitatum se observó una modificación en la concentración de derivados del ácido benzoico.
También se ha analizado la posible actividad antifúngica in vitro e in vivo de diversas cumarinas, flavanonas y alcaloides sobre diferentes hongos patógenos. Las cumarinas escoparona y umbeliferona y la flavanona hesperidina fueron los compuestos con mayor actividad antifúngica in vitro, aunque ninguno de ellos inhibió por completo el crecimiento de los hongos patógenos de cítricos. Sin embargo, sólo las dos cumarinas mostraron un efecto in vivo retrasando el desarrollo de P. digitatum en frutos inoculados con este patógeno. La adición al medio de cultivo de algunos alcaloides presentes en los cítricos redujo significativamente el crecimiento de P. digitatum, siendo la cafeina y el ácido 1, 2, 3, 4-tetrahidroharmane 3-carboxílico (THHCA) los compuestos más efectivos.
Este trabajo constituye la primera aproximación en el que se aborda conjuntamente un análisis transcriptómico y metabolómico de procesos relevantes en patología postcosecha. Los resultados obtenidos ponen de manifiesto la importancia que desempeñan tanto el metabolismo secundario, especialmente de fenilpropanoides, como el etileno en el proceso de resistencia inducida en frutos cítricos frente a la infección por P. digitatum.; Penicillium digitatum is the causal agent of green mould and constitutes the major postharvest pathogen of citrus fruit, accounting for up to 80 % of losses due to fungal decay. Although control of this pathogen is achieved by chemical fungicides, there is a trend to adopt new and safer control alternatives. Induction of natural resistance in fruit constitutes one of these alternatives. The aim of this work was to gain an insight into the biological and molecular bases of the induction of resistance in citrus fruit against P. digitatum.
Different methods to induce resistance against P. digitatum have been evaluated in order to optimize and to select one of them for further studies. Various chemical (methyl jasmonate, β-aminobutyric acid and Brotomax®), biological (non pathogenic fungi of citrus and cellular walls of P. digitatum) treatments, as well as the possible resistance induced by a previous infection with P. digitatum followed by its inactivation by a heat treatment were compared. The latter system was selected because of the high resistance achieved (the incidence was reduced more than 70 % and the severity more than 85 %) and its reproducibility.
Global changes in gene expression induced by the selected treatment were analyzed in the flavedo and albedo of citrus fruit. To that end, two cDNA microarrays developed by the Citrus Functional Genomics Project, named 7k and 12k, which contain about 7.000 and 12.000 genes, respectively, were used. The highest inductions were detected in genes that code for enzymes involved in phenylpropanoid metabolism, mainly methyltransferases (OMTs), ethylene biosynthesis, among which there are several ACO genes (1-aminocyclopropane 1-carboxylic acid oxidase), pathogenesis-related proteins (PR) and oxidoreductases. An important reduction in the expression of genes regulated by either cold or light, together with others of unknown function, was also observed. Gene ontology comparisons showed that processes related to amino acids and phenylpropanoid metabolism were upregulated in treated fruits, being these changes more marked in the internal tissue.
An increase in ethylene production was observed after the heat treatment, coincident with the resistance acquisition, reaching a concentration similar to that observed in fruits infected by P. digitatum. Nevertheless, in the treated fruits the fungus does not progress, so the rise in ethylene must be due to the fruit. Northern blot analysis showed that this increase in ethylene paralleled a high induction on CsACO expression, as it occurs in infected fruits, and that the highest induction takes place into the albedo.
In order to get a deeper insight into the role of the phenylpropanoid metabolism in the induction of resistance, the expression of genes encoding PAL, 4CL, F3H, IRL1, CADs, SAD and OMTs was analyzed by Northern blot. The expression of most of these genes increased in response to the induction treatment, showing a similar pattern in both tissues. Although the overall expression levels were higher in the flavedo, the highest inductions were detected in the albedo. In addition, changes in the expression of these genes in response to the infection by P. digitatum were similar to those originated by the induction of resistance treatment.
The putative involvement of this pathway was further studied by examining changes in the metabolic profile by means of HPLC. In the treated fruits a greater abundance and a higher concentration of phenolic compounds in the flavedo with respect to the albedo were observed. Flavanones were the only phenolics whose concentration was higher in the internal tissue. Although the coumarin scoparone was the phenolic compound showing the highest increase in response to the treatment, it has to be pointed out that, among the different phenylpropanoids, benzoic acid derivatives were the most affected. Similar changes were detected during the infection of fruits by P. digitatum.
The possible antifungal activity of diverse coumarins, flavanones and alkaloids was tested both in vitro and in vivo against different pathogenic fungi. The coumarins scoparone and umbelliferone and the flavanone hesperidin showed the highest in vitro antifungal activity, although none of them inhibited completely the growth of the citrus fungal pathogens analyzed. However, only the coumarins had an effect in vivo delaying the development of P. digitatum in inoculated citrus fruit. On the other hand, addition of some alkaloids detected in citrus tissues to the culture medium significantly reduced the growth of P. digitatum, being caffeine and 1, 2, 3, 4-tetrahydroharmane 3-carboxylic acid (THHCA) the most effective.
This is the first work undertaking both a transcriptomic and a metabolomic approach to study changes associated with relevant processes in postharvest pathology. The global results indicate that both the secondary metabolism, mainly phenylpropanoids, and ethylene play important roles in the induction of resistance in citrus fruit against P. digitatum infection.

El perfil de salud de Nöttinghan y el cuestionario de salud SF-36 como instrumentos de medicina de la calidad de vida en mujeres gestantes.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:46 GMT

El perfil de salud de Nöttinghan y el cuestionario de salud SF-36 como instrumentos de medicina de la calidad de vida en mujeres gestantes. Grao Castellote, Carmen Margarita Introducción. Objetivos
El embarazo es un período de cambios físicos y emocionales que puede
tener un impacto significativo sobre la salud percibida de la gestante. Para
evaluar la influencia de dichos cambios en el ámbito laboral, social y familiar y
detectar problemas de salud de índole físico y mental se han aplicado los
cuestionarios de salud percibida, el Perfil de salud de Nottingham (PSN) y el
Cuestionario de Salud SF-36; y el cuestionario de Apoyo Social de Duke-Unc.
Material. Método
Se estudiaron 238 mujeres gestantes atendidas en un Centro de salud de la
Comunidad Valenciana (Manises) de enero de 1997 a junio de 1999. Se ha
realizado un trabajo descriptivo longitudinal aplicando conjuntamente el Perfil
de Salud de Nottingham (PSN) y el Cuestionario de Salud SF-36 (SF-36) en
tres etapas del período gestacional (semana 12, 24 y 37) para contar con
determinaciones transversales de salud percibida en cada trimestre. El perfil
social se ha valorado a través de una encuesta social y el Cuestionario de
Apoyo Social Funcional de Duke-Unc. Se han recogido variables
socioeconómicas y clínicas (antecedentes personales, hábitos tóxicos,
problemas de salud, planificación embarazo, factores de riesgo, asistencia
obstétrica pública o privada, causas de baja laboral, derivación o no a consejo
genético, ganancia ponderal en la gestación, peso del recién nacido, número
de ecografías y exámenes de salud efectuados). Para el análisis estadístico se
creó una base de datos con el software SPSS v. 10 para Windows, calculando
medidas de tendencia central y dispersión para la presentación descriptiva. Se
aplicaron los tests: t de Student, ANOVA, X2 de Pearson, coeficiente de
correlación de Pearson, y análisis multivariante, y el análisis de consistencia
interna para estimar la validez de las mediciones.
Resultados
Se han evaluado 1904 cuestionarios de salud a través de 238 gestantes con
una edad media de 28 (DT: 4,6).y un rango entre 18 y 37 años. El nivel de
estudios predominante fue segundo grado-segundo ciclo (52%), y la situación
laboral más frecuente el trabajo cualificado o semicualificado. El 60% eran
primíparas, el 28% presentaban embarazos sin abortos previos y un 12%
contaba con abortos anteriores; se detectaron 32 embarazos de riesgo, y el
problema de salud más frecuente fue la amenaza de aborto (7%). La
prevalencia de un apoyo social escaso es baja (5%). Las alteraciones de la
calidad de vida relacionada con la salud, son significativamente mayores para
las gestantes que cuentan con un pobre apoyo social, siendo más evidente en
las secciones emocionales. La vida sexual, las tareas domésticas y el trabajo
fueron las actividades de la vida afectadas con mayor frecuencia. En el análisis
comparativo de la evolución, el sueño, la movilidad física, el dolor y la energía
son las áreas de salud integradas en el PSN que disminuyen el nivel de
bienestar conforme avanza la gestación. Respecto al SF-36, los cambios de
salud percibida se detectan para las áreas físicas (rol y función física), dolor,
vitalidad, y función social, que muestran un descenso del nivel de salud con el
avance gestacional. La salud mental y el rol emocional mejoran con el progreso
del embarazo. El embarazo de riesgo se relacionó con peor salud percibida en
las reacciones emocionales, y el bajo nivel educacional de la pareja con
alteraciones en las áreas sociales, sueño y dolor.
Conclusiones
Los Cuestionarios de salud utilizados han mostrado una consistencia interna
entre moderada y alta. Los resultados obtenidos indican que los factores
socioculturales, los recursos de apoyo social y las condiciones clínicas de
embarazos previos influyen considerablemente en la salud percibida de la
población tanto física como emocionalmente, lo que respalda su uso como
complemento a la historia clínica de la paciente.; Objectives: Pregnancy is a period of physical and emotional changes that can
have a significant impact on the perceived health of pregnant women. To
evaluate the influence of these changes in work, social and family areas, we
used the Nottingham Health Profile (NHP), Medical Outcomes Study Short
Form (SF-36), and the Duke-UNC Functional Social Support Questionnaire.
Material and methods: All women attended at the Manises (Valencia, Spain)
Family Medicine Clinic between January 1997 and June 1999 were invited to
participate in the study. Initially 264 subjects were recruited, but 30 were
excluded (16 because of spontaneous abortions, 10 because of change of
address). Finally 238 women were subjects in the study. They completed the
Medical Outcomes Study Short Form SF-36, and the Nottingham Health Profile
in weeks 12, 24 and 37 of their pregnancies. In the first pregnancy visit they
responded to a social interview and the Social Support Duke-UNC
Questionnaire. Socio-demographic status, health and obstetric history, and
feelings about the current pregnancy were recorded.
Results:1904 health questionnaires from 238 pregnant women with an average
age of 28 years (Standard Deviation = 4.6) were evaluated. The majority of the
women had high school level educations (52%) and skilled or semi-skilled jobs.
60% were first pregnancies, 12% had previous abortions; 32 risky pregnancies
were detected and 7% of the pregnancies presented threat of aborting. Results
of SF-36 showed lowest perceived well-being in the physical dimensions, pain
vitality and social function. The NHP detected major effects in the areas of
sleep, physical mobility, pain and energy.
Social support was low in 5%. Alterations in quality of life related to health are
significantly greater for pregnant women with poor social support, being more
evident in the emotional sections. Sex life, housework and work were the
activities most frequently affected. Risky pregnancy is related to a lower
perceived level of health in emotional reactions, and a low educational level of
the couple is related to alterations in social areas, sleep and pain.
Conclusions: Socio-cultural factors, social support resources and the clinical
conditions of previous pregnancies considerably influence the perceived health
of the studied population, both physical and emotional, which reinforces the use
of these questionnaires and interviews as complements to the clinical history of
the patient.

Estudio de la reacción de Maillard en papillas listas para el consumo.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:46 GMT

Estudio de la reacción de Maillard en papillas listas para el consumo. Bosch Juan, Lourdes La calidad nutritiva/proteica de las papillas infantiles puede modificarse durante su elaboración y almacenamiento por el desarrollo de la reacción de Maillard (RM). El objeto final del trabajo es contribuir a un mejor conocimiento del desarrollo de esta reacción durante el almacenamiento de papillas de cereales con leche (PCL) listas para el consumo.
Se optimiza y valida un método para la determinación de aminoácidos resistentes a la hidrólisis ácida, metionina y cisteína, por cromatografía líquida de alta resolución (CLAR) en fase reversa con detección de fluorescencia, previa derivatización con AQC (6-aminoquinolil-N-hidroxisuccinimidil carbamato). El triptófano se determina con hidrólisis básica, sin derivatización y por CLAR/UV. Estos métodos se aplican a PCL (multicereales, 8 cereales con miel, y cereales y frutas), y se observa que tienen un perfil similar, que a la vez es parecido al de la leche, su principal componente. Una ración de PCL (250 mL) contribuye significativamente al cumplimiento de las ingestas dietéticas recomendadas (RDA) de lactantes y niños de corta edad. El índice químico estimado (FAO/OMS, 1985) viene dado por el triptófano (aminoácido limitante).
Se estudia la evolución de la RM durante el almacenamiento de PCL a tres temperaturas (25, 30 y 37ºC) durante 9 meses, midiendo indicadores de las distintas etapas de la RM: furosina (etapa inicial), por CLAR/UV; AGEs y pentodil-lisina (etapa avanzada), por fluorimetría; y color (etapa final), utilizando un colorímetro Hunter Labscan. Estos indicadores aumentan de forma gradual a lo largo del almacenamiento de las PCL y con la temperatura. Se proponen modelos predictivos, en función de las variables tiempo, temperatura y/o tipo de muestra, que explican un porcentaje elevado (80-96%) de la variabilidad encontrada en la formación de dichos compuestos. Las correlaciones parciales entre los indicadores estudiados no son significativas, lo que sugiere diferentes vías de formación. Según los resultados obtenidos, los compuestos fluorescentes y coloreados se formarían, mayoritariamente, por vías paralelas. La adición de miel a las PCL puede favorecer el desarrollo de las primeras etapas de la RM. Los compuestos coloreados no varían por pequeños cambios en la composición de las PCL.
Finalmente, se optimiza y valida un método de determinación de carboximetil-lisina (CML) por cromatografía de gases con detección FID (ionización de llama), previa derivatización con N-metil-N-(tert-butildimetilsilil)-trifluoroacetamida (MTBSTFA), y se aplica a las PCL, a sistemas modelo con diferentes tipos de proteína y otros alimentos. El método permite la medida simultánea de CML, lisina y lisinoalanina (LAL) (aminoácido artificial formado durante el calentamiento de alimentos ricos en proteínas). En los sistemas modelo estudiados, la proteína que proporciona mayor cantidad de CML es la BSA, seguida de la soja, la caseína y el gluten. Las PCL recién fabricadas no contienen CML ni LAL, pero en muestras almacenadas durante 9 meses a 37ºC se detecta CML (69.1-118.2 mg/100g proteína).; The thermal treatments applied in infants foods manufacture and the storage period favour the development of the Maillard reaction (MR), than can affect the protein quality. The final aim of this work was to study the development of MR in milk-cereal based ready-to-eat infant foods.
The validation of a pre-column derivatization procedure with 6-aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl carbamate (AQC) to the determination of the amino acid content by reverse-phase high performance chromatographic (RP-HPLC) with fluorescence detection was carried out. Tryptophan was determined by RP-HPLC with UV detection after basic hydrolysis. Three different milk-cereal based infant foods were analyzed. The amino acid profiles were similar in all samples, and also similar to the amino acid profile of milk, their main component. A infant food serving (250 mL) contributes significantly to fulfillment of the Recommended Dietary Allowances for infants and young children. Tryptophan was the limiting amino acid in the analyzed infant foods.
Furosine, fluorescent AGEs (advanced glycation end products) and color formation were measured in the three mentioned infant foods stored at 25º, 30º and 37ºC for 9 months to evaluate the initial, advanced and final stages of the MR, respectively. Temperature increase and storage time had a great effect on the formation of these MR indicators. Predictive model equations were obtained explaining 80-96% of the variability in the formation of these compounds. The partial correlations between the studied parameters were nonsignificant, suggesting different pathways in their formation. Parallel formation of fluorescent and colored compounds is proposed. Color is less sensitive to small changes in sample composition. The presence of honey can favour the first steps of MR.
The validation of a method for evaluating protein quality by simultaneous analysis of lysine, carboxymethyllysine (CML) and lysinoalanine (LAL, crosslinking product) by gas chromatography-FID prior N-tert-butyldimethylsilyl-N-methyltrifluoroacetamide derivatization was carried out. Model systems were studied to know the influence of protein source on the rate of carboxymethylation. CML and LAL were not detected in just manufactured milk-cereal based infant foods; however, levels of CML from 69 to 118 mg/100 g protein were measured in milk-cereal based infant foods stored at 37ºC for 9 months.

Caracterización de los compuestos aromáticos en embutidos crudos curados y estudio de los factores que afectan a su generación.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:45 GMT

Caracterización de los compuestos aromáticos en embutidos crudos curados y estudio de los factores que afectan a su generación. Marco Celdrán, Aurora Los objetivos de esta tesis consistían en determinar y caracterizar los principales compuestos aromáticos responsables del aroma típico a curado de los embutidos crudos curados; y determinar el efecto del uso de diferentes sales de curado y la aplicación de diferentes procesos de fermentación, en la generación de los mismos. Para determinar el efecto de las sales de curado y del proceso de fermentación en los embutidos, se realizaron dos fabricaciones de embutidos de gran calibre. En la primera, se fabricaron dos lotes de embutidos según el método de fermentación tradicional, cada lote contenía únicamente nitrito o nitrato. En la segunda fabricación se repitió el mismo procedimiento, pero esta vez cada uno de los lotes se dividió en dos que se sometieron a fermentación tradicional e industrial, respectivamente. Para controlar el proceso de fabricación se analizaron en todas las etapas: la población microbiana, el pH y la humedad, la concentración real de nitrito y nitrato en las muestras y las sustancias que reaccionan con el ácido tíobarbitúrico. Para caracterizar analíticamente las muestras se realizaron análisis sensoriales, se estudio el perfil de ácidos grasos y de compuestos volátiles en los embutidos, y se aplicó a las muestras seleccionadas la técnica olfatométrica de frecuencia de detección para determinar los compuestos aromáticos activos y la técnica de múltiple extracción en fase sólida del espacio de cabeza (múltiple HS-SPME) para cuantificar los compuestos aromáticos identificados.
En primer lugar, se optimizó la técnica de micro-extracción en fase sólida del espació de cabeza (HS-SPME), y se observó que el recubrimiento de fibra bipolar, Carboxen/Polidimetilxilosano, era el que permitía extraer mayor variedad y rendimiento de compuestos volátiles. Se observó que la adición de diferentes sales de curado, nitrito o nitrato, en los embutidos crudos curados afectaba a los mecanismos de hidrólisis y oxidación de los lípidos, y también a la generación de compuestos volátiles procedentes del metabolismo microbiano. Sin embargo, los agentes de curado tuvieron efectos diferentes en la calidad de dichos embutidos dependiendo del proceso de fermentación, es decir, de la realización o no de la etapa de estufaje en el proceso de fabricación. La preferencia de los consumidores por los embutidos fabricados con nitrato y sometidos a fermentación lenta pudo ser debida a los bajos niveles de oxidación y a las mayores proporciones de compuestos volátiles derivados de la fermentación de carbohidratos y del catabolismo de los aminoácidos. Sin embargo, la utilización de diferentes agentes de curado en el proceso de fermentación rápida, no produjo diferencias apreciables por los consumidores, sino únicamente pequeñas diferencias de naturaleza química, como una mayor proporción de compuestos volátiles procedentes de la oxidación lipídica en los embutidos fabricados con nitrito. El uso del nitrato sólo se vería justificado en el proceso de fermentación lenta donde produjo un aumento de la calidad sensorial de los embutidos, ya que no se observó un beneficio apreciable desde el punto de vista sensorial en el proceso de fermentación rápida. El empleo de la técnica de frecuencia de detección indicó que el aroma típico de los embutidos crudos curados no se debió a un compuesto volátil en particular sino a la proporción adecuada de una gran variedad de compuestos volátiles de diversa naturaleza química. En este sentido, la adición de nitrito o nitrato únicamente afectó a la proporción existente de dichos compuestos volátiles. La técnica de HS-SPME múltiple permitió la cuantificación de los compuestos volátiles presentes en los embutidos crudos curados. Sin embargo, dicha cuantificación no reflejó la proporción de compuestos volátiles percibidos por el consumidor, debido a la presencia de interacciones entre la matriz del embutido (lípido-proteína) y los compuestos volátiles.; The aim of this thesis was to analyse the main volatile aromatic compounds responsible for the typical cured flavour of dry fermented sausages, and also to determine the effect of different curing processes and the use of nitrite or nitrate in their generation. For this purpose dry fermented sausages were manufactured with the addition of either nitrite or nitrate as curing salts. Different batches of these sausages were submitted to slow or rapid fermentation processes. The pH, humidity, microbiology and concentration of nitrite, nitrate and TBARS were analysed in all stages and sausages to control the fermentation process. In addition, sensory analysis was performed on the finished sausages, profiles of lipids and volatiles compounds were carried out, detection frequency olfactometry technique was applied to determine the main aroma-active volatile compounds, and multiple HS-SPME was fulfilled to quantify the aroma-active compounds identified. HS-SPME technique was optimised for its use with the fibre coating Carboxen/Polydimethylsiloxane, which allowed extracting the highest variety and yield compound. The use of different curing salts in dry fermented sausages affected hydrolysis and oxidation of lipids, and also generation of volatile compounds arising from microbial metabolism. Consumers preferred dry fermented sausages with added nitrate and submitted to slow fermentation process, probably due to lower levels of fat oxidation and higher proportions of volatile compounds arising from carbohydrate fermentation and amino acid catabolism. The use of nitrate would be justified in the slow fermentation processes were the results presented above were significant. Using the detection frequency technique demonstrated that the typical cured flavour of dry fermented sausages is not due to a single compound but to the right proportion of several compounds of different chemical nature. The multiple HS-SPME technique allowed the volatile compounds present in dry fermented sausages to be quantified, however it does not indicate which of these compounds were perceived by the consumers.

Estudio de parámetros nutritivos y de calidad en alimentos de origen vegetal procesados por tecnologías no térmicas.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:44 GMT

Estudio de parámetros nutritivos y de calidad en alimentos de origen vegetal procesados por tecnologías no térmicas. Cortés Fenollar, Clara La nueva tecnología "pulsos eléctricos de alta intensidad (PEAI)" de conservación de alimentos líquidos, se basa en el efecto letal de pulsos de muy corto voltaje y muy corta duración (microsegundos) sobre los microorganismos, en principio sin pérdidas significativas para los factores de calidad. La calidad es el parámetro que más contribuye a la aceptación por parte del consumidor y a un aumento del valor añadido. Sin embargo cualquier tecnología nueva que se desee aplicar a un alimento en particular, debe demostrar que el producto elaborado tiene unas cualidades superiores al mismo producto elaborado de forma tradicional.
El gran interés de la aplicación de estos estudios a la horchata, zumo de naranja-zanahoria y zumo de naranja, se basa en la creciente demanda de bebidas o zumos naturales, dado su mayor calidad nutritiva y sensorial.
La horchata de chufa natural tiene un gran potencial en el mercado alimentario, el cual está muy limitado por su corta vida útil. Se describe la caracterización de este producto y los resultados obtenidos al estudiar las variaciones de diferentes parámetros de calidad tras el procesado por PEAI del mismo. El zumo mezcla de naranja-zanahoria y el zumo de naranja son ricos en vitamina C y carotenoides. Se pone a punto y se valida un método cromatográfico para la determinación de carotenoides en ambos tipos de zumos.
Posteriormente, se estudian los cambios que se producen en los carotenoides, vitamina A y vitamina C del zumo de naranja-zanahoria tras su tratamiento mediante PEAI y durante su almacenamiento en refrigeración (2 y 10ºC), comparándose con el zumo de naranja-zanahoria pasteurizado (98ºC, 21s). Además, se estudian las variaciones que se producen en los carotenoides y vitamina C del zumo de naranja-zanahoria sin tratar durante su almacenamiento en congelación a -40ºC.
En el zumo de naranja, se describen los cambios observados en cuanto a color, carotenoides, vitamina A, vitamina C y otros parámetros físico-químicos y de calidad, tras procesar el zumo de naranja por PEAI y pasteurización (90ºC, 20s), así como al almacenarlo en refrigeración (2 y 10ºC).
Finalmente, se determina también la influencia del tratamiento térmico (45ºC-90ºC) y del tratamiento por Altas Presiones (AP) (300-800 MPa) sobre la textura de diferentes variedades de tomate utilizadas en la industria alimentaria para su procesado. Se estudia la inactivación de las enzimas involucradas en la degradación de la pectina del tomate (Poligalacturonasa y Pectinmetilesterasa), responsables de la textura de los productos derivados del mismo.
El trabajo que se presenta proporciona información científica sobre la variación de parámetros nutritivos y de calidad de todos estos alimentos de origen vegetal, necesaria para aplicar unas condiciones de tratamiento por PEAI o AP, con el fin de obtener alimentos procesados de alta calidad y de larga vida útil conservados a temperatura de refrigeración.; High Intensity Pulsed Electric Field (HIPEF) is one of the nonthermal minimal processing technologies interesting for scientists and food industry as a new, alternative (preservation) process for liquid food.
Consumers desire high quality foods that are nutritious, with freshly prepared flavor, texture and color, with minimal or no chemical preservatives, and above all safe. Consequently, newly developed food technologies usually focus on preservation while keeping food quality attributes.
"Horchata de chufa" (tiger nut milk) is of high nutritional quality and therefore has great potential in the food market, limited by its very short shelf-life. The present work studies whether PEF can be used to obtain a quality horchata and increase its shelf-life while maintaining its organoleptic characteristics.
Orange-carrot juice and orange juice are an important source of vitamin C and carotenoids. In this work a method for determination of carotenoids in orange-carrot juice and orange juice was established and validated, in order to evaluate their nutritive quality.
Afterwards, the effects of HIPEF, with different electric field intensities and different treatment times, on orange-carrot juice and orange juice carotenoids, ascorbic acid, vitamin A and other quality parameters were evaluated, and the results obtained were compared with the ones produced by pasteurization of the juices These parameters were studied also during refrigerated storage (2 and 10ºC) of the juices.
The stability of orange-carrot juice stored at -40ºC for 132 days was studied, analysing ascorbic acid and carotene content.
Finally, the effect of thermal (45ºC-90ºC) and high pressure (HP) (300-800 MPa) treatments on Polygalacturonase (PG) and Pectinmethylesterase (PME) activity extracted and purified from different tomato varieties used in the tomato processing industry was determined, as a basis for identifying the processing conditions that allow obtaining processed tomato products with improved textural properties.
The present work provides scientific information about the variation of quality and nutritional parameters of some vegetable products after applying PEF or HP treatments, in order to obtain high quality food products with long shelf life stored in refrigeration.

Evaluación de la actitud docente del tutor de la especialidad de medicina de familia y comunitaria.

Tue, 12 Apr 2011 19:11:44 GMT

Evaluación de la actitud docente del tutor de la especialidad de medicina de familia y comunitaria. Gil Latorre, Francisca Objetivos generales:
1. Elaborar un instrumento de medida que nos permita medir la actitud docente de los tutores de Atención Primaria en la formación del RMFyC de Valencia, durante el tercer año de la residencia durante el periodo de mayo 2000 a mayo 2004.
2. Medir la actitud docente del TMFyC de Valencia con el instrumento que se ha elaborado.
Objetivos especificos
1. Determinar áreas conceptuales o dimensiones de la actitud docente del TMFyC de Valencia, basadas en resultados de un grupo de discusión realizado con un grupo de residentes de MFyC.
2. Elaborar y validar un instrumento de medida para la evaluación de la actitud docente del TMFyC en la formación del RMFyC.
3. Analizar las actitudes docentes de los TMFyC con relación a la formación del RMFyC.
4. Analizar los factores asociados a la actitud docente de los tutores de MFyC.
Diseño:
1º fase, Estudio observacional prospectivo de construcción de un instrumento de evaluación de la actitud docente del tutor, por métodos cualitativos y posterior validación.
2º fase, Estudio descriptivo transversal que mide la actitud docente del tutor
Ámbito de estudio: Unidad docente de MFyC de la provincia de Valencia.
Sujetos de estudio: Todos los tutores de MFyC de Valencia en el año 2003-2004. N=100 tutores distribuidos en 29 centros de salud docentes
Instrumentalización: técnicas grupales, con un grupo de discusión. Utilizándose como instrumento de intervención los residentes 3º año de MFyC. con grabación de la sesión.
Construcción del instrumento:
1. Elaboración del cuestionario a partir de los resultados del grupo de discusión, Pretest a una muestra de TMFyC y Test-retest
2. - Validez del cuestionario: a) Validez de contenido b) Validez de construcción
- Fiabilidad del cuestionario: a) La consistencia interna b) La estabilidad en el tiempo
Resultados: 43 ítems Consistencia interna, Alfa de cronbach=0,961 Fiabilidad, Correlación Spearman= 0.925; Correlación Intraclase 0.924. Se eliminaron 8 items por su poca fiabilidad, quedando 35 Items en el cuestionario final.
El análisis factorial identifica diez factores importantes de la actitud docente del tutor de MFyC siendo el porcentaje de varianza explicada por el modelo de 72,362. El cuestionario de Actitud docente del tutor, mide dicha actitud en 35 ítems, con un rango de 34,4 a 175 puntos. La puntuación media del cuestionario de actitud docente que se paso a los tutores es de 130,99 y DE 14,35. El análisis bivariado de las variables que describen al tutor no son significativas con la actitud docente del tutor excepto la variable satisfacción profesional Beta= 1,050 (.55-1.55) y publicaciones Beta=1.21 (.007-2.417)
Conclusiones: Se ha elaborado y validado un instrumento de medida para la evaluación de la actitud docente del tutor de la especialidad de MFyC.
El instrumento permite evaluar la actitud docente de los tutores de MFyC.
Se ha relacionado la satisfacción profesional y la publicación con la actitud docente de tutores de MFyC que permitirá diseñar estrategias para mejorar la actitud docente de los tutores.; Keywords:Educational attitude; Qualitative study; Tutor; Residens; Questionary
Objective: To elaborate a measurement instrument that allows us to measure the educational attitude of PRIMARY CARE TRAINER and if THEY develops a favorable attitude in the TRAINING of THE gp Registrar from Teaching Unit of Family Medicine (FM) of Valencia.
Design: 1º Step: Prospective observacional study of working on an assessment instrument of the educational attitude of the trainer, by qualitative methods and following validation.
2º step: Cross-sectional, descriptive study. To measure the educational attitude of the trainer of the specialty of FM
Setting: Teaching unit of HM of Valencia. All the trainers from Valencia in 2001-2002 were included. N=100 Instrumentalización: group techniques, with a discussion group. Being used like intervention instrument the 3º year GP Registrar , with recording of the session.
Results: 35 ítems Reliability (Alpha of cronbach=0,961; Spearman correlation=0.925; Correlation Intraclass= 0.924. Educational attitude of the tutor and professional satisfaction Beta=1,050 (.55-1.55) and to publish Beta 1.21 (.007-2.417)
Conclusions: It has been elaborated and validated an instrument of measurement for the assessment of the educational attitude of the primary care trainer. It has found relation with the professional satisfaction, research and the educational attitude of the primary care