UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos aceptados para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 5.1.2. Traducción del inglés 124 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos aceptados para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Determinación experimental por MEB de manchas de sangre de animal de caza mamífero en herramientas de piedra Resumen Ha sido anteriormente evidenciada en implementos prehistóricos la presencia de eritrocitos (glóbulos rojos de la sangre, GRS) de mamífero morfológicamente completos provenientes de manchas de sangre. Mientras que la presencia de sangre antigua no humana en una herramienta prehistórica es evidencia del uso real de ésta sobre un recurso animal, la presencia de GRS en una mancha es evidencia de sangre. En una simulación de una cadena operativa humana de predación prehistórica, se obtuvieron en implementos de sílex como los paleolíticos manchas de sangre de mamífero de dos especímenes pertenecientes al orden Artiodactyla: pécari de collar (Tayassu tajacu, familia Tayassuidae) y gacela dorcas (Gazella dóreos, familia Bovidae). Tras un año, la mancha de sangre sin enterrar de pécari y la enterrada de gacela fueron recubiertas con oro y examinadas mediante un microscopio electrónico de barrido. Los resultados revelaron la presencia de GRS conservados con varias formas como las halladas en estudios hematológicos, así como fracturas plasmáticas curvadas y huellas negativas, dos morfologías características de manchas de sangre que se interpretan como debidas, respectivamente, a interacción eritrocito-plasma al secarse y a impresión por la matriz de plasma seca. Palabras clave: Glóbulos rojos de la sangre, manchas de sangre, Microscopía Electrónica de Barrido, Hemotafonomía, Paleolítico, Arqueología Experimental. Introducción La presencia de eritrocitos (glóbulos rojos de la sangre, GRS) de mamífero morfológicamente completos provenientes de manchas de sangre ha sido anteriormente evidenciada en implementos prehistóricos (p. ej. Loy 1983; Loy y Dixon 1998). El estudio de manchas de sangre puede ser un complemento valioso para las investigaciones paleoecológicas humanas. Una integración de las trazas de uso, residuos y tecnología lítica es esencial para interpretaciones de cómo se usaron herramientas de piedra (Fullagar 1998) y, en 125 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos aceptados para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 este sentido, la presencia de sangre no humana antigua sobre un implemento representa una fuerte pista para el uso de este implemento sobre un recurso animal. A la vez, en el análisis forense la presencia de GRS en una mancha es evidencia para la presencia de sangre (López 1953; Fiori 1962; Villanueva 1998). Un instrumento apropiado para el examen de las características microestructurales de las manchas de sangre es el microscopio electrónico de barrido (MEB). Los aspectos principales del MEB son su alta resolución para objetos abultados, y su gran profundidad de campo y contraste electrónico (efecto de relieve por sombreado) que resulta en un aspecto tridimensional de la imagen del espécimen. A causa de su capacidad de examinar objetos a muy bajo aumento, el MEB resulta una herramienta muy útil en estudios forenses y arqueológicos (Goldstein et al. 1992). Además, desde el punto de vista de la confirmación de sangre en manchas antiguas, las instalaciones de MEB están generalmente más disponibles para los paleobiólogos y bioarqueólogos que los laboratorios de Biología Molecular. La investigación de organismos modernos dirigida hacia la comprensión de análogos fósiles es una rama de la Paleontología denominada Actuopaleontología (Stiegeler 1976). Ésta se basa en el Principio del Actualismo ('el presente es la clave del pasado'), el cual a su vez es la base de la Arqueología Experimental. Así, el enfoque experimental se utiliza tanto en Paleontología (p. ej. Briggs y Kear 1993) como en Arqueología (p. ej. Charters et al. 1997). En el caso de manchas de sangre, las muestras experimentales (modernas) son relevantes para el estudio de manchas prehistóricas (antiguas) no solamente a fin de determinar los cambios potenciales de forma de los eritrocitos en manchas de sangre sobre piedra, sino también porque la conservación a corto plazo de la integridad del GRS es una condición previa sine qua non para la conservación a largo plazo. En un estudio sobre la morfología de GRS en manchas de sangre sobre herramientas de piedra, se realizó una simulación de una cadena operativa humana de predación prehistórica, desde la talla de la piedra hasta usar las herramientas fabricadas sobre animales de caza mamíferos. Un corte accidental durante el episodio de la talla de la piedra, proveyó una mancha de sangre humana sobre una de esas herramientas, que fue analizada por MEB después de tres meses de mantenimiento (Hortolà 1992a). Un fragmento desprendido de otra herramienta manchada con sangre de animal de caza mamífero fue caracterizada por MEB después de seis meses de mantenimiento (Hortolà 1992b), y la parte restante de aquella muestra se guardó para un estudio por MEB adicional. También se guardó una tercera herramienta 126 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos aceptados para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 manchada con sangre de otra especie de animal de caza mamífero para ser examinada por MEB después del mismo lapso de tiempo que la parte restante. En este artículo, informo de la determinación por MEB de estos últimas manchas de sangre. Materiales y métodos Se obtuvieron sobre herramientas como paleolíticas de sílex blanco dos manchas de sangre de mamífero de especímenes pertenecientes al orden Artiodactyla, muertos en un parque zoológico. Después de la muerte, los cadáveres animales se habían almacenado a 0°C en una cámara fría; no se determinó la causa de la muerte en examen grosero. Ambos manchas se obtuvieron en la misma sesión experimental después de dejar los cadáveres fuera de la cámara para adquirir la temperatura ambiente. Una mancha de sangre se obtuvo desollando un pécari de collar [Tayassu tajacu (L.), familia Tayassuidae] con una réplica de cuchillo, y la otra punzando una gacela dorcas [Gazella dorcas (L.), familia Bovidae] con una réplica de punta de proyectil. El cuchillo se manchó con una película delgada de sangre, mezclada de manera natural con líquido seroso, de debajo del costillar del espécimen, el cual era una hembra de unos 10 años de edad que había muerto tres de semanas con anterioridad al ejercicio. Después del uso, la herramienta se secó al aire libre la primera semana; la exposición a la luz del sol fue aproximadamente de una de hora por día. Después de esta semana, el cuchillo se dejó insepulto bajo condiciones de interior fluctuantes e inestériles. Las condiciones microclimáticas de la sala durante el lapso de tiempo de mantenimiento se estimaron según los resultados de medidas tomados in situ (temperatura media 21°C, rango desde <12 hasta >32.5°C; humedad relativa media 65.5%, rango desde <37 a >83%). Después de un año, el cuchillo se recuperó directamente sin cepillar el área manchada de sangre. La punta de proyectil se manchó con una película gruesa de sangre, directamente desde el corazón del espécimen, que era una hembra de unos 3 años de edad que había muerto dos de semanas antes del ejercicio. La sangre cardíaca era fluida, no coagulada. Después del uso, la herramienta se secó sin sol directo durante un día. Después de este período, la herramienta se enterró a 7,5 cm de profundidad en suelo vegetal, al aire libre bajo condiciones naturales en un área inalterada. Previamente, aquel suelo vegetal se determinó por el método de la pasta saturada (Guitián 1964) como de 6 thick) or absence (=> thin or ultrathin) of raised plaques with polygonal macrocracking, and, if plaque absence, (ii) strong (=> thin) or slender (=> ultrathin) red colour. Smear colour was well distinguishable from the substrate one even in the dark obsidian fragment. 167 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Physical properties of the substrates The physical properties of the rock surfaces used as bloodstain substrates are displayed in Table 1. Topography (micro-relief of the fracture surface), fissuration and colour were determined in the samples with the naked eye prior to blood smearing. Furthermore, topography of the lithic surfaces was also reviewed by examining the differences in blood colour intensity in the smeared areas; assigned topographical traits were later verified via SEM. The remainder properties were determined for the same kind of surface in other fragments of the raw material samples, in order to avoid any possible disturbance of the surfaces to be blood smeared. Roughness and texture were determined by first tacting and then examining the lithic surfaces with a 7x field magnifier; assigned roughnesses were later verified via SEM. Degree of absorbency and permeability (hydraulic conductivity) to a standard, reference fluid was determined with distilled water (resistivity = HO6 Q), at 25°C and 75%RH, by placing gently a drop on the lithic surfaces and then examining the progress of both drop geometry and soaking diameter, with the same field magnifier and a transparent microrule (precision = ±5·10~4 m) at instant 0 and 5, 10 and 15 minutes after drop placing. This test was carried out in duplicate, in two different points of each sample, and no changes, neither in the drop geometry (near-hemispherical) nor diameter (0 = 4-l(T 3 m, mean value), were detected from initial to final time spans. In the determination of absorbency and permeability, water was chosen as a reference fluid because of its viscosity coefficient is lower than that of blood (Bénézech, 1962; Lowe, 1987); thus, under the same conditions, the found water absorbency and permeability values would represent those over the blood ones, due to the presence of macromolecules and cells in this biological tissue. Absorbency and permeability to blood would be, in fact, lesser to that found to water; so, in this case, it did be undetectable. The substrate surfaces to be tested or blood smeared were handled with extreme care to prevent any contamination from fingers by fatty acids (formic, butyric, caproic) or other substances of the exocrine sweat (Bénézech, 1962), which could vary the original properties of the smear substrate and lead to make them artifactually impermeable prior to bloodstaining, or to acidify the blood next to smearing. 168 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Storage conditions After drying, the samples were stored under non-sterile and microclimatically unmanipulated fluctuating room conditions. The microclimatic room conditions during the sample storage time spans were estimated according to the results of meteorological measurements taken in situ at different hours on an average of every 3 days, during 3 consecutive years. These measurements led to place the temperature range as 11 < t°C < 34, and the relative humidity one as 38 < %RH < 84 (Table 2). SEM procedures After the specified storage time spans, the specimens were doubly coated with carbon and gold to increase resolution, by a SCD 004 cathodic sputter coater (BAL-TEC AG, Balzers, Liechtenstein), and then examined via secondary electrons at an accelerating voltage of 15 kV by a JSM-6400 scanning electron microscope (JEOL Ltd., Tokyo, Japan). Micrographs were obtained using a (high-sensibility) T-MAX 400 ISO professional film (KODAK Ltd., Hemel Hempstead, U.K.). Examination process was carried out through the following steps: (i) drawing of smear shape and location as related to stone fragment, (ii) non-systematical, draw-based dynamic tracking down of the stone fragment surface at very low magnification (xtotai < 12-xmonitor, where xmon¡tor = 3.6), in order to place the bloodstained area on the monitor, (iii) systematical dynamic tracking down throughout the smear at high magnification (xtotai - 1,000-xmon¡tor), in order to specifically find out the arisen RBC morphologies, (iv) observation of static image at variable magnification (xtotai ^ 1,000-xmon¡tor) in function of the erythrocyte extent to emphasise, (v) micrographing of selected static image, and (vi) re-observation of selected static image, via micrograph positive, by a 2x hand magnifier (xtotai = 2-XpoS¡tive, where Xpositive = 2-xnegative). Results Results are both displayed and explained in Figures 1-34. The main haemotaphonomical trends observed in these RBC are in agreement with those found in previous human samples (Hortola, 1992a; Hortola, submitted for publication, b). As observed previously, bloodstain microcracking was present in the thin smear areas and only appeared around the RBC (e.g., in the moon-like 169 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 shapes) in the ultrathin ones. The frequency of (plasma-coated) erythrocytes displaying threedimensional morphologies was high in the thin smear areas, and moderate (tending towards moon-like shapes) in the ultrathin ones. Discussion Experimental bloodstains An important fact in the morphological study of bloodstain-original erythrocytes is not the amount of examined smears, but the extension and thickness of each one, the last providing different low and high magnification trends, as stated previously (Hortolà, 1992a). Even though the amount of bloodstains presented in this paper is moderate, the existence of a large number of RBC in vertebrate blood provides the appropriate replicas for each type of blood smear. Thus, according to Lewis (1970), in human whole blood the normal value of erythrocyte count (RBC-L"1) averages 5.4-1012 in males and 4.8-1012 in females. On the other hand, while in non-human smears blood would mainly be original from vital body parts if hunting or from any part of that if butchery, in human ones blood would mainly originate from the hands, agreeing with Bahn (1987) and Loy & Wood (1989) in the sense of easiness of slicing when stone tool manufacturing. Microclimatic conditions As observed previously in younger samples (Hortolà, 1992a), temperature and relative humidity do not seem to affect the general RBC preservation. Furthermore, provided that Asami & Yamaguchi (1999), in a study on the electrical and morphological changes of human RBC induced by hydrostatic pressures from HO8 to 5-108 Pa, found such a shape change -from discoidal to spherical shape, presumably due to the destruction of the cytoskeleton integrity- only above 2-10 Pa, natural atmospheric pressures would not affect the erythrocyte morphology. Assuming that normal atmospheric pressure at the sea level is 1.01325-105 Pa (» HO5 Pa), that shape-critical pressure would represent around 2,000-fold above the typical atmospheric one. p 170 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Ageing time span Slight plasma surface fractures as those displayed in Figures 23 and 29 had not been previously found in examined younger samples at the same accelerating voltage, even at SEM magnifications about twofold this used here (e.g., Hortolà, 1992a). Therefore, those fractures might be a consequence of the ageing, which would become the plasma proteins more labile. However, and although the effect of the ageing on the exhibited RBC shapes cannot be evaluated separately from the other factors, it seems clear that the smear ageing did not obstruct the general preservation of the RBC. In this sense, the high RBC preservation exhibited in the samples, in both this study and previous ones, seems to indicate that dried blood tissue is homologous or at least analogous toia mummified one. Therefore, it is not expected that the time parameter be determinant per se of the degree of bloodstain preservation, but the sedimentary environment variables. Red blood cells Because of the size of either free or aggregated RBC particle influence its erythrocyte sedimentation rate (ESR) (Seiverd, 1983), the view of (higher ESR) rouleau aggregates in the surface of the bloodstains as those displayed in Figures 7 and 33 might corroborate the thinness of the smear as a whole. Despite under plasma hyperviscosity -as occurs in the blood-drying process by plasma water evaporation - the increased plasma density decreases the sedimentations of aggregates, this high viscosity tends at the same time to decrease cell aggregation, since cells have to move into apposition through the suspending plasma (Lowe, 1987); thus, the rouleaux displayed in those Figures would correspond to the first occurrences of aggregation. On the other hand, the presence or absence of a wide echinocyte area may indicate, respectively, a quick or a slow drying of the concrete smeared area. Although crenated RBC may be occasionally present in circulating blood (Maclean, 1978), in a smear they are produced when this dries slowly (Seiverd, 1983). The lack of a visible fibrine network in the bloodstain may also be related to the quick drying of the bloodstain. At the same time, rouleaux by themselves mainly sequestrate fibrinogen in its occurrence (Lowe, 1987). In spite of, in the preparation of clinical blood frotis, friction and surface tension lead to produce several abnormal shapes which haematologically are considered as an artifact (Bessis, 1974), 171 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 from the haemotaphonomical point of view the moon-like shapes are a non-artifactual morphology that reveal to be a characteristic and very common trend of ultrathin bloodstained areas. On the other hand, the negative replicas would arise in thicker ones. Although Tuross, Barnes & Potts (1996), after laboratory UV irradiation exposure of blood on experimental stone tools, reported a destruction of all immunoreactivity, moderate exposure to natural UV irradiation, as that of the 8-year-9-month-old bloodstains on limestone for 2 hours, do not seems to differentially affect to the RBC morphological integrity, which is consistent with other previous observations either in human and non-human bloodstains (Hortolà, 1992b; Hortolà, submitted for publication, a; Hortolà, submitted for publication, b). Substrate physical properties It does not seem to be significant differences amongst the type of concrete substrate other than a lesser adherence of the bloodstain on obsidian. This fact would be related to the greater smoothness of the fracture surface in front of the grained surfaces of limestone and chert. Colour would not be related to the cell fraction, but to a best or worse discriminating of the bloodstain as a whole, as with the naked eye as at SEM low magnification. Topography would be related with the degree of thickness homogeneity of the smear by the forming of thicker/thinner subareas and, thus, with the aspect of the cell fraction being displayed under a more/less thick plasma coating. Roughness and texture would be related with the mechanical seizing and/or breaking of the cell fraction by surface microcrystals while smearing, and with the adherence of the whole blood to substrate while drying and/or ageing. In a list of some lithic materials used by Stone Age man in the manufacture of his tools, Semenov (1964) arranged 12 raw materials, in order of increasing roughness of the fracture. From rock crystal (#1) to nephrite (#12), obsidian was assigned to #2 and chert to #7, while limestone was not included into that list. Permeability (i.e., the capability to transmit fluids, that, for a same lithic raw material, will be a function of their viscosity coefficient and hydrostatic pressure) would be related with a hiding of blood, especially the fluid fraction more than the cell one, into the substrate; this hypothetical differential hiding would provide a lesser amount of plasma matrix to protect erythrocytes and the other cell elements from degradation factors in a smear. Absorbency would be related to permeability, as well as an occurrence of fissuration would increase the degree of permeability. 172 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 From the haemotaphonomical point of view, the concrete type of (either stone or non-stone) bloodstain substrate, whether of similar physical properties, do not seems to play a dramatic role in RBC morphology. The most significative bloodstain substrate physical properties would be grouped in three categories: (i) those related with the degree of thickness homogeneity of the smear by the forming of thicker/thinner subareas (topography), (ii) those related with the mechanical seizing and/or breaking of the cell fraction by surface microcrystals while smearing, and with the adherence of the whole blood to substrate while drying and/or ageing (roughness and texture), and (iii) those related with a hiding of blood, especially the fluid fraction more than the cell one, into the substrate (permeability, its related absorbency, and permeability-influencing fissuration). According with my previous experience, such a raw material categorisation based upon physical properties is more descriptive of the limiting factors which affect RBC and bloodstains than typologies, and agrees with some issued remarks concerning raw materials in lithic use-wear analysis (Schiffer et al., 1979). Substrate chemical composition Concerning obsidian and chert, silicon dioxide (silica, SiU2), whether amorphous -as in obsidian- or crystallised -as in chert-, is practically insoluble in water or acids, except hydrofluoric acid (HF), and slowly attacked by heating with concentrated phosphoric acid (HsPCu); the amorphous forms of silica, especially when finely divided, are soluble in alkalis, while the crystallised ones are scarcely attacked by alkalis (Budavari, 1996, monograph 'Silicon Dioxide1). It has been found in vitro a certain degree of time-dependent morphological alteration of previously washed, isolated human RBC into particulate SiÛ2 (Diociaiuti et al., 1999). Concerning limestone, crystals of calcium carbonate (CaCOa) are practically insoluble in water and soluble in diluted acids (Budavari, 1996, monograph 'Calcium Carbonate'). It has been found both in vivo and in vitro that increased plasma calcium levels do not affect the RBC morphology (Mark et al., 2000). In vivo, the human blood pH is closely controlled at 7.4 (Voet, Voet & Pratt, 1999), and in vitro, when collected in citrate phosphate dextrose anticoagulant and measured at the temperature of storage, is approximately 7.4-7.5 (Walker, 1990). Thus, normal value of human blood pH is very little alkaline, close to neutral. 173 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Therefore, it is not expected that blood be able to dissolve the rock compounds as to do feasible a chemical influence of the substrate on the RBC morphology. Conclusions The results of this study agree with previously reported SEM analyses of younger mammalian bloodstains on chert, graywacke and non-stone substrates (Hortolà, 1992a; Hortolà, 1992b; Hortolà, 1994; Hortolà, submitted for publication, a; Hortolà, submitted for publication, b). Although the largest part of the found smear-origin RBC shapes shares morphology with those described in haematology (e.g., Bessis, 1974; Castoldi, 1981; Bull & Breton-Gorius, 1995), two time-independent RBC shapes interpreted as due specifically to blood drying phenomena -and, thus, obviously not found under physiological conditions- may be considered as the genuine RBC morphologies characteristic of (at least mammalian) bloodstains: the moon-like shapes, which would be due to erythrocyte-plasma interaction when drying, and the negative replicas, that would be related to imprinting by dried plasma matrix. In such a sense, a systematics for the smear-origin mammalian RBC is suggested (Figure 35). The finding of different RBC and plasma-matrix morphologies preserved in human bloodstains on techno-prehistoric lithic raw materials has clear applications to both hominid palaeoethology and lithic analysis, specially when other indicia or even evidences of prehistoric cannibalism may be present (e.g., Defleur et al., 1999; Fernández-Jalvo et al., 1999; Marlar et al., 2000). And, as a whole, it establishes the experimental bases for the morphological research on either forensic and bioarchaeological bloodstains. Acknowledgements Grateful acknowledgement to the Service of Scientific Resources of the Rovira i Virgili University for the use of its electron microscopy facility. This work was supported by both a fellowship (DGESIC No. ACPI999-0177) and a project grant (DIGICYT No. PB-96-1026C03-02) from the Spanish Government, and a grant (CIRIT No. 1999SGR00181) from the Catalan one (Commonwealth of Catalonia). 174 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 References Asami, K. & Yamaguchi, T. 1999. Electrical and morphological changes of human erythrocytes under high hydrostatic pressure followed by dielectric spectroscopy. Annals of Biomédical Engineering 27,427-435. Bahn, P. G. (1987). Getting blood from stone tools. Nature 330, 14. Barnhart, M. I., Wallace, M. A. & Lusher, J. M. (1983). Red blood cells. In (G. M. Hodges & K. E. Carr, Eds.) Biomédical Research Applications of Scanning Electron Microscopy, vol. 3. London-New York: Academic Press, pp. 171-243. Bénézech, C. (1962). L'eau, base structurale et fonctionnelle des êtres vivants. Paris: Masson et Cie. Bennett, V. (1985). The membrane skeleton of human erythrocytes and its implications for more complex cells. Annual Review of Biochemistry 54, 273-304. Bessis, M. (1974). Corpuscles. Atlas of red blood cell shapes. Berlin-New York: Springer. Budavari, S., Ed. (1996). The Merck Index. An Encyclopedia of chemicals, drugs, and biologicals, 12th ed. Whitehouse Station, NJ: Merck & Co., Inc. Bull, B. S. & Breton-Gorius, J. (1995). Morphology of the erythron. In (E. Beutler, M. A. Lichtman, B. S. Coller & T. J. Kipps, Eds.) Williams Hematology, 5th ed. New York, etc.: McGraw-Hill, pp. 349-363. Castoldi, G. L. (1981). Erythrocytes. In (D. Zucker-Franklin, M. F. Greaves, C. E. Grossi & A. M. Marmont, Eds.) Atlas of Blood Cells. Function and pathology. Milano/Philadelphia: Ermes/Lea & Febiger, pp. 35-145. 175 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Chien, S. (1985). Role of blood cells in microcirculatory regulation. Microvascular Research 29,129-151. Defleur, A., White, T., Valensi, P., Slimak, L. & Crégut-Bonnoure, É. (1999). Neanderthal cannibalism at Moula-Guercy, Ardèche, France. Science 286, 128-131. Dintenfass, L. (1976). Rheology of Blood in Diagnostic and Preventive medicine. An introduction to clinical haemorheology. London, etc.: Butterworths. Diociaiuti, M, Bordi, F., Gataleta, L., Baldo, G. Crateri, P. & Paoletti, L. (1999). Morphological and functional alterations of human erythrocytes induced by SiCh particles: an electron microscopy and dielectric spectroscopy study. Environmental Research 80, 197-207. Fernández-Jalvo, Y., Díez, J. C., Càceres, I. & Rosell, J. (1999). Human cannibalism in the Early Pleistocene of Europe (Gran Dolina, Sierra de Atapuerca, Burgos, Spain). Journal of Human Evolution 37, 591-622. Fiori, A. (1962). Detection and identification of bloodstains. In (F. Lundquist, Ed.) Methods of Forensic Science, vol. 1. New York-London: John Wiley & Sons, pp. 243-290. Goldstein, J. I., Newbury, D. E., Echlin, P., Joy, D. C., Romig, Jr., A. D., Lyman, C. E., Fiori, C. & Lifshin, E. (1992). Scanning Electron Microscopy and X-Ray Microanalysis. A text for biologists, materials scientists, and geologists, 2nd. ed. New York-London: Plenum Press. Hortolà, P. (1992a). SEM analysis of red blood cells in aged human bloodstains. Forensic Science International 55,139-159. Hortolà, P. (1992b). SEM characterization of blood stains on stone tools. The Microscope 40 (2), 111-113. 'Errata' in The Microscope 40 (3), vi. 176 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Hortolà, P. (1994). Application of SEM to the study of red blood cells in forensic bloodstains. Microscopy & Analysis (U.K. Edition) 40, 19 & 21 - Microscopy & Analysis (European Edition) 28, 21 & 23. Hortolà, P. (submitted for publication, a). Experimental SEM determination of game mammalian bloodstains on stone tools. Hortolà, P. (submitted for publication, b). Morphological characterisation of red blood cells in human bloodstains on stone: a systematical SEM study. Hyland, D. C., Tersak, J. M., Adovasio, J. M. & Siegel, M. I. (1990). Identification of the species of origin of residual blood on lithic material. American Antiquity 55, 104-112. Jain, N. C. (1986). Schalm's Veterinary Hematology, 4th. ed. Philadelphia: Lea & Febiger. Kjeldsberg, C. R. (1993). Principles of hématologie examination. In (G. R. Lee, T. C. Bithell, J. Foerster, J. W. Athens & J. N. Lukens) Wintrobe's Clinical Hematology, 9th. éd., vol. 1. Philadelphia-London: Lea & Febiger, pp. 7-37. LeBlond, P. F. & Shoucri, R. (1978). Calculation of surface area and volume of human erythrocytes from scanning electron micrographs. Journal of Microscopy 113, 161-170. Lewis, A. E. (1970). Principles of Hematology. London: Butterworths. Liao, Z., Chen, G., Mao, Y., Peng, X., Dong, P. & Wu, J. ( 1998). [Morphologic changes of red blood cells in various conditions under scanning electron microscope; article in Chinese, with abstract, captions for figures and tables in Chinese and English]. Hua Hsi I Ko Ta Hsueh Hsueh Pao [Journal of West China University of Medical Sciences] 29, 192-195. López, L. (1953). Técnica Médico-Legal, vol. 1. Valencia: Saber. 177 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Lowe, G. D. O. (1987). Blood rheology in vitro and in vivo. In (G. D. O. Lowe, Guest Ed.) Blood Rheology and Hyperviscosity Syndromes. Baillière's Clinical Haematology, vol. 1, No. 3. London, etc.: Baillière Tindall, pp. 597-636. Lowenstein, J. M. (1993). Immunospecificity of fossil proteins. Implications for the establishment of evolutionary trends. In (M. H. Engel & S. A. Macko, Eds.) Organic Geochemistry. Principles and applications. New York-London: Plenum Press, pp. 817-827. Loy, T. H. (1983). Prehistoric blood residues: detection on tool surfaces and identification of species of origin. Science 220, 1269-1271. Loy, T. H. (1998). Organic residues on Oldowan tools from Sterkfontein Cave, South Africa. In (M. A. Raath, H. Soodyall, K. L. K. D. Barkhan & P. V. Tobias, Eds.) Dual Congress of the International Association for the Study of Human Paleontology, and International Association of Human Biologists. Johannesburg: Department of Anatomical Sciences, University of the Witwatersrand Medical School, pp. 74-75. Loy, T. H. & Dixon, E. J. (1998). Blood residues on fluted points from eastern Beringia. American Antiquity 63, 21-46. Loy, T. H. & Hardy, B. G. (1992). Blood residue analysis of 90,000 year old stone tools from Tabun Cave, Israel. Antiquity 66, 24-35. Loy, T. H. & Matthaei, K. I. (1994). Species of origin determination from prehistoric blood residues using ancient genomic DNA. Australasian Biotechnology 4, 161-162. Loy, T. H. & Wood, A. R. (1989). Blood residue analysis at Cayônii Tepesi, Turkey. Journal of Field Archaeology 16, 451-460. Lyman, R. L. (1994). Vertebrate Taphonomy. Cambridge: Cambridge University Press. Maclean, N. (1978). Haemoglobin. London: Edward Arnold. 178 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Mark, M., Walter, R., Harris, L. G. & Reinhart, W. H. (2000). Influence of parathyroid hormone, calcitonin, 1,25(OH)2 cholecalciferol, calcium, and the calcium ionophore A23187 on the erythrocyte morphology and blood viscosity. The Journal of Laboratory and Clinical Medicine 135, 347-352. Marlar, R. A., Leonard, B. L., Billman, B. R., Lambert, P. M. & Marlar, J. E. (2000). Biochemical evidence of cannibalism at a prehistoric Puebloan site in southwestern Colorado. Nature 407, 74-78. Newman, M. & Julig, P. (1989). The identification of protein residues on lithic artifacts from a stratified boreal forest site. Journal Canadien d'Archéologie/Canadian Journal of Archaeology 13, 119-132. Newman, M. E., Ceri, H. & Kooyman, B. (1996). The use of immunological techniques in the analysis of archaeological materials - a response to Eisele; with report of studies at HeadSmashed-In Buffalo Jump. Antiquity 70, 677-682. Nickolls, L. C. (1962). The identification of stains of nonbiological origin. In (F. Lundquist, Ed.) Methods of Forensic Science, vol. 1. New York-London: John Wiley & Sons, pp. 335- 371. Quarino, L. & Kobilinsky, L. (1988). Development of a radioimmunoassay technique for the detection of human hemoglobin in dried bloodstains. Journal of Forensic Sciences 33, 1369- 1378. Schiffer, M. B., Kamminga, J., Kleindienst, M., Tsirk, A., Faulkner, A., Hayden, B. & Cotterell, B. (1979). Discussion: raw materials, part A. In (B. Hayden, Editor) Lithic UseWear Analysis. New York, etc.: Academic Press, pp. 297-298. Seiverd, C. E. (1983). Hematology for Medical Technologists. 5th ed. Philadelphia: Lea & Febiger. 179 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Semenov, S. A. (1964). Prehistoric Technology. An experimental study of the oldest tools and artefacts from traces of manufacture and wear. Translated, and with a preface by M. W. Thompson. London: Cory, Adams & Mackay. First published in Russian (1957) by the Institute of the History of Material Culture of the Academy of Sciences of the U.S.S.R. (Moscow). Tuross, N., Barnes, I. & Potts, R. (1996). Protein identification of blood residues on experimental stone tools. Journal of Archaeological Science 23, 289-296. Villanueva, E. (1998). Los indicios en Medicina legal. In (J. A. Gisbert, Dir.) Medicina Legal y Toxicologia, 5th. éd. Barcelona, etc.: Masson, pp. 1103-1128. Voet, D., Voet, J. G. & Pratt, C. W. (1999). Fundamentals of Biochemistry. New York, etc.: John Wiley & Sons. Walker, R. H., Ed. in Chief (1990). Technical Manual, 10th. ed. Arlington: American Association of Blood Banks. 180 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Tables Table 1. Physical properties of the bloodstain lithic substrates Substrate obsidian (fs) limestone (ec) chert (fs) Colour medium grey light grey white Topography nearly plain nearly plain nearly plain Roughness null low medium Texture hypohyaline (mi) granular (hf) granular (hf) Fissuration null null null Absorbency undetected undetected undetected Permeability undetected undetected undetected Legend: ec = eroded cortex; fs = fracture surface; hf = homogeneously fine-grained; mi = minor impurities present within the glass. Table 2. Temperature and relative humidity ranges of the sample storage room, for 3 consecutive years Year tM 32.5 IAD.M tm IAD™ HM 83 84 84 84 IADHM Hm 38 38 38 38 IAD«m I 11 III NA 11 11 11 11 NA 0 0 0 NA +1 0 0 NA 0 0 0 34 34 34 +1.5 0 0 ERV Legend: ERV = extreme recorded value; H = relative humidity in percent; IAD = inter-annual difference; M = maximum; m = minimum; NA = non applicable; t = temperature in degrees Celsius. 181 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Captions for Figures Figure 1. Aspect at low magnification of the 7-year-6-month-old bloodstain on obsidian. The null roughness of the substrate surface (S) may be seen. Despite the thinness of the smear, which is evidenced by the lack of a macrocracking pattern, several raised micro-scales are shown. The origin of this micro-scale raising, close to that previously found on stainless steel (Hortolà, 1992a), would be related to the smooth texture of the substrate, haemotaphonomically comparable to the steel. Magnification according with bar. Figure 2. 7-year-6-month-old bloodstain on obsidian. RBC-polystratified blood micro-scales are shown. Shining particles are post-depositional dust sedimented onto the smear. Magnification according with bar. Figure 3. 7-year-6-month-old bloodstain on obsidian. Another view of RBC-polystratified blood micro-scales. The aspect of the erythrocytes is very similar to those of Figure 2. A broken cell (schizocyte, p) is shown. Magnification according with bar. Figure 4. 7-year-6-month-old bloodstain on obsidian. RBC-polystratified blood micro-scales containing a 3-RBC pile (rouleaux, arrow) under a plasma microcrack as well as a crenated cell (echinocyte, e) are displayed. Magnification according with bar. Figure 5. 7-year-6-month-old bloodstain on obsidian. Oligostratified pseudofrotis in the smear counterforts. This oligostratification is evidenced by moon-like shape superimposition (i). Magnification according with bar. Figure 6. 7-year-6-month-old bloodstain on obsidian. Oligostratified pseudofrotis with some RBC acquiring, by compression of neighbour erythrocytes, the shape of teardrop cells (dacryocytes, e.g. dc) is shown. Magnification according with bar. Figure 7. 7-year-6-month-old bloodstain on obsidian. Oligostratified pseudofrotis containing free and rouleau-piled RBC under plasma is displayed. A folded, xerocyte-like RBC (x) is also seen. Magnification according with bar. 182 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Figure 8. 7-year-6-month-old bloodstain on obsidian. Oligostratified pseudofrotis with moonlike shapes. An incipient echinocyte resembling a flat sun (he), may be seen; this would be a subordinate morphology into the moon-like shapes, because its (perimeter-following) microcracking pattern is assimilable to that of those shapes. Magnification according with bar. Figure 9. Aspect at low magnification of the 8-year-9-month-old bloodstain #1 (BS) on limestone; the two other bloodstains • are partially seen, too. The continuity of the smeared layer (i.e., the lack of a visible desiccation macrocrack pattern at this level) is a sign which would corroborate its thinness. The grained texture of the substrate may be seen. Magnification according with bar. Figure 10. 8-year-9-month-old bloodstain #1 on limestone. Some RBC negative replicas (e.g., n) may be seen. Magnification according with bar. Figure 11. 8-year-9-month-old bloodstain #1 on limestone. Moon-like shapes in the smear counterforts and degraded plasma are shown. Magnification according with bar. Figure 12. 8-year-9-month-old bloodstain #1 on limestone. In the smear centre, arisen microscales with a few RBC are displayed. Magnification according with bar. Figure 13. 8-year-9-month-old bloodstain #1 on limestone. RBC in the smear counterforts. A mouth cell (stomatocyte, s) may be seen. Magnification according with bar. Figure 14. 8-year-9-month-old bloodstain #1 on limestone. RBC in the smear counterforts. The plasma (P) in layers, and several smaller-than-typical RBC (microcytes) are shown. Magnification according with bar. Figure 15. Aspect at low magnification of the 8-year-9-month-old bloodstain #2 (BS) on limestone. This view corresponds to the chip cutting-edge area. Magnification according with bar. 183 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Figure 16. 8-year-9-month-old bloodstain #2 on limestone. A chip cutting-edge area containing a codocyte (arrow) and several flat disks (leptocytes) in the most external edge area is displayed. Magnification according with bar. Figure 17. 8-year-9-month-old bloodstain #2 on limestone. Smear counterforts with degraded/fragmented free-RBC plasma (P) are shown. Magnification according with bar. Figure 18. 8-year-9-month-old bloodstain #2 on limestone. Several moon-like shapes and a large accumulation of echinocytes in the smear centre may be seen. This Figure is very similar to that corresponding to a substrate depression in the thin smeared area of a 1-year-old bloodstain on chert (Hortolà, 1992a, Fig. 13), where the wide appearance of the echinocytes was interpreted as due to a slow drying in that topographically depressed area by itself and/or to the accumulation of some sweat when smearing. This phenomenon could also be related to a pre-ageing loss of fluid plasma due to the topographical slope, or correspond to a thicker sub-area with slow blood drying, where the plasma has been either detached or degraded and left out due to an ageing process during the storage time span, and thus displaying the inner, non-surfacial RBC. Magnification according with bar. Figure 19. 8-year-9-month-old bloodstain #2 on limestone. Another echinocyte area, with two plaques of suspected smear-detached plasma (P?). These plaques are very similar to those found in a gazelle bloodstain on chert examined after a year of burial storage (Hortolà, submitted for publication, Fig. 6), where a near-typical-shaped RBC remained still slightly united to one of those plaques. Such a plasma loss would indicate that wide echinocyte areas correspond to first-sedimented or at least inner RBC. Magnification according with bar. Figure 20. 8-year-9-month-old bloodstain #2 on limestone. A triconcave cell (knizocyte, k) and some schizocytes may be seen. Magnification according with bar. Figure 21. Aspect at low magnification of the 8-year-9-month-old bloodstain #3 (BS) on limestone. Magnification according with bar. 184 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Figure 22. 8-year-9-month-old bloodstain #3 on limestone. Blood smear scales on the cuttingedge area are displayed. Magnification according with bar. Figure 23. 8-year-9-month-old bloodstain #3 on limestone. Detail of a scale seen in Figure 22. Slight plasma surface fractures are an artifactual effect which did not disturb the morphological examination of the area, and is suspected to be caused by the electron beam when incremented SEM magnification. Some negative replicas (e.g., n) are also evidenced. Magnification according with bar. Figure 24. 8-year-9-month-old bloodstain #3 on limestone. Near the smear counterforts, RBC under plasma, moon-like shapes, and a suspected incipient microorganism growth (g?) are shown. Magnification according with bar. Figure 25. 8-year-9-month-old bloodstain #3 on limestone. The layered aspect of the plasma matrix, a clear stomatocyte (s), and probable degraded RBC are displayed. Magnification according with bar. Figure 26. 8-year-9-month-old bloodstain #3 on limestone. RBC in a microcrack and under plasma are evidenced. The irregular cracking around RBC would indicate that this has not been exactly done along the erythrocyte-plasma interface. Magnification according with bar. Figure 27. Aspect at low magnification of the 10-year-2-month-old bloodstain on chert (BS). The grained texture of the substrate may be seen. Differences in smear colour would correspond to different smear thickness. Magnification according with bar. Figure 28. 10-year-2-month-old bloodstain on chert. The aspect of scales of a bloodstained area is shown. In a limited substrate area (M), a scale has left out and has been missed, letting to see the extreme thinness of the blood film. Magnification according with bar. Figure 29. 10-year-2-month-old bloodstain on chert. Near the smear centre, artifactual slight plasma surface fractures similar to those displayed in Figure 23 are shown. Magnification according with bar. 185 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Figure 30. lO-year-2-month-old bloodstain on chert. Near the smear counterforts, a moon-like shape area is evidenced. The notch (arrow) is believed to be an artifact, which would denote an accidental slight contact with any object, probably during the SEM processing. Magnification according with bar. Figure 31. 10-year-2-month-old bloodstain on chert. Near the smear counterforts, two different RBC-oligostratified morphologies are shown. The aspect differences between moon-like shapes (e.g., m) and hidden, thin-layer plasma-coated RBC (e.g., h and neighbour erythrocytes) may be seen. Magnification according with bar. Figure 32. 10-year-2-month-old bloodstain on chert. Between two areas with moon-like shapes and original plasma where RBC are not fully distinguishable, a depressed area -where it seems that plasma has left out the smear, probably due to ageing process- is evidenced. Thanks to this hypothetical plasma removing, erythrocytes would be better seen. Magnification according with bar. Figure 33. 10-year-2-month-old bloodstain on chert. An area with a very good RBC preservation state. This preservation state is closely similar to that shown in an accidental 3month-old, thin human bloodstain on the same type of chert (Hortolà, 1992a, Fig. 2), where several morphologies such as discocyte, free and rouleau-piled leptocyte-like, spherostomatocyte, broken erythrocyte and RBC with the imprint of the next red cell could be seen. Magnification according with bar. Figure 34. 10-year-2-month-old bloodstain on chert. Another area with a similar very good RBC preservation state. RBC morphologies other than those displayed in Figure 33 are shown, for example echinocytes. Magnification according with bar. Figure 35. Suggested systematics for the smear-origin mammalian RBC. Etymologies: taphoerythrocytes, from the Greek icópoç (taphos, burial); physiocytes, from the Greek cpixitc (physis, nature); kelidocytes, from the Greek KnA-iSa (kelida, smear); hecatocytes, from the Greek Eicct'tri (Hecate, the Greek supreme goddess identified in heaven with Selene, moon the deity); janocytes, from the Latin lanus (Janus, the Roman double-faced god). 186 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 187 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 188 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 .íai-, - 189 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 190 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 191 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 192 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 193 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 194 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 195 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 [Figure 35] physiocytes physiological, non smear-characteristic RBC discocytes, echinocytes, etc. hecatOCytes (moon-like shapes) taphoerythrocytes smear-origin RBC kelidocytes smear-characteristic, non physiological RBC janocytes (negative replicas) 196 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 6.2.2. Traducción del inglés 197 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Hemotafonomía de glóbulos rojos de la sangre de manchas de sangre humana experimentales sobre materias primas líticas tecnoprehistóricas Resumen Se ha informado anteriormente de eritrocitos de mamífero o glóbulos rojos de la sangre (GRS) -cuya presencia en una mancha es una evidencia de sangre- formando parte de residuos sobre implementos prehistóricos asignados a tan lejos como alrededor de dos millones de años de edad. En base al Principio del Actualismo, se obtuvieron manchas de sangre de individuos humanos sobre obsidiana, caliza y sílex, y entonces se mantuvieron en una sala inestéril bajo condiciones fluctuantes microclimáticamente no manipuladas, para transcursos de tiempo abarcando desde 7 años y 6 meses a 10 años y 2 meses. Después, las manchas de sangre se recubrieron doblemente con carbón y oro y fueron examinadas con un microscopio electrónico de barrido (MEB) JEOL JSM-6400. Los resultados revelaron una alta conservación de la integridad eritrocitaria, con varias formas como las halladas bajo condiciones fisiológicas y una presencia importante de formas lunoides además de una menor de réplicas negativas, dos morfologías que se interpretan como específicamente relacionadas con los fenómenos de secado de la sangre. Estos resultados concuerdan con varios análisis por MEB previamente informados de manchas más recientes de sangre de mamífero sobre sílex y materiales diferentes de la obsidiana y caliza, y llevan a considerar las formas lunoides (hecatocitos, un término ex novo) y réplicas negativas (janocitos, otro término ex novo) como las genuinas morfologías de GRS características de las manchas de sangre (como mínimo de mamífero). Palabras clave: Glóbulos rojos de la sangre, manchas de sangre, Microscopia Electrónica de Barrido, Prehistoria, Actuopaleontología, Arqueología Experimental, Hemotafonomía. Introducción Ha sido revelada anteriormente en implementos prehistóricos la presencia de eritrocitos o glóbulos rojos de la sangre (GRS) de mamífero conservados morfológicamente formando parte de manchas (p. ej. Loy, 1983; Loy & Hardy, 1992; Loy & Dixon, 1998); se ha informado de tal conservación incluso en herramientas olduvaienses asignadas a ca. 2 Ma de 198 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 edad (Loy, 1998). Además, también se han identificado GRS de mamífero en elementos prehistóricos inmuebles, tales como una construcción del Holoceno inicial, conteniendo GRS anucleados, IgG humana y Hb humana y no humana sobre una losa de piedra (Loy & Wood, 1989). La presencia de todo el tipo de residuos sobre implementos concuerda con el famoso Principio de Intercambio de Locard criminalístico ('todo contacto deja huellas'). Es decir, cuando dos objetos cualquiera entran en contacto, hay siempre una tranferencia de material desde cada objeto al otro (Nickolls, 1962). Mientras que las actividades de transferencia para manchas de sangre no humana prehistóricas sobre herramientas de piedra se centrarían en la caza y carnicería, aquellas para las manchas de sangre humana comprenderían potencialmente una gama más amplia de elementos, incluyendo la manufactura de herramientas de piedra, ataques, cirugía, rituales (descuartizamiento de entierro, sacrificio, mutilación, escarificación), y -tanto si ritual como no- canibalismo. La sangre de vertebrado es una suspensión de células (eritrocitos, leucocitos o glóbulos blancos de la sangre, y trombocitos o plaquetas) en un medio fluido (plasma). A diferencia de los otros vertebrados, en los mamíferos los eritrocitos -y también las plaquetas- son anucleados (Jain, 1986). Debido a esta carencia de núcleo, los GRS típicos de mamífero están formados como discos bicóncavos (discocitos). En los seres humanos, los eritrocitos de tamaño normal (normocitos) tienen un diámetro medio de 7,49 um, de acuerdo con estereomicrografías de MEB (LeBlond & Shoucri, 1978). Debido a que los GRS tienen una densidad (gravedad específica) más alta que el medio de plasma en que están suspendidos (Lewis, 1970; Kjeldsberg, 1993), en sangre extravasada -p. ej., en una mancha reciente, aún no seca- ellos tienden a posarse. Además, tienen lugar varios cambios morfológicos a lo largo del secado de la mancha de sangre fresca. Los cambios morfológicos en GRS mamífero bajo condiciones de flujo nulo a lo largo del secado de la mancha de sangre fresca puede asimilarse a las hemorreológicas en un estado de flujo bajo. Así, la hipertonicidad del plasma debida al proceso de secado de la mancha de sangre generalmente conduce a los GRS a responder estereotípicamente con cambios de forma. Éstos comprenden principalmente, con diversos grados, cambios estomatocíticos o equinocíticos, en la ruta hacia una forma esferocítica (Castoldi, 1981; Barnhart, Wallace & Lusher, 1983). Además, los eritrocitos en el plasma forman, o agregados lineales (rouleaux) que experimentan agregación secundaria para formar redes, o agregados 'en masa' de configuración diferente a la de los rouleaux. Por lo menos bajo condiciones fisiológicas, el esqueleto de la membrana o citoesqueleto del GRS (espectrina, 199 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 anquirina y otras proteínas) juega un papel importante en el mantenimiento de la forma y propiedades elásticas de deformabilidad de la célula (Bennett, 1985; Chien, 1985). Por otra parte, la agregación eritrocítica resulta de la acción de largas globulinas plasmáticas asimétricas (fibrinógeno, cca-macroglobulina y otras proteínas) que forman puentes entre GRS adyacentes y superan su repulsión mutua debida a las cargas negativas de superficie que resultan primariamente de los residuos de ácido siálico (Lowe, 1987); estos residuos de azúcar son parte de las glucoproteínas de la membrana del eritrocito (glucoforina A, glucoforina B y otras proteínas) (Bennett, 1985). Físicamente, la agregación reversible se debe a las fuerzas de dispersión van der Waaals y London (Dintenfass, 1976). A pesar del informe de la evidencia de GRS bioarqueológicos y del hecho que, en el análisis forense, la presencia de GRS en una mancha se considera una confirmación de sangre (p. ej., López, 1953; Fiori, 1962; Villanueva, 1998), el interés en el análisis de manchas de sangre se ha enfocado en su mayor parte al nivel molecular (p. ej., Quarino & Kobilinsky, 1988; Newman & Julig, 1989; Hyland et al., 1990; Lowenstein, 1993; Loy & Matthaei, 1994; Tuross, Barnes & Potts, 1996). Así, aunque el conocimiento de las características morfológicas de los GRS originarios de mancha de sangre han merecido algún interés a los actuales científicos forenses (Liao et al., 1998), no ha merecido uno de suficiente para ser tenido en cuenta por los bioarqueólogos, incluso en el caso que la conservación morfológica de GRS en manchas de sangre vieja modernas, junto con otras evidencias, ha sido presentado como un fuerte indicio de posible supervivencia de residuos de sangre sobre materiales arqueológicos (Newman, Ceri & Kooyman, 1996). Mucha de la investigación arqueológica actual requiere de técnicas instrumentales avanzadas que faciliten algunas revisiones y nuevos estudios sobre materiales presumiblemente bien conocidos. Una manera para examinar in situ manchas de sangre es la técnica no destructiva que involucra el uso del microscopio electrónico de barrido (MEB). Los rasgos principales de un MEB son su alta resolución para objetos con volumen, y su gran profundidad de campo y contraste electrónico (efecto de relieve por sombra) que resulta en un aspecto tridimensional de la imagen del espécimen. Además, a causa de su capacidad de examinar objetos a muy bajo aumento, el MEB representa una herramienta muy útil en estudios forenses y arqueológicos (Goldstein et al, 1992). La Actuopaleontología y la Arqueología Experimental se basan en el Principio del Actualismo de Lyell ('el presente es la clave del pasado'). De acuerdo con Lyman (1994), la 200 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 investigación actualística se percibe actualmente como la base para la mayor parte del análisis e interpretación tafonómicos y arqueológicos. Debido a que una conservación a corto plazo de los especímenes es una condición previa sine qua non para hacer factible una de más larga (paleobiológica, bioarqueológica), en trabajos previos he informado de varias investigaciones por medio de MEB sobre la citomorfología de GRS manchas de sangre humana, supuestamente humana y no humana sobre materiales líticos (sílex, grauvaca) y no Uticos (papel, acero inoxidable, asfalto urbano), abarcando desde 1 a 36 meses de edad (Hortolà, 1992a; Hortolà, 1992b; Hortolà, 1994; Hortolà, sometido para su publicación, a; Hortolà, sometido para su publicación, b). En este artículo, informo del análisis morfológico por MEB de GRS en manchas de sangre humana mucho más viejas, sobre una materia prima lítica anterioramente informada así como sobre dos de nuevas, todas ellas de interés para la tecnología prehistórica. Materiales y métodos Mancha de sangre sobre obsidiana Sobre el superficie de fractura de un fragmento de obsidiana, se obtuvo directamente por el mecanismo de 'contacto1 una mancha ultradelgada de sangre periférica (área « 55-l(T 6 m2) del pulgar de la mano izquierda de una mujer adulta de 32 años. Después del manchado del fragmento, la mancha de sangre se secó sin luz solar directa ni viento, y se mantuvo por 7 años y 6 meses. Manchas de sangre sobre caliza Una lasca de caliza extraída de un canto se manchó en su superficie erosionada con sangre periférica del extremo del dedo medio de la mano derecha de un varón adulto de 32 años (individuo n° 1 ). Por el mecanismo de 'precipitation' (goteo gravitatorio) desde una altura baja (h « 2-l(T 2 m), se obtuvo una mancha delgada de sangre (mancha de sangre n° 1, área « 16-KT6 m2), y por 'contacto' se obtuvieron dos de ultradelgadas (mancha de sangre n° 2, área « 30-1(T6 m2; mancha de sangre n° 3, área « 12-10"6 m2). Las manchas de sangre se secaron al aire libre al sol con viento de moderado a nulo (ráfagas) durante 2 horas, y, después, se mantuvieron por 8 años y 9 meses. 201 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Mancha de sangre sobre sílex Sobre el superficie de fractura de un fragmento de sílex, se obtuvo directamente por el mecanismo de 'contacto' una mancha delgada de sangre periférica (área « 30-1(T6 m2) del borde de la palma de la mano derecha cerca del dedo meñique de un varón adulto de 28 años (individuo n° 2). La mancha se secó en una sala sin luz solar directa ni viento, y, luego, se mantuvo por 10 años y 2 meses. Grosor de las manchas La discriminación apriorística del grosor de la mancha de sangre se hizo al tiempo de manchar, en base a: (i) placas elevadas con macrofracturación poligonal presentes (=> gruesa) o ausentes (=> delgada o ultradelgada), y, en ausencia de placas, (ii) color rojo pronunciado (=> delgada) o leve (=> ultradelgada). El color de la mancha fue bien discernible de aquel del substrato incluso en el fragmento de obsidiana obscura. Propiedades físicas de los substratos Las propiedades físicas de los superficies de roca usadas como substratos de las manchas de sangre se muestran en la Tabla 1. La topografía (microrelieve de la superficie de fractura), fisuración y color se determinaron en las muestras a simple vista antes del manchado de sangre. Además, la topografía de las superficies líticas fue también revisada examinando las diferencias en intensidad de color de la sangre en las áreas manchadas; las características topográficas asignadas fueron verificadas luego por medio del MEB. Las propiedades restantes se determinaron para el mismo tipo de superficie en otros fragmentos de muestras de la materia prima, a fin de evitan cualquier posible alteración de las superficies a ser manchadas de sangre. Rugosidad y textura fueron determinadas primero palpando y luego examinando las superfícies líticas con una lupa de campo de 7x; las rugosidades asignadas se verificaron luego por medio de MEB. Se determinó el grado de absorbencia y permeabilidad (conductividad hidráulica) a un fluido tipo, de referencia, con agua destilada (resistividad = HO 6 Q), a 25°C y 75%HR, colocando suavemente una gota sobre las superficies líticas y entonces examinando el progreso de la geometría de la gota y el diámetro de embebimiento, con la misma lupa de campo y una microregla transparente (precisión = Í5-1CT4 m) en el instante O y 5, 10 y 15 minutos después de la colocación de la 202 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 gota. Esta prueba se efectuó por duplicado, en dos puntos diferentes de cada muestra, y no se detectaron cambios del inicio al final de los trancursos de tiempo, ni en la geometría de la gota (cercana a hemisférica) ni en el diámetro (0 = 4-l(T 3 m, valor medio). En la determinación de la absorbencia y permeabilidad, la agua se eligió como un fluido de referencia debido a de que su coeficiente de viscosidad es más bajo que el de la sangre (Bénézech, 1962; Lowe, 1987); así, bajo las mismas condiciones, los valores de permeabilidad y absorbencia del agua hallados representarían aquellos por encima de los de la sangre, debido a la presencia de macromoléculas y células en este tejido biológico. La absorbencia y permeabilidad a la sangre sería, de hecho, menor a la encontrada al agua; por lo que, en este caso, sería indétectable. Las superficies del substrato a ser probado o manchado de sangre se manejaron con extremo cuidado para impedir cualquier contaminación desde los dedos por ácidos grasos (fórmico, butírico, caproico) u otras substancias del sudor exocrino (Bénézech, 1962), que pudiera variar las propiedades originales del substrato de la mancha y conducir a hacerlos artificialmente impermeables antes del manchado de sangre, o a acidificar la sangre después del manchado. Condiciones de mantenimiento Después del secado, las muestras se mantuvieron bajo condiciones de sala fluctuantes microclimáticamente no manipuladas e inestériles. Las condiciones microclimáticas de la sala durante los lapsos de tiempo de mantenimiento de las muestras se estimaron según los resultados de medidas meteorológicas tomadas in situ a diferentes horas a un promedio de cada 3 días, durante 3 años consecutivos. Estas medidas condujeron a fijar el rango de temperatura como 11 ^ t°C < 34, y el de humedad relativa como 38 < %HR < 84 (Tabla 2). Procedimientos de MEB Tras los lapsos de tiempo de mantenimiento especificados, los especímenes fueron doblemente recubiertos con carbono y oro para incrementar la resolución, por un recubridor por difusión catódica SCD 004 (BAL-TEC AG, Balzers, Liechtenstein), y entonces examinadas por medio de electrones secundarios a un voltaje de aceleración de 15 kV con un microscopio electrónico de barrido JSM-6400 (JEOL Ltd., Tokio, Japón). Las micrografías se obtuvieron utilizando película prefesional (de alta sensibilidad) T-MAX 400 ISO (KODAK Ltd., Hemel Hempstead, Reino Unido). 203 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 El proceso de examen se llevó a cabo mediante los siguientes pasos: (i) dibujo de la forma de la mancha y ubicación en relación al fragmento de piedra, (ii) rastreo dinámico no sistemático, en base al dibujo, de la superficie del fragmento de piedra a muy bajo aumento (xtotai < 12-xmonjtor, donde xmonitor = 3,6), para situar el área manchada de sangre en el monitor, (iii) rastreo dinámico sistemático por toda la mancha a alto aumento (xtotai = 1,000-xmonitor), para hallar específicamente las morfologías de GRS aparecidas, (iv) observación de la imagen estática a aumento variable (xtotai ^ 1,000-xmonjtor) en función de la extensión de eritrocitos a enfatizar, (v) micrografiado de la imagen estática seleccionada, y (vi) reobservación de la imagen estática seleccionada, por medio del positivo de la micrografía, con una lupa de mano de 2X (Xtotai ~~ ¿'Xpositivoí donde XpOS¡t¡vo — ¿°Xnegat¡vo)- Resultados Los resultados se muestran y explican en las Figuras 1-34. Las tendencias hemotafonómicas principales observadas en estos GRS concuerdan con las halladas en muestras humanas previas (Hortolá, 1992a; Hortola, sometido para su publicación, b). Como se observó anterioramente, el microfracturado de las manchas de sangre estuvo presente en las áreas delgadas de la mancha y únicamente apareció alrededor del GRS (p. ej., en las formas lunoides) en las ultradelgadas. La frecuencia de eritrocitos (recubiertos de plasma) mostrando morfologías tridimensionales fue alta en las áreas delgadas de mancha, y moderada (tendiendo hacia formas lunoides) en las ultradelgadas. Discusión Manchas de sangre experimentales Un hecho importante en el estudio morfológico de eritrocitos originarios de mancha de sangre no es la cantidad de manchas examinadas, sino la extensión y el grosor de cada una, lo último proveyendo tendencias diferentes a aumento bajo y alto, como se expresó anteriormente (Hortolá, 1992a). Aunque la cantidad de manchas de sangre presentadas en este artículo es moderada, la existencia de un gran número de GRS en la sangre de vertebrado provee las réplicas apropiadas para cada tipo de mancha de sangre. Así, según Lewis (1970), 204 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 en la sangre humana entera el valor normal de recuento eritrocitario (RBC-L ') promedia 5,4-10 12 en varones y 4,8-10 12 en mujeres. Por otra parte, mientras que en manchas no humanas la sangre sería principalmente originaria de partes vitales del cuerpo en la caza o de cualquier parte de él en la carnicería, en las humanas la sangre se originaría principalmente de las manos, de acuerdo con Bahn (1987) y Loy & Wood (1989) en el sentido de la facilidad de corte al manufacturar herramientas de piedra. Condiciones microclimáticas Como se observó anterioramente en muestras más jóvenes (Hortolà, 1992a), la temperatura y la humedad relativa no parecen afectar a la conservación general de los GRS. Además, puesto que Asami & Yamaguchi (1999), en un estudio sobre los cambios eléctricos y morfológicos de los GRS humanos inducidos por presiones hidrostáticas desde 1-108 hasta 5-108 Pa, hallaron tal cambio de forma -de discoidal a esférica, supuestamente debido a la destrucción de la integridad citoesquelética- únicamente por encima de los 2-108 Pa, las presiones atmosféricas naturales no afectarían la morfología del eritrocito. Dado que la presión atmosférica normal a nivel del mar es de 1,01325-105 Pa (« I·IO 5 Pa), esa presión crítica para la forma representaría alrededor de 2.000 veces por encima de la atmosférica típica. Lapso de tiempo de envejecimiento Ligeras fracturas de la superficie plasmática como las mostradas en las Figuras 23 y 29 no se habían hallado anterioramente en muestras más jóvenes examinadas al mismo voltaje de aceleración, incluso a aumentos de MEB alrededor de dos veces el utilizado aquí (p. ej., Hortolà, 1992a). Por lo tanto, esas fracturas podrían ser una consecuencia del envejecimiento que devendría más lábiles las proteínas plasmáticas. Sin embargo, y aunque el efecto del envejecimiento en las formas de GRS expuestas no puede evaluarse separadamente de los otros factores, parece claro que el envejecimiento de la mancha no obstruyó la conservación general del GRS. En este sentido, la alta conservación de GRS exhibida en las muestras, en éste y en previos estudios, parece indicar que el tejido sanguíneo seco es homólogo o por lo menos análogo al momificado. Por lo tanto, no se espera que el parámetro del tiempo sea determinante per se del grado de conservación de las manchas de sangre, sino las variables del ambiente sedimentario. 205 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Glóbulos rojos de la sangre Debido a que el tamaño de las partículas de GRS libres o agregados influye su tasa de sedimentarión eritrocitaria (TSE) (Seiverd, 1983), la vista de agregados en rouleau (de TSE más alta) en la superficie de las manchas de sangre como los mostrados en las Figuras 7 y 33 podría corroborar la delgadez de la mancha en conjunto. A pesar de que bajo hiperviscosidad plasmática -como ocurre en el proceso de secado de la sangre por evaporación del agua del plasma- la incrementada densidad plasmática disminuye la sedimentación de agregados, esta viscosidad alta tiende a la vez a disminuir la agregación celular, puesto que las células tienen que moverse en aposición a través del plasma suspendiente (Lowe, 1987); así, los rouleaux mostrados en esas Figuras corresponderían a las primeras ocurrencias de agregación. Por otra parte, la presencia o ausencia de una área equinocitaria amplia puede indicar, respectivamente, un rápido o lento secado del área manchada concreta. Aunque los GRS crenados pueden ocasionalmente presentarse en la sangre circulante (Maclean, 1978), en una mancha se producen cuando ésta se seca lentamente (Seiverd, 1983). La carencia en la mancha de sangre de una visible red de fibrina puede también estar relacionada con el rápido secado de la mancha de sangre. A la vez, los rouleaux por sí mismos secuestran principalmente fíbrinógeno cuando suceden (Lowe, 1987). A pesar de que, en la preparación de frotis de sangre clínicos, la fricción y tensión superficial producen varias formas anormales que se consideran hematológicamente como un artefacto (Bessis, 1974), desde el punto de vista hemotafonómico las formas lunoides son una morfología no artefactual que se revela ser una tendencia característica y muy común de las áreas ultradelgadas manchadas de sangre. Por otra parte, las réplicas negativas aparecerían en unas de más gruesas. Aunque Tuross, Barnes & Potts (1996), tras exposición de sangre sobre herramientas experimentales de piedra a irradiación UV de laboratorio, informaron de una destrucción de toda inmunoreactividad, la exposición moderada a la irradiación UV natural, como la de la mancha de sangre de 8 años y 9 meses sobre caliza durante 2 horas, no parece afectar diferencialmente la integridad morfológica de los GRS, lo cual es consistente con otras observaciones previas en manchas de sangre humana y no humana (Hortolà, 1992b; Hortolá, sometido para su publicación, a; Hortolá, sometido para su publicación, b). 206 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Propiedades físicas del substrato No parece haber otras diferencias significativas entre el tipo concreto de substrato que una adherencia menor de la mancha de sangre sobre obsidiana. Este hecho estaría relationado con la mayor lisura de la superficie de fractura frente a las superficies granudas de la caliza y sílex. El color no estaría relacionado con la fracción celular, sino con una mejor o peor discriminación de la mancha de sangre como un todo, tanto a simple vista como a bajo aumento de MEB. La topografía se relacionaría con el grado de homogeneidad de grosor de la mancha por la formación de subáreas más gruesas/más delgadas y, así, con el aspecto de la fracción de célula siendo mostrado bajo un recubrimiento plasmático más/menos grueso. La rugosidad y textura estarían relacionadas con el asimiento mecánico y/o rotura de la fracción celular por los microcristales de la superficie durante el manchado, y con la adherencia de la sangre entera al substrato durante el secado y/o envejecimiento. En una lista de algunos materiales Uticos utilizados por el Hombre de la Edad de la Piedra en la fabricación de sus herramientas, Semenov (1964) ordenó 12 materias primas, por orden de rugosidad creciente de la fractura. Desde el cristal de roca (n° 1 ) a la nefrita (n° 12), la obsidiana se asignó al n° 2 y el sílex al n° 7, mientras que la caliza no fue incluida en aquella lista. La permeabilidad (es decir, la capacidad para transmitir fluidos, que, para una mismo materia prima lítica, será función de su coeficiente de viscosidad y presión hidrostática) se relacionaría con un ocultamiento de la sangre, especialmente la fracción fluida más que la cellular, dentro del substrato; este hipotético ocultamiento diferencial proveería de una cantidad menor de matriz de plasma para proteger los eritrocitos y los otros elementos celulares de los factores de degradación en una mancha. La absorbencia estaría relacionada con la permeabilidad, así como una ocurrencia de fisuración aumentaría el grado de permeabilidad. Desde el punto de vista hemotafonómico, el tipo concreto de substrato (de piedra o no) de la mancha de sangre, si es de propiedades físicas similares, no parece jugar un papel dramático en la morfología de los GRS. Las propiedades físicas del substrato de mancha de sangre más significativas se agruparían en tres categorías: (i) las relacionadas con el grado de homogeneidad de espesor de la mancha por la formación de subáreas más gruesa/más delgadas (topografía), (ii) las relacionadas con el asimiento mecánico y/o rotura de la fracción celular por microcristales de la superficie durante el manchado, y con la adherencia de la sangre entera al substrato durante el secado y/o envejecimiento (rugosidad y textura), y (iii) las 207 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 relacionadas con un ocultamiento de la sangre, especialmente la fracción fluida más que la celular, dentro del substrato (permeabilidad, su absorbencia relacionada, y el fisurado que influye en la permeabilidad). De acuerdo con mi experiencia previa, tal categorización de materias primas basada en propiedades físicas es más descriptiva de los factores limitantes que afectan a los GRS y las manchas de sangre que las tipologías, y concuerda con algunos comentarios emitidos en lo que concierne a materias primas en análisis lítico de huellas de uso (Schiffer et ai, 1979). Composición química del substrato Respecto a la obsidiana y sílex, el anhídrido silícico (sílice, SiCb), tanto amorfo -como en la obsidiana- como cristalizado -como en el sílex-, es prácticamente insoluble en agua o ácidos, excepto el ácido fluorhídrico (HF), y ligeramente atacado calentándolo con ácido fosfórico (H3PÛ4) concentrado; las formas amorfas de sílice, especialmente cuando de dividen finamente, son solubles en álcalis, mientras que las cristalizadas son escasamente atacadas por álcalis (Budavari, 1996, monografía 'Silicon Dioxide'). Se ha hallado in vitro un cierto grado de alteración morfológica dependiente del tiempo, de GRS humanos aislados dentro de SiU2 particulado, previamente lavados (Diociaiuti et al, 1999). Respecto a la caliza, los cristales de carbonato calcico (CaCOs) son prácticamente insolubles en agua y solubles en ácidos diluidos (Budavari, 1996, monografía 'Calcium Carbonate'). Se ha hallado in vivo e in vitro que los niveles plasmáticos de calcio altos no afectan a la morfología de los GRS (Mark et al, 2000). In vivo, el pH de la sangre humana está estrechamente controlado a 7,4 (Voet, Voet & Pratt, 1999), e in vitro, cuando se recolecta en anticoagulante de dextrosa fosfato citrato y se mide a la temperatura de mantenimiento, es aproximadamente 7,4-7,5 (Walker, 1990). Así, el valor normal del pH de la sangre humana es muy poco alcalino, cerca de neutro. Por lo tanto, no se espera que la sangre pueda disolver los compuestos de la roca como para hacer posible una influencia química del substrato en la morfología de los GRS. Conclusiones Los resultados de este estudio concuerdan con análisis por MEB anteriormente informados de manchas de sangre de mamífero más jóvenes sobre sílex, grauvaca y substratos 208 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 no pétreos (Hortolà, 1992a; Hortolà, 1992b; Hortolà, 1994; Hortolà, sometido para su publicación, a; Hortolà, sometido para su publicación, b). Aunque la mayor parte de las formas de GRS originario de mancha halladas comparten morfología con las descritas en Hematología (e.g., Bessis, 1974; Castoldi, 1981; Bull & Breton-Gorius, 1995), dos formas de GRS independientes del tiempo interpretadas como específicamente debidas a fenómenos de secado -y, así, obviamente no halladas bajo condiciones fisiológicas- pueden ser consideradas como las genuínas morfologías de GRS características de manchas de sangre (como mínimo de mamífero): las formas lunoides, que se deberían a interacción eritrocito-plasma durante el secado, y las réolicas negativas, que estarían relacionadas con la impresión por la matrix de plasma seco. En este sentido, se sugiere una sistemática para los GRS de mamífero originarios de mancha de sangre (Figura 35). El hallazgo de diferentes morfologías de GRS y matriz de plasma conservadas en manchas de sangre humana sobre materias primas líticas tecnoprehistóricas posee claras aplicaciones a la Paleoetología Homínida y al análisis lítico, especialmente cuando pueden estar presentes otros indicios o incluso evidencias de canibalismo prehistórico (p. ej., Defleur et al., 1999; Fernández-Jalvo et al., 1999; Marlar et ai, 2000). Y, en conjunto, establece las bases experimentales para la investigación morfológica sobre manchas de sangre forenses y bioarqueológicas. Agradecimientos Agradecido reconocimiento al Servicio de Recursos Científicos de la Universidad Rovira i Virgili por la utilización de su instalación de Microscopía Electrónica. Este trabajo tuvo el apoyo de una beca (DGESIC N° ACPI999-0177) y un proyecto subvencionado (DIGICYT N° PB-96-1026-C03-02) del gobierno español, y una subvención (CIR1T N° 1999SGR00181) del catalán (Generalidad de Cataluña). 209 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Tablas Tabla 1. Propiedades físicas de los substratos Uticos de las manchas de sangre Substrato obsidiana (sf) caliza (ce) sílex (sf) Color gris medio gris claro blanco Topografía casi plana casi plana casi plana Rugosidad nula baja media Textura hipohialina (im) granuda (fh) granuda (fh) Fisuración nula nula nula Absorbencia indetectada indetectada indetectada Permeabilidad indetectada indetectada indetectada Leyenda: ce = corteza erosionada: fh = grano fino homogéneamente; im = impurezas menores presentes dentro del vidrio; sf= superficie de fractura. Tabla 2. Rangos de temperatura y humedad relativa de la sala de mantenimiento de las muestras, para 3 años consecutivos Año [ 11 III VER tM DIA,M NA tm 11 11 11 11 DIA,m NA 0 0 HM 83 84 84 84 DIA11M NA Hm 38 38 38 38 DIAHn, NA 0 0 0 32.5 34 34 34 +1,5 0 -t-1 0 0 0 0 Leyenda: DÍA = diferencia interanual: H = humedad relativa en tanto por ciento; M = máximo; m = mínimo; NA = no aplicable; t = temperatura en grados Celsius; VER = valor extremo registrado. 210 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Texto de las Figuras Figura 1. Aspecto a bajo aumento de la mancha de sangre de 7 años y 6 meses sobre obsidiana. Puede verse la nula rugosidad de la superficie del substrato (S). A pesar de la delgadez de la mancha, que se evidencia por la carencia de un patrón de macrofractura, se muestran varias microescamas levantadas. El origen de este levantamiento de microescamas, cercano al hallado anteriormente sobre acero inoxidable (Hortolà, 1992a), estaría relacionado con la lisa textura del substrato, hemotafonómicamente comparable al acero. Aumento según la barra. Figura 2. Mancha de sangre de 7 años y 6 meses sobre obsidiana. Se muestran microescamas de sangre de GRS poliestratificados. Las partículas brillantes son polvo post-deposicional sedimentado sobre la mancha. Aumento según la barra. Figura 3. Mancha de sangre de 7 años y 6 meses sobre obsidiana. Otra vista de microescamas de sangre de GRS poliestratificados. El aspecto de los eritrocitos es muy parecido al de la Figura 2. Se muestra una célula rota (esquizocito, p). Aumento según la barra. Figura 4. Mancha de sangre de 7 años y 6 meses sobre obsidiana. Se muestran microescamas de sangre de GRS poliestratificados conteniendo una pila de 3 GRS (rouleaux, flecha) bajo una microfractura de plasma así como una célula crenada (equinocito, e). Aumento según la barra. Figura 5. Mancha de sangre de 7 años y 6 meses sobre obsidiana. Pseudofrotis oligoestratificado en los contrafuertes de la mancha. Esta oligoestratifícación se evidencia por la superposición de formas lunoides (i). Aumento según la barra. Figura 6. Mancha de sangre de 7 años y 6 meses sobre obsidiana. Se muestra el pseudofrotis oligoestratificado con algunos GRS adquiriendo, por compresión de eritrocitos vecinos, la forma de células en lágrima (dacriocitos, p. ej. de). Aumento según la barra. 211 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Figura 7. Mancha de sangre de 7 años y 6 meses sobre obsidiana. Se exhibe el pseudofrotis oligoestratifícado conteniendo GRS libres y apilados en rouleau bajo el plasma. Se ve también un GRS plegado, como xerocito (x). Aumento según la barra. Figura 8. Mancha de sangre de 7 años y 6 meses sobre obsidiana. Pseudofrotis oligoestratifícado con formas lunoides. Puede verse un equinocito incipiente pareciendo un sol plano (he); ésta sería una morfologia subordinada dentro de las formas lunoides, puesto que su patrón de microfracturación (siguiendo el perímetro) es asimilable al de aquellas formas. Aumento según la barra. Figura 9. Aspecto a bajo aumento de la mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 1 sobre caliza (BS); las otras dos manchas de sangre se ven parcialmente, también. La continuidad de la capa manchada (es decir, la ausencia de un patrón de desecación visible a este nivel) es una señal que corroboraría su delgadez. Puede verse la textura granuda del substrato. Aumento según la barra. Figura 1.0. Mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 1 sobre caliza. Pueden verse algunas réplicas negativas de GRS (p. ej., n). Aumento según la barra. Figura 11. Mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 1 sobre caliza. Se muestran formas lunoides en los contrafuertes de la mancha y plasma degradado. Aumento según la barra. Figura 12. Mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 1 sobre caliza. Se muestran microescamas elevadas con pocos GRS, en el centro de mancha. Aumento según la barra. Figura 13. Mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 1 sobre caliza. GRS en los contrafuertes de la mancha. Puede verse una célula en boca (estomatocito, s). Aumento según la barra. Figura 14. Mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 1 sobre caliza. GRS en los contrafuertes de la mancha. Se muestran el plasma (P) en capas, y varios GRS más pequeños que el típico (microcitos). Aumento según la barra. 212 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Figura 15. Aspecto a bajo aumento de la mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 2 sobre caliza (BS). Esta vista corresponde al área del filo de la lasca. Aumento según la barra. Figura 16. Mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 2 sobre caliza. Se muestra una área del filo de la lasca conteniendo un codocito (flecha) y varios discos planos (leptocitos) en el área más externa del borde. Aumento según la barra. Figura 17. Mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 2 sobre caliza. Se muestran contrafuertes de la mancha con plasma sin GRS degradado/fragmentado (P). Aumento según la barra. Figura 18. Mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 2 sobre caliza. Pueden verse varias formas lunoides y una gran acumulación de equinocitos en el centro de mancha. Esta Figura es muy parecida a la correspondiente a una depresión del substrato en el área manchada delgada de una mancha de sangre de 1 año sobre sílex (Hortolà, 1992a, Fig. 13), donde la amplia aparición de equinocitos se interpretó como debida por sí misma a un secado lento en aquella área topográficamente deprimida y/o a la acumulación de algo de sudor al tiempo del manchado. Este fenómeno podría también estar relacionado con una pérdida, preenvejecimiento, de plasma fluido debido a la inclinación topográfica, o corresponder a una subàrea más gruesa con secado lento de la sangre, donde el plasma se ha removido o degradado y dejado fuera debido a un proceso de envejecimiento durante el lapso de tiempo de mantenimiento, y así mostrando los GRS interiores, no superficiales. Aumento según la barra. Figura 19. Mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 2 sobre caliza. Otra área de equinocitos, con dos placas supuesto plasma separado de la mancha (P?). Estas placas son muy similares a las halladas en una mancha de sangre de gacela sobre sílex examinada después de un año de mantenimiento de entierro (Hortolà, sometido para su publicación, Fig. 6), donde un GRS de forma cercana a la típica permaneció todavía ligeramente unido a una de esas placas. Tal pérdida de plasma indicaría que las áreas amplias de equinocitos corresponden a los GRS sedimentados primero o por lo menos interiores. Aumento según la barra. 213 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Figura 20. Mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 2 sobre caliza. Puede verse una célula tricóncava (knizocito, k) y algunos esquizocitos. Aumento según la barra. Figura 21. Aspecto a bajo aumento de la mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 3 sobre caliza (BS). Aumento según la barra. Figura 22. Mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 3 sobre caliza. Se muestran escamas de la mancha de sangre en el área del filo. Aumento según la barra. Figura 23. Mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 3 sobre caliza. Detalle de una escala vista en la Figura 22. Las ligeras fracturas de la superficie del plasma son un efecto artefactual que no perturbó el examen morfológico del área, y se sospecha que es ocasionado por el haz de electrones cuando se incrementa el aumento del MEB. Se evidencian también algunas réplicas negativas (p. ej., n). Aumento según la barra. Figura 24. Mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 3 sobre caliza. Se muestran, cerca de los contrafuertes de la mancha, GRS bajo el plasma, formas lunoides, y un supuesto crecimiento incipiente de microorganismos (g?). Aumento según la barra. Figura 25. Mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 3 sobre caliza. Se muestran el aspecto en capas de la matriz de plasma, un claro estomatocito (s), y probables GRS degradados. Aumento según la barra. Figura 26. Mancha de sangre de 8 años y 9 meses n° 3 sobre caliza. Se evidencian GRS en una microfractura y bajo el plasma. La irregular fracturación alrededor de los GRS indicaría que ésta no ha se hecho exactamente a lo largo de la interfase eritrocito-plasma. Aumento según la barra. Figura 27. Aspecto a bajo aumento de la mancha de sangre de 10 años y 2 meses sobre sílex (BS). Puede verse la textura granuda del substrato. Las diferencias en color de la mancha corresponderían a diferentes grosores de la misma. Aumento según la barra. 214 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Figura 28. Mancha de sangre de 10 años y 2 meses sobre sílex. Se muestra el aspecto de escamas de una área manchada de sangre. En una limitada área del substrato (M), una escama ha saltado y ha desaparecido, dejando ver la extrema delgadez de la película de sangre. Aumento según la barra. Figura 29. Mancha de sangre de 10 años y 2 meses sobre sílex. Cerca del centro de la mancha, se muestran ligeras fracturas de la superficie del parecidas a las mostradas en la Figura 23. Aumento según la barra. Figura 30. Mancha de sangre de 10 años y 2 meses sobre sílex. Cerca de los contrafuertes de la mancha, se evidencia una área de formas lunoides. Se cree que la muesca (flecha) es un artefacto, que denotaría un ligero contacto accidental con cualquier objeto, probablemente durante el procesado de MEB. Aumento según la barra. Figura 31. Mancha de sangre de 10 años y 2 meses sobre sílex. Cerca de los contrafuertes de ! la mancha, se muestran dos morfologías diferentes de GRS oligoestratificados. Pueden verse las diferencias de aspecto entre las formas lunoides (p. ej., m) y GRS ocultos, recubiertos de una capa delgada de plasma (p. ej., h y eritrocitos vecinos). Aumento según la barra. Figura 32. Mancha de sangre de 10 años y 2 meses sobre sílex. Entre dos áreas con formas lunoides y plasma original donde los GRS no son totalmente discernibles, se evidencia un área deprimida -donde parece que el plasma ha saltado de la mancha, probablemente debido al proceso de envejecimiento-. Gracias a esta hipotética remoción del plasma, los eritrocitos se verían mejor. Aumento según la barra. Figura 33. Mancha de sangre de 10 años y 2 meses sobre sílex. Un área con un estado de conservación de los GRS muy bueno. Este estado de conservación es muy parecido al mostrado en una mancha delgada accidental de sangre humana de 3 meses sobre el mismo tipo de sílex (Hortolà, 1992a, Fig. 2), donde pudieron verse varias morfologías tales como las de discocito, leptocitoides libres y apilados en rouleau, esferoestomatocito, eritrocito roto y GRS con la huella del glóbulo rojo contiguo. Aumento según la barra. 215 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Artículos sometidos para su publicación ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Figura 34. Mancha de sangre de 10 años y 2 meses sobre sílex. Otra área con un similar muy buen estado de conservación de los GRS. Se muestran morfologías de GRS diferentes de las exhibidas en la Figura 33, por ejemplo equinocitos. Aumento según la barra. Figura 35. Sistemática sugerida para los GRS de mamífero originarios de mancha. Etimologías: tafoeritrocitos, del griego toxpoc (tafos, entierro); físiocitos, del griego (pxxnç (físis, Naturaleza); kelidocitos, del griego KriA.v5a (kelida, mancha); hecatocitos, del griego EKCC'ITI (Hécate, la diosa suprema griega identificada en el cielo con Selene, la deidad lunar); janocitos, del latín lanus (Jano, el dios bifronte romano). 216 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 7. CONCLUSIONES UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Conclusiones ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 7.1. Observación Se habían observado previamente típicos eritrocitos de mamífero (discocitos) en manchas de sangre sobre herramientas líticas prehistóricas, por parte de Loy (1983, 1987) y Loy& Wood (1989). 7.2. Hipótesis Se plantearon las siguientes hipótesis a contrastar y preguntas a responder: • hipótesis inicial: En una mancha de sangre de mamífero sobre substrato Utico, la preservación morfológica de los eritrocitos es experimentalmente independiente de su antigüedad. En caso de tener que rechazar esta hipótesis, se planteaba la siguiente • pregunta subordinada a la hipótesis inicial: ¿Cuánto tiempo pueden preservarse morfológicamente los eritrocitos de mamífero en una mancha de sangre sobre substrato Utico? En caso de poder aceptar la hipótesis inicial, se planteaba la siguiente • hipótesis subordinada a la hipótesis inicial: En una mancha de sangre de mamífero sobre substrato Utico, los eritrocitos presentan únicamente las mismas morfologías que aparecen en condiciones fisiológicas (normales o patológicas). En caso de tener que rechazar esta hipótesis, se planteaba la siguiente • pregunta subordinada a la hipótesis subordinada: ¿Qué morfologías caracterizan a los eritrocitos de mamífero en una mancha de sangre sobre substrato Utico? 7.3. Experimentación Se realizó una experimentación con manchas de sangre, utilizando como substrato de las mismas materiales líticos de interés tecnoprehistórico y otros materiales, no líticos, de interés criminalístico. El rango temporal experimental de las manchas fue: 1 mes - 10 años. 218 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Conclusiones ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 La sangre utilizada fue: • humana (Homo sapiens sapiens) • de mamífero no humano (Tayassu tajacu, Gazella dorcas) • desconocida (supuestamente humana) El substrato de las manchas utilizado fue: • sílex • grauvaca • obsidiana • caliza • acero inoxidable • asfalto • papel. De acuerdo con su grosor, las manchas fueron: ultradelgadas- gruesas. Las manchas se mantuvieron: • enterradas, en exterior (Gazella dorcas) • sin enterrar, en interior (resto). La técnica morfoanalítica empleada fue: • Microscopía Electrónica de Barrido. En esta experimentación, se observó que: • La preservación general de las manchas fue mejor • en los substratos duros que en los blandos • en las superficies rugosas que en las lisas Los eritrocitos de mamífero en manchas de sangre exhibieron algunas morfologías previamente descritas en frotis hematológicos y otras específicas de mancha no descritas anteriormente en frotis hematológicos ni en manchas criminalísticas. Las morfologías eritrocitarias comunes a frotis hematológicos y manchas de sangre fueron: • discocitos • individuales • pilas (rouleaux) • equinocitos • esferocitos 219 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Conclusiones ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 • estomatocitos • leptocitos • esquizocitos Las morfologías específicas de mancha, no descritas en frotis hematológicos, fueron: • formas lunoides • réplicas negativas 7.4. Tesis Podemos aceptar la hipótesis inicial. Es decir, que: En una mancha de sangre de mamífero sobre substrato Utico, la preservación morfológica de los eritrocitos es experimentalmente independiente de su antigüedad. Esta afirmación tiene carácter probable y no necesario, de acuerdo con los principios lógico-probabilísticos, y sería válida, como mínimo, al nivel de 10 años y 2 meses de antigüedad. Debemos rechazar la hipótesis subordinada a la hipótesis inicial. Es decir, que: En una mancha de sangre de mamífero sobre substrato Utico, los eritrocitos presentan también otras morfologías distintas a las que aparecen en condiciones fisiológicas (normales o patológicas). Debemos responder a la pregunta subordinada a la hipótesis subordinada. La respuesta es: Las morfologías que caracterizan a los eritrocitos de mamífero en una mancha de sangre sobre substrato Utico son las formas lunoides v las réplicas negativas. Finalmente, se propone la siguiente clasificación morfológica de los eritrocitos de mamífero en manchas de sangre, válida, como mínimo, para substratos Uticos: fisiocitos GRS fisiológicos, no característicos de mancha discocitos, equinocitos, etc. hecatocitos (formas lunoides) tafoeritrocitos GRS originarios de mancha kelidocitos GRS característicos de mancha, no fisiológicos janocitOS (réplicas negativas) 220 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 8. REFERENCIAS UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Almarcha, J. 1990 Métodos de estudio de las células sanguíneas. Semiología. In Woessner, S., Editor: Técnicas en Citología Hematológica. Cultivos Morfología, in vitro, Citoquímica, Inmunología, Ultraestructura, Citogenética y Biopsias medulares. Barcelona: Medici, 16-61. Ambrose, S. H. 2001 Paleolithic technology and human evolution. Science 291: 1748-1753. Andrew, W. 1965 Comparative Hematology. New York: Gruñe & Stratton. Asimov, I. 1990 Cronología de los descubrimientos. Traducción de V. Villacampa. Barcelona-Cáracas-México: Ariel. Aznar, B. 1950 El Pelo y la Sangre como Indicios del Delito. Madrid: Escuela de Medicina Legal. Bahn, P. G. 1987 Getting blood from stone tools. Nature 330: 14. Bargmann, 1968 Histología y Anatomía Microscópica Humanas. 3a edición. Traducción de J. G. Sánchez-Lucas. Barcelona [etc.]: Labor. Barnhart, M. I., M. A. Wallace & J. M. Lusher 1983 Red Blood Cells. In Hodges, G. M. & K. E. Carr, Editors: Biomédical Research Applications of Scanning Electron Microscopy. Volume 3. London- New York: Academic Press, 171-243. 222 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Barnhart, M. I. et alii 1980 Tissue vestiges of an ancient Magadan mammoth calf. Scanning Electron Microscopy 2: 163-170. Behringwerke AG [1991] Rapignost®. For more perspectives in urinalysis [folleto técnico]. Marburg: Behringwerke AG. Bennett, V. 1985 The membrane skeleton of human erythrocytes and its implications for more complex cells. Annual Review of Biochemistry 54: 273-304. Bennett, V. & S. Lambert 1991 The spectrin skeleton: from red cells to brain. Journal of Clinical Investigations!: 1483-1489. Berga, L. 1980 Estudio del comportamiento reológico de la sangre humana. Aplicaciones al flujo sanguíneo. Madrid: Fundación Juan March. Berga, L. et alii 1982 Contribución de la microscopía electrónica de barrido (MEB) al estudio de la morfología eritrocitaria y al diagnóstico de los síndromes hemolíticos. Sangre 4: 445-460. Berga, L. et alii 1987 Contribución de la microscopía electrónica de barrido al estudio ultraestructural de la médula ósea humana. Sangre 32: 429-445. 223 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Bermúdez de Castro, J. M., T. G. Bromage & Y. Fernández Jalvo 1989 El MEB y la técnica de réplicas aplicados en Paleontología humana y Tafonomía. In Aguirre, E., Coordinador: Paleontología. Consejo Superior de Investigaciones Científicas, 161-178. Madrid: Bernard, J. 1983 Le Sang et l'Histoire. Paris: Buchet/Chastel. Beroldingen, C. H. von et alii 1989 Applications of PCR to the analysis of biological evidence. In Erlich, H. A., Editor: PCR Technology. Principles and applications for DNA amplification. New York [etc.]: Stockton Press, 209-223. B ignot, G. 1988 Los microfósiles.Los diferentes grupos. Aplicaciones paleobiológicas y geológicas. Traducción de I. Meléndez, revisión y adaptación de B. ( Meléndez. Madrid: Paraninfo. Branemark, P. I. & J. Linstrom 1963 Shape of circulating blood corpuscles. Biorheology 1: 139-142. Briuer, F. L. 1976 New clues to stone tool function: plant and animal residues. American Antiquity 41: 478-484. Bull, B. S. & J. Breton-Gorius 1995 Morphology of the erythron. In Beutler, E. et alii: Williams Hematology. 5th. edition. New York [etc.]: McGraw-Hill, 349-363. 224 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Bynum, W. F. 1986 Células de la sangre. In Bynum, W. F., E. J. Browne & R. Porter, Directores: Diccionario de Historia de la Ciencia. Traducción de Diorki, S.A. Barcelona: Herder, 90-91. Cámara y Bayon, L. de la 1875 Examen Científico-legal de las Manchas de Sangre. Discurso leído ante el claustro de catedráticos de la Universidad Central. Madrid: Imprenta y Fundición de Manuel Tello. Carracedo, A. 1985 Typing of serum protein genetic markers in bloodstains using isoelectric focusing. In Lee, H. C. & R. E. Gaensslen, Editors: Advances in Forensic Science. Foster City, ÇA: Biomédical Publications. Castoldi, G. L. 1981 Erythrocytes. In Zucker-Franklin, D. et alii, Editors: Atlas of Blood Cells. Function and Pathology. Milano/Philadelphia: Ermes/Lea & Febiger, 35-145. Cattaneo, C. et alii 1993 Blood residues on stone tools: indoor ant outdoor experiments. World Archaeology 25: 29-43. Clarke, J. A. & A. J. Salsbury 1967 Surface ultramicroscopy of human blood cells. Nature 215: 402-404. Claugher, D. & P. D. Taylor 1992 Electron Microscopy. In Briggs, D. E. G. & P. R. Crowther, Editors: Palaeobiology. A synthesis. Paperback reissue with corrections. Oxford [etc.]: Blackwell Scientific Publications, 508-511. 225 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Culliford, B. J. 1971 The Examination and Typing of Bloodstains in the Crime Laboratory. Washington, D.C.: National Institute of Law Enforcement and Criminal Justice. Chien, S. 1975 Biophysical behavior of red cells in suspensions. In Surgenor, D. M., Editor: The Red Blood Cell. 2nd. edition. Volume 2. New York: Academic Press, 1031-1131. Chien, S. & L. A. Sung 1990 Molecular basis of red cell membrane rheology. Biorheology 27: 589- 597. Dintenfass, L. 1971 Blood Microrheology. Viscosity factors in blood flow, ischaemia and thrombosis. London [etc.]: Butterworths. 1976 Rheology of Blood in Diagnostic and Preventive medicine. An introduction to clinical haemorheology. London [etc.]: Butterworths. Dittmer, D. S., Editor 1961 Blood and Other Body Fluids. Washington, DC: Federation of American Societies for Experimental Biology. Dixon, T. R. et alii 1976 A scanning electron microscope study of dried blood. Journal of Forensic Sciences 21: 797-803. Erlich, H. A. 1989 Preface. In Erlich, H. A., Editor: PCR Technology. Principles and applications for DNA amplification. New York [etc.]: Stockton Press, iii-iv. 226 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Erslev, A. J. & E. Beutler 1995 Production and destruction of erythrocytes. In Beutler, E et alií: Williams Hematology. 5th. edition. New York [etc.]: McGraw-Hill, 425-440. Fawcett, D. W. & E. Raviola 1994 Bloom and Fawcett, a Textbook of Histology. 12th. edition. New YorkLondon: Chapman & Hall. Fiori, A. 1962 Detection and identification of bloodstains. In Lundquist, F., Editor: Methods of Forensic Science. Volume 1. New York-London: John Wiley & Sons, 243-290. Fullagar, R, Editor 1998 A Closer Look. Recent Australian studies of stone tools. Sydney: Archaeological Computing Laboratory, School of Archaeology, University of Sydney. Gaensslen, R. E., Compilator and Editor 1983 Sourcebook in Forensic Serology, Immunology, and Biochemistry. Unit IX: Translations of Selected Contributions to the Original Literature of Medicolegal Examinations of Blood and Body Fluids. Washington, D.C.: U.S. Department of Justice, National Institute of Justice. Geberth, V. J. 1996 Practical Homicide Investigation. Tactics, procedures, and forensic techniques. 3rd. edition. CRC Series in practical aspects of criminal and forensic investigations No. 16. Boca Raton [etc.]: CRC Press LLC. 227 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Geyh, M. A. & H. Schleicher 1990 Absolute Age Determination. Physical and chemical dating methods and their application. English by R. Clark Newcomb. Berlin [etc.]: Springer-Verlag. Goldstein , J. I. et alii 1992 Scanning Electron Microscopy and X-Ray Microanalysis. A text for biologists, materials scientists, and geologists. 2nd. edition. New York/London: Plenum Press. Gorski, A. 1997 Material residues on stone tool edges: is optical microscopy missing an opportunity? The Microscope 45: 89-92. Gramly, R. M. 1991 Blood residues upon tools from the East Wenatchee Clovis site, Douglas County, Washington. Ohio Archaeologist 41: 4-9. s.f. East Wenatchee Clovis site [en línea]. Archaeological Lancaster, OH: The Archaeological Society of Ohio. Reports. URL: . Guest, M. M., J. R. Derrick & T. P. Bond 1971 Altered rheology in human microcirculation resulting from abnormal erythrocytes. Biorheology 8: 59-64. Guitián, F. 1964 Técnicas de Análisis de Suelos: Experiencias de campo. Madrid: C.S.I.C. Gurfmkel, D. M. & U. M. Franklin 1988 A study of the feasibility of detecting blood residues on artifacts. Journal of Archaeological Science 15: 83-97. 228 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Gwinn, R. P., Chairman, Board of Directors 1987 The New Encyclopœdia Britannica. 15th. edition. Volume 11. Entrada: "Swammerdam, Jan". Chicago [etc.]: Encyclopaedia Britannica, Inc. Harada, A. et alii 1987 A new method for typing haptoglobin in bloodstains using immobilized allô A lectin. Journal of Forensic Sciences 32: 1062-1064. Hardesty, D. L. 1979 Antropología Ecológica. Traducción de R. Aiguabella y F. Riera, revisión de J. Miró. Barcelona: Bellaterra. Hardy, B. L., V. Raman & R. A. Raff 1997 Recovery of Mammalian DNA from Middle Palaeolithic Stone Tools. Journal of Archaelogical Science 24: 601 -611. Hawkey, C. M. & T. B. Dennet 1989 Atlas de Hematología Veterinaria Comparada. Células sanguíneas normales y anormales en mamíferos, aves y reptiles. Traducción de M. Lloria, revisión de S. Lavín. Barcelona: Grass. Hay den, B., Editor 1979 Lithic use-wear analysis. New York: Academic Press. Heinzelin, J. de et alii 1999 Environment and behavior of 2.5-million-year-old Bouri hominids. Science 284: 625-629. Hyland, D. C. et alii 1990 Identification of the species of origin of residual blood on lithic material. American Antiquity 55: 104-112. 229 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Inman K. & N. Rudin 2000 Principles and Practice of Criminalistics. The Profession of Forensic Science. Boca Raton [etc.]: CRC Press LLC. Jain, N. C. 1986 Schalm 's Veterinary Hematology. 4th. edition. Philadelphia: Lea & Febiger. Kirk, P. L. 1953 Crime Investigation. Physical evidence and the police laboratory. New York-London: Interscience. Laughlin, W. S. & B. Harper 1988 Peopling of the continents: Australia and America. In Maseie-Taylor, C. G. N. & G. W. Lasker, Editors: Biological Aspects of Human Migration. Cambridge [etc.]: Cambridge University Press, 14-40. LeBlond, P. F. & R. Shoucri 1978 Calculation of surface area and volume of human erythrocytes from scanning electron micrographs. Journal of Microscopy 113: 161-170. Lee, W. M. F. & C. V. Dang 2000 Control of cell growth and differentiation. In Hoffman, R. et alii, Editors: Hematology. Basic principles and practice. 3rd. edition. New York [etc.]: Churchill Livingstone. Lee, H. C. & E. M. Pagliaro 2000 Blood Identification. In Siegel, J. A., P. J. Saukko & G. C. Knupfer, Editors: Encyclopedia of Forensic Sciences. Volume 3: Geografical profiling-Wood analysis. San Diego, CA [etc.]: Academic Press, 1331- 1338. 230 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Lewis, A. E. 1970 Principles ofHematology. London: Butterwoths. Locquin, M. & M Langeron 1985 Manual de Microscopía. Traducción de M. Durfort. Barcelona: Labor. López, L. 1953 Técnica Médico-Legal. Volumen I: Criminalística. Valencia: Saber. Lowe, G. D. O. 1987 Blood rheology in vitro and in vivo. In Lowe, G. D. O., guest Editor: Blood Rheology and Hyperviscosity Syndromes. Baillière's Clinical Haematology. Volume 1, n. 3. London [etc.]: Baillière Tindall, 597-636. Lowenstein, J. M. 1993 Immunospecificity of fossil proteins. Implications for the establishment of evolutionary trends. In Engel, M. H. & S. A. Macko, Editors: Organic Geochemistry. Principles and applications. New YorkLondon: Plenum Press, 817-827. Loy, T. H. 1983 Prehistoric blood residues: detection on tool surfaces and identification of species of origin. Science 220: 1269-1271. 1987 Recent advances in blood residue analysis. In Ambrose, W. R. & J. M. J. Mummery, Editors: Archaeometry: Further Australasian Studies. Canberra: Australian National University, 7-65. 1992 Detection, amplification and identification of 2800 year old DNA from blood residues on prehistoric stone tools. Ancient DNA Newsletter 1: 20. 231 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Loy, T. H. 1998 Organic residues on Oldowan tools from Sterkfontein Cave, South Africa. In Raath, M. A., H. Soodyall, K. L. K. D. Barkhan & P. V. Tobias, Editors: Dual Congress of the International Association for the Study of Human Paleontology, and International Association of Human Biologists. Johannesburg: Department of Anatomical Sciences, University of the Witwatersrand Medical School, 74-75. Loy, T. H. & E. J. Dixon 1998 Blood residues on fluted points from eastern Beringia. American Antiquity 63: 21-46. Loy, T. H. & B. G. Hardy 1992 Blood residue analysis of 90,000 year old stone tools from Tabun Cave, Israel. Antiquity 66: 24-35. Loy, T. H. & K. I. Matthaei 1994 Species of origin determination from prehistoric blood residues using ancient genomic DNA. Australasian Biotechnology 4: 161-162. Loy, T. H. & A. R. Wood 1989 Blood residue analysis at Çayònü Tepesi, Turkey. Journal of Field Archaeology 16: 451-460. Loy, T. H. et alii 1990 Accelerator radiocarbon dating of human blood proteins in pigments from Late Pleistocene art sites in Australia. Antiquity 64: 110-116. Luis, J. V. de 1990 Policia Científica. Volumen II: Técnica policial. Valencia: Servicio de Publicaciones de la Universidad de Valencia. 232 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 MacDonald, R. C. et alii 1994 Atomic force microscopy of the erythrocyte skeleton suggests a new mechanism of elasticity. Molecular Biology of the Cell (supplement) 5: 418a. Marill, M. R. 1990 La célula. Generalidades. In Woessner, S., Editor: Técnicas en Citología Hematológica. Morfología, Citoquímica, Inmunología, Ultraestructura, Cultivos in vitro, Citogenética y Biopsias medulares. Barcelona: Medici, 1-15. Mata. P. 1912 Tratado Teórico-Práctico de Medicina Legal y Toxicologia. 6a edición. Tomo 3: Medicina Legal. Madrid: Bailly-Bailliere. McDonald, G. A., J. Paul & B. Cruickshank 1989 Altas de Hematología. 5a edición. Traducción de M. A. Marino. Madrid: Editorial Médica Panamericana. Miki, T., A. Kai & M. Ikeya 1987 Electron spin resonance of bloodstains and its application to the estimation of time after bleeding. Forensic Science International 35: 149-158. Nelson, D. E. et alii 1986 Radiocarbon dating blood residues on prehistoric tools. Radiocarbon 28: 170-174. Newell, L. 1997 Diet and health in ancient and living populations. Human Evolution 12: 47-52. 233 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Newman, M. & P. Julig 1989 The identification of protein residues on lithic artifacts from a stratified boreal forest site. Journal Canadien d'Archéologie/Canadian Journal of Archaeology 13: 119-132. Newman, M. E., H. Ceri & B. Kooyman 1996 The use of immunological techniques in the analysis of archaeological materials - a response to Bisele; with report of studies at HeadSmashed-In Buffalo Jump. Antiquity 70: 677-682. Nickolls, L. C. 1962 The identification of stains of nonbiological origin. In Lundquist, F., Editor: Methods of Forensic Science. Volume 1. New York-London: John Wiley & Sons, 335-371. Parenti, U. 1973 Diccionario de Zoología. Traducción de F. Gil. Barcelona: Teide. Pawlicki, R. & M. Nowogrodzka-Zagorska 1998 Blood vessels and red blood cells preserved in dinosaur bones. Anatomischer Anzeiger 180: 73-77. Platt, W. R. 1982 Atlas de Hematología en Color. 2a edición. Traducción de M. Fraile. Barcelona: Jims. Postigo, L. 1974 Matemáticas. Barcelona: Ramón Sopeña. Rabino-Massa, E. et alii 1967 Presenza di globuli rossi nei tessuti di mummie Egiziane. Bollettino delia Società Italiana di Biologia Sperimentale 43: 1333-1334. 234 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Ratcliffe, N. A. & D. A. Millar 1988 Comparative aspects and possible phylogenetic affinities of vertebrate and invertebrate blood cells. In Rowley, A. F. & N. A. Ratcliffe, Editors: Vertebrate Blood Cells. Cambridge [etc.]: Cambridge University Press. Reithmeier, R. A. F. et alii 1993 Molecular characterization of the erythrocyte chloride-bicarbonate exchanger. In Reuss, L., J. M. Russell, Jr. & M. L. Jennings, Editors: Molecular Biology and Function of Carrier Proteins. New York: The Rockefeller University Press, 162-168. Richards, T. 1982 Stone tools and blood residues from Thorpe Common rockshelter. Cave Science 16: 106-107. Riddle, J. M. etalii 1976 Peripheral blood elements found in an Egyptian mummy: a threedimensional view. Science 192: 374-375. Rivet, P. I960 Los Orígenes del Hombre Americano. 2a edición. Traducción de J. Recasens y C. Villegas. México, D.F.: Fondo de Cultura Econòmica. Robertis, E. D. P. de & E. M. F. de Robertis 1986 Biologia Celular y Molecular. 11a edición. Barcelona [etc.]: El Ateneo. 235 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Rodríguez, X. P. 1998 Los Sistemas Técnicos de Producción Lítica del Pleistocene Inferior y Medio de la Península Ibérica: Variabilidad Tecnológica entre Yacimientos del Nordeste y de la Sierra de Atapuerca [Microforma de Tesis Doctoral]. Tarragona: Servei de Publicacions de la Universitat Rovira i Virgili. Rothstein, G. 1993 Origin and development of the blood and blood-forming tissues. In Lee, G. R. et alii: Wintrobe's Clinical Hematology. 9th. edition. Volume 1. Philadelphia-London: Lea & Febiger, 41-78. Routh, J. I., D. P. Eyman & D. J. Burton 1975 Compendio Esencial de Química General, Orgánica y Bioquímica. Volumen 2. Traducción de J. M. Ribo, J. Bosch y E. Pedroso, revisión de R. Granados. Barcelona [etc.]: Reverte. Rozman, C. et alii 1990 Ultraestructura Celular en Hematología. 2a edición. Barcelona [etc.]: Salvat. Saforcada, M. 1913 Examen Médico-Legal de las Manchas de Sangre. Publicado en la revista Therapia, núm. 51. Barcelona: J. Horta, impresor. Scott, R. B. 1966 Comparative hematology: the phylogeny of the erythrocyte. Elut 12: 340-351. 236 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Schalm, O. W. 1964 Hematología Veterinaria. Traducción de P. Franco, revisión de J. Oteiza. México, D.F.: Uteha. Schmidt-Nielsen, K. 1997 Animal Physiology. Adaptation and environment. 5th. edition. Cambridge [etc.]: Cambridge University Press. Schmidt-Nielsen, K. & C. R. Taylor 1968 Red blood cells: why or why not?. Science 162: 274-275. Schumacher, S. v. 1974 Compendio de Histología Humana. T edición. Dirección de G. Sauser. Traducción de R. Alvarez Zamora y A. Martínez Muñoz, revisión de J. Vilahur. Barcelona: Labor. Shutler, G. G. & D. C. Tompkins 1988 Bloodstain characterization in the EAP, Hp, Hb, AK and Glo I typing systems using minigels and the PhastSystem™. Forensic Science Inter'national 39: 97-104. Seiverd, C. Ë. 1983 Hematology for Medical Technologists. 5th. edition. Philadelphia: Lea & Febiger. Semaw, S. 2000 The world's oldest stone artefacts from Gona, Ethiopia: Their implications for understanding stone technology and patterns of human evolution between 2.6-1.5 million years ago. Journal of Archaeological Science 27: 1197-1214. 237 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Semenov, S. A. 1964 Prehistoric Technology. An experimental study of the oldest tools and artefacts from traces of manufacture and wear. Traducción y prefacio de M. W. Thompson. London: Cory, Adams & Mackay. Sensabaugh,G. F. 1994 DNA typing of biological evidence material. In Herrmann, B. & S. Hummel, Editors: Ancient DNA. Recovery and analysis of genetic material from paleontological, archaeological, museum, medical, and forensic specimens. New York [etc.]: Springer-Verlag, 141-148. Shafer, H. J. & R. G. Holloway 1979 Organic residue analysis in determining stone tool function. In Hayden, B., Editor: Lithic use-wear analysis. New York: Academic Press, 385- 399. Shipman, P., D. C. Fisher & J. J. Rose 1984 1984 Mastodon butchery: microscopic evidence of carcass processing and bone tool use. Paleobiology 10: 358-365. Simonin, C. 1966 Medicina Legal Judicial. 2a edición. Traducción de G. L. Sánchez Maldonado. Barcelona: Jims. Smith, J. E. 1995 Comparative hematology. In Beutler, E et alii: Williams Hematology. 5th. edition. New York [etc.]: McGraw-Hill, 77-85. Stanley, S. M. 1992 An ecological theory for the origin of Homo. Paleobiology 18: 237-257. 238 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Stout, D. et alii 2000 Stone tool-making and brain activation: Position Emission Tomography (PET) studies. Journal of Archaeological Science 27: 1215-1223. Tokunaga, J., T. Fujita & A. Hattory 1969 Scanning electron microscopy of normal and pathological erythrocytes. Archivum Histologicum Japonicum/Nippon Soshikigaku Kiroku 31: 2135. Toth, N., D. Clark & G. Ligabue 1992 Los últimos fabricantes de hachas de piedra. Traducción de J. Enamorado. Investigación y Ciencia. Edición española de Scientific American 192: 6-11. Tuross, N. & T. D. Dillehay 1995 The mechanism of organic preservation at Monte Verde, Chile, and one use of biomolecules in archaeological interpretation. Augmented title: blood residues on stone tools. Journal of Field Archaeology 22: 97-110. Tuross, N., I. Barnes & R. Potts 1996 Protein Identification of Blood Residues on Experimental Stone Tools. Journal of Archaeological Science 23: 289-296. Turquier, Y. 1993 La invención de la sangre en los animales. Traducción de J. Pericay. Mundo Científico. La Recherche, versión en castellano 13: 636-640. 239 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Vaquero, M. 1998 Tecnología Lítica y Comportamiento Humano: Organización de las Actividades Técnicas y Cambio Diacrònica en el Paleolítico Medio del Abric Romaní (Capellades, Barcelona) [Microforma de Tesis Doctoral]. Tarragona: Servei de Publicacions de la Universitat Rovira i Virgili. Vargas-Alvarado, E. 1991 Medicina Forense y Deontologia Médica. Ciencias forenses para médicos y abogados. México, D.F.: Trillas. Vermeersch, P. M., E. Paulissen & P. van Peer 1990 Le Paléolithique de la Vallée du Nil égyptien. L'Anthropologie 94: 435- 458. Villanueva, E. 1998 Los indicios en Medicina legal. In Gisbert, J. A., Director: Medicina Legal y Toxicologia. 5a edición. Barcelona [etc.]: Masson, 1103-1128. Voet, D., J. G. Voet & C. W. Pratt 1999 Fundamentals of Biochemistry. New York [etc.]: John Wiley & Sons. Ware, J. A. & B. S. Coller 1995 Platelet morphology, biochemistry, and function. In Beutler, E. et alii: Williams Hematology. 5th. edition. New York [etc.]: McGraw-Hill, 1161-1201. Woessner, S. et alii 1983 Sinus endothelial cells of the human spleen: cytological, cytochemical and ultrastructural characteristics. Revista de Diagnóstico Biológico 32: 38-45. 240 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Referencias ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Zhang, S. 1999 An Atlas of Histology. New York [etc.]: Springer. Zimmerman, M. R. 1973 Blood cells preserved in a mummy 2000 years old. Science 180: 303- 304. 241 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 9. TABLAS UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 9.1. Características de las muestras estudiadas ANT. MUESTRA 1 2 2 3 3 4 6 6 8 H 12 12 12 12 18 18 24 ESPECIE humana humana humana humana humana pécari humana ÍND. 1 ED. 31 7 31 31 31 32 10 H 31 7 SEXO varón 7 varón varón varón varón hembra varón 7 hembra hembra varón varón varón varón varón varón mujer varón varón N.M.I. 1 1 1 1 1 8 1 1 A.M.E. 13 SUBST. sílex papel sílex sílex sílex a. inox. sílex sílex asfalto sílex sílex sílex sílex grauvaca sílex sílex sílex obsidiana caliza sílex S(H) 170690-1 M P(H?)1 50691 S(H)170690-2M S(H)101289 S(H) 170690-3 M I(H)1 60391 S(T)1 3 1289/1 S(H)170690-6M A(H?)~1189 S(T)1 3 1289/2 S(D)131289 S(H)180191 G(H) 180790 humana (?) 2(?) 1 1 1 1 1 1 150* 11 35 9 9(1) 25 21 humana (?) 3(?) pécari gacela humana humana 1 1 1 1 1 1 1 1 4 1 5 1 (2 f.e.) 25* (S) 1 1 1 1 1 1 1 1 1 3 1 700 350 35 13 100 8 12 6 55 58 (S) 30 ió H 3 H 32 31 31 31 31 31 32 32 28 S(H)1 70690- 12M humana S(H)1 70690- 18M humana S(H)170690-24M humana S(H)170690-36M humana O(H)281292 Z(H)030991 S(H)280390 humana humana humana 36 90 105 122 Leyenda: A = substrato de asfalto. A.M.E. = área manchada examinada (mm2. ~), ANT. = antigüedad (meses), ED. = edad (años), f.e. = fragmentos estudiados, G = substrato de grauvaca. H = sangre humana. I = substrato de acero inoxidable. IND. = individuo, M = mese(es), N.M.I. = número de manchas individuales. O = substrato de obsidiana, P = substrato de papel. S = substrato de sílex, 2 = suma del área manchada estudiada. SUBST. = substrato, T = sangre de tayasuino (pécari de collar), Z =' substrato de caliza. /I = fragmento 1,12 = fragmento 2. * No se incluye el área utilizada para el screening in situ. 243 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 9.2. Determinación de los materiales líticos substrato de las manchas estudiadas PROCEDENCIA UBICACIÓN LOCALIDAD COLOR TEXTURA BRILLO DIAFANIDAD FRACTURA GRANO EFERVESC. MAGNETISMO GUSTO MEVER. PRAL. CONCLUSIÓN bloque flanco carretera Ulldemolins blanco granuda ceroso translúcido concoidal muy fino (guijarro) (trinchera FFCC) (Sitges) gris obscuro granuda mate opaco concoidal canto rodado riera de Ribes St. Pere de Ribes gris medio granuda mate opaco concoidal muy fino (guijarro) (GMC) (U.R.S.S.) gris medio hipohialina vitreo translúcido concoidal ausente fino no no insípido no estudiada sílex no no insípido cz, fl, bt (mac) * sí no insípido no estudiada caliza no no insípido no estudiada obsidiana grauvaca Leyenda: bt = biotita, cz = cuarzo, EFERVESC. = efervescencia al HC1 10% v/v, fl = feldespato, FFCC = ferrocarriles. GMC = Grup Minéralogie Català (Barcelona), mac = mineral de la arcilla, MINER. PRAL. = mineralogía principal. ( ) = dato más aproximado conocido. * Estudio mediante lámina fina realizado por el Dr. Ramon Salas, Profesor Titular del Departamento de Geoquímica. Petrología y Prospección Geológica (Universidad de Barcelona). 244 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 9.3. Detalles de los materiales no Uticos substrato de las manchas estudiadas y descripción de las mismas MATERIAL papel acer. inox, asfalto PROCEDENCIA pañuelo punta de bisturí paso de cebra UBICACIÓN acera de via pública C.S. blanco F.M. gota* impresión charco M.P. proyección contacto escurrimiento (W. R. Swann Co. Ltd.) plateado calzada de vía pública gr. obsc. Leyenda: acer. inox. = acero inoxidable. C.S. = color del substrato, F.M. = forma de las manchas, gr. obsc. = gris obscuro, M.P. - mecanismo de producción, ( ) = dato más aproximado conocido. * Altura de caída h (cm), basada en el patrón de salpicaduras de la sangre de Kirk (1953): 38 < h < 53. 245 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 9.4. Determinación de falsos positivos (evaluación de la especificidad) en las tiras reactivas de urianálisis Rapignost® Total-Screen L MATERIAL CM Alb Os Hb +++ +++ CZC r.c. r.c. r.o. r.c. r.m. r.m. r.c. blanco blanco v.c. v.m.c. blanco blanco g.o. m.c. blanco blanco Alb 15 s Hb CZC Alb 30 s Hb CZC Alb 60 s Hb CZC r.c. r.c. r.o. r.c. r.m. r.m. r.c. blanco blanco v.c. v.m.c. blanco blanco g.o. m.c. blanco blanco Alb 3=500 3=500 - 120 s Hb +++ +++ trazas + + + trazas CZC r.c. r.c. r.o. r.c. r.m. r.m. r.c. blanco blanco v.c. v.m.c. blanco blanco g.o. m.c. blanco sangre epitelial sangre muscular vino tinto salsa de chiles ketchup tomate frito ciruela roja clara de huevo leche acelga acelga (regenerado- 1/2) acelga (regenerado- 1/4) acelga (regenerado- 1/8) suelo sedimento AMR ADD r.m. r.c. r.o. r.m. r.o. r.m. r.c. a.m.c. blanco v.o. n.a. n.a. n.a. negro m.m. n.a. n.a. 3=500 3=500 3=500 3=500 - +++ +++ - - 3=500 100 - + trazas trazas 3=500 100 trazas - + trazas trazas - - - - r.c. r.c. r.o. r.c. r.m. r.m. r.c. blanco blanco v.c. v.m.c. blanco blanco g.o. m.c. blanco blanco 3=500 3=500 - +++ +++ - 3=500 100-3=500 trazas - + trazas trazas - - r.c. r.c. r.o. r.c. r.m. r.m. r.c. blanco blanco v.c. v.m.c. blanco blanco g.o. m.c. blanco blanco 3=500 3=500 - +++ +++ - 3=500 100-3=500 trazas - + trazas trazas trazas - 3=500 100-3=500 trazas - H 8- e - blanco Leyenda: CM = color de la mancha, Alb = albúmina, Hb = hemoglobina, CZC = color de la zona de compensación (control negativo de coloración), r.o. = rojo obscuro, r.m. = rojo medio, r.c. = rojo claro, a.m.c . = amarillo muy claro, g.o. = gris obscuro, m.m. = marrón medio, m.c. = marrón claro, v.c. = verde obscuro equivalente a Hb = +++, v.c. = verde claro equivalente a Hb = +, v.m.c. = verde muy claro equivalente a Hb = trazas, AMR = *agua mineral de la red , ADD = agua destilada desionizada (control negativo de solvente), n.a. = no aplicable, - = negativo. UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 9.5. Calibración de la estación meteorológica analógica TEM® 9.5.1. Generalidades La calibración fue realizada en el Departamento de Astronomía y Meteorología (anteriormente. Física de la Atmósfera, DFA) de la Facultad de Física de la Universidad de Barcelona, por parte de la Dra. Maria Rosa Soler, Profesora Titular de dicho departamento. La metodología utilizada fue la lectura simultánea y en el mismo lugar geográfico, de los valores atmosféricos en la estación meteorológica utilizada en el estudio (TEM) y en una sonda electrónica de temperatura y humedad relativa HMP35AC® (Campbell Scientific, Inc., Logan, EE.UU.) del DFA. Los resultados obtenidos fueron las ecuaciones de las rectas de regresión estadística (y = ax + b) para los valores de la TEM frente a los del DFA, cuyo interés práctico es poder estimar un valor de y (DFA) a partir de otro dado de x (TEM). 9.5.2. Características técnicas de la estación meteorológica TEM® El termómetro del aparato es de dilatación, en el cual la longitud de una columna de mercurio que está contenido en un tubo de vidrio graduado es función directa de la temperatura. El higrómetro es de absorción, en el que la longitud de la tira de material higroscópico, que está unida a una aguja indicadora, varía en función de la humedad relativa del aire. Los rangos de medición del aparato son de -12-+50 °C para el termómetro, y de 20-100% para el higrómetro. Sus respectivos límites de error son de ±0,5 °C para el termómetro, y ±0,5 % para el higrómetro. 9.5.3. Características técnicas de la sonda electrónica HMP35AC La temperatura es medida por un termistor, en el cual la resistencia eléctrica de un semiconductor es función inversa de la temperatura. La humedad relativa es medida por un sensor de capacitancia, en el cual las variaciones de la humedad relativa hacen variar las propiedades dieléctricas de una placa delgada de un polímero y, con ello, la capacitancia del sensor. La electrónica del instrumento mide la resistencia eléctrica y la capacitancia y las convierte, respectivamente, en valores de temperatura y humedad relativa. 247 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 9.5.4. Temperatura El error sistemático del aparato de medida TEM resultó seguir una única recta de regresión y/x respecto al instrumental del DFA a lo largo de todo el rango de temperatura del aire: RANGO 10 < t°C TEM < 40 ECUACIÓN y = 0,9954x - 1,0061 9.5.5. Humedad relativa El error sistemático del aparato de medida TEM resultó seguir tres rectas de regresión y/x distintas respecto al instrumental del DFA, en función de los rangos de humedad relativa del aire: RANGO HR%TEM<66 73 < HR% TEM 66 < HR% TEM < 73 ECUACIÓN y = 0,2857x +21,7143 y = 0,7778x + 18,6667 y = 4,7143x - 269,1432 248 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 9.6. Estimación de los valores climatológicos: valores corregidos (y) para las lecturas directas del aparato meteorológico utilizado en la sala de mantenimiento de las muestras de manchas de sangre (x) 9.6.1. Temperatura x -12 y -13 CONSIDERACIÓN METEOROLÓGICA* -11,5 -11 -12,5 -12 -10;5 -10 -11,5 -11 -9,5 -9 -10,5 -10 -9,5 -8,5 - 8 - 9 -7,5 -7 -8,5 -8 -6,5 -6 -7,5 -7 -5,5 -5 -6,6 -6 -4,5 -4 -5,5 -5 -3,5 -3 -4,5 -4 -2,5 -2 -3,5 -3 -1,5 -1 -2,5 -2 -0,5 O -1,5 -1 249 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 x y CONSIDERACIÓN METEOROLÓGICA* 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5 5,5 6 6,5 7 7,5 -0,5 0 0,5 1 W 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5 5,5 6 6,5 7 7,5 8 8,5 9 9,5 10 10,5 8 8,5 9 9,5 10 10,5 11 Temperatura media en invierno 11 11,5 12 12,5 11,5 13 13,5 12 12,5 14 14,5 13 13,5 14 15 15,5 14,5 15 Temperatura media en otoño 16 16,5 • 15,5 250 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 x 17 y CONSIDERACIÓN METEOROLÓGICA* 16 16,5 17 Temperatura media en primavera 17,5 18 18,5 17,5 19 19,5 18 18,5 20 20,5 19 19,5 21 21,5 20 20,5 22 22,5 21 21,5 23 23,5 22 22,5 24 24,5 23 23,5 24 Temperatura media en verano 25 25,5 24,5 25 26 26,5 25,5 27 27,5 26 26,5 28 28,5 27 27,5 29 29,5 28 28,5 30 30,5 29 29,5 31 31,5 30 30,5 32 32,5 31 31,5 33 32 251 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 "x y CONSIDERACIÓN METEOROLÓGICA* 33,5 34 32,5 33 34,5 35 33,5 34 35,5 36 34,5 35 36,5 37 35,5 36 37,5 38 36,5 37 38,5 39 37,5 38 39,5 40 38,5 39 40,5 41 39,5 40 41,5 42 40,5 41 42,5 43 41,5 42 43,5 44 42,5 43 44,5 45 43,5 44 45,5 46 44,5 45 46,5 47 45,5 46 47,5 48 46,5 47 48,5 49 47,5 48 49,5 48,5 252 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 CONSIDERACIÓN METEOROLÓGICA* 50 i 49 * Temperatura del aire en la localidad de mantenimiento de las muestras con manchas de sangre; según Ajuntament de Barcelona (1995): Barcelona. Guia de la ciutat. Barcelona: Ajuntament de Barcelona. 9.6.2. Humedad relativa x 20 y 27,5 CONSIDERACIÓN METEOROLÓGICA" Humedad relativa baja (ambiente seco) 20,5 21 27,5 27,5 28 28 28 21,5 22 22,5 23 28,5 28,5 28,5 28,5 29 29 29 23,5 24 24,5 25 25,5 26. 26,5 27 29,5 29,5 29,5 29,5 30 30 30 27,5 28 28,5 29 29,5 30 30,5 30,5 30,5 30,5 31 253 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 ~x 31,5 32 y 30,5 31 31 31 CONSIDERACIÓN METEOROLÓGICA* Humedad relativa baja (ambiente seco) 32,5 33 33,5 34 31,5 31,5 31,5 31,5 32 32 32 34,5 35 35,5 36 36,5 37 32,5 32,5 32,5 32,5 33 33 33 37,5 38 38,5 39 39,5 40 40,5 41 33,5 33,5 33,5 33,5 34 34 34 41,5 42 42,5 43 43,5 44 34,5 34,5 34,5 34,5 35 35 35 44,5 45 45,5 46 46,5 47 47,5 35,5 254 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 "x 48 y 35.5 CONSIDERACIÓN METEOROLÓGICA" Humedad relativa baja (ambiente seco) 48,5 49 35,5 35,5 36 36 36 49,5 50 50,5 51 36,5 36,5 36,5 36,5 37 37 37 51,5 52 52,5 53 53,5 54 54,5 55 37.5 37,5 37,5 37,5 38 38 38 55,5 56 56,5 57 57,5 58 38,5 38,5 38,5 38,5 39 39 39 58,5 59 59,5 60 60,5 61 61,5 62 39,5 39,5 39,5 39,5 40 Humedad relativa media (ambiente normal) 62,5 63 63,5 64 40 255 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 "x y CONSIDERACIÓN METEOROLÓGICA* 64,5 65 40 40,5 40,5 42 65,5 66 66,5 67 44,5 46,5 49 67,5 68 51,5 54 56 68,5 69 69,5 70 58,5 61 63 70,5 71 65,5 68 70 Humedad relativa alta (ambiente húmedo) 71,5 72 72,5 73 72,5 75 76 76 73,5 74 74,5 75 76,5 77 75,5 77,5 76 78 78 76,5 77 78,5 79 77,5 78 79,5 79,5 80 78,5 79 79,5 80 80,5 81 80,5 81,5 256 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 ~x 81 y 81.5 CONSIDERACIÓN METEOROLÓGICA* Humedad relativa alta (ambiente húmedo) 81,5 82 82 82,5 83 83 82,5 83 83,5 84 83,5 84 84,5 85 84,5 85 85 85,5 86 85,5 86 86,5 87 86,5 86,5 87 87,5 88 88,5 89 87,5 88 89,5 90 88,5 88,5 89 90,5 91 89,5 90 90 91,5 92 92,5 93 90,5 91 93,5 94 91,5 92 92 94,5 95 92,5 93 95,5 96 93,5 93,5 94 96,5 97 257 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 1 97,5 98 y 94,5 95 95 CONSIDERACIÓN METEOROLÓGICA* Humedad relativa alta (ambiente húmedo) 98,5 99 95,5 96 99,5 100 96,5 * Tipo de ambiente según especificación en el propio aparato meteorológico utilizado en el estudio. 258 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 9.7. Medidas meteorológicas de la sala de mantenimiento de las muestras de manchas de sangre Leyenda: A - substrato de asfalto C = medidas corregidas D = medidas directas (raw data) f = fin del mantenimiento G = substrato de grauvaca (H) = sangre humana (H?) = sangre supuestamente humana H. L. = hora local HR% = humedad relativa del aire, en tanto por ciento i = inicio del mantenimiento I = substrato de acero inoxidable L = substrato de caliza M = mes(es) O = substrato de obsidiana P = substrato de papel S = substrato de sílex (T) = sangre de tayasuino (pécari de collar) t°C = temperatura del aire, en grados Celsius /I = fragmento 1 12 = fragmento 2 H. L. FECHA t°C (D) 111289 141289 161289 201289 241289 291289 301289 050190 080190 120190 150190 180190 180190 200190 240190 17 HR% (D) t°C (C) HR% (C) COMENTARIO 16:10 07:25 74 73 77,5 16 12,5 14,5 14 76 75 79 83 77 75 78 iS(H)101289 13,5 15,5 15 17 17 01:20 19:55 21:20 19:35 13:45 17:00 22:10 15:40 22:45 83 75 iS(T)131289 16 16 16,5 73 76,5 17,5 18 15,5 77 73 77 73 72 72 72,5 73,5 17 14,5 78,5 75 17 17,5 16 16,5 78,5 75 70 70 15:35 19:25 20:35 17 19 16 17,5 18 16 15 16,5 259 72.5 15:30 76 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 H.L. FECHA t°C (D) HR% (D) t°C (C) HR%(C) COMENTARIO 21:00 270190 02:20 300190 15 19 78 75 72 72 14 79,5 77 70 18 17:50 050290 18:00 090290 19:10 12:40 21:35 140290 180290 240290 16,5 19 17 15,5 18 16 70 75,5 75,5 77 77,5 77,5 78,5 79,5 77 16,5 13 13 18 21 17 21 15,5 12 12 17 20 16 20 21 18 19:40 280290 07:25 020390 78,5 75 fS(H)101289 17:50 080390 22:20 120390 190390 74,5 70,5 72,5 71,5 70 75 76,5 63 17:55 72,5 68 17:30 220390 18:00 260390 18:10 310390 19:05 030490 17:45 18:55 130490 170490 22 19 20,5 61 77 81 76 iS(H)280390 19,5 17 20 22 21 26 21 24,5 24 27 18 21 23 22 27 22 80 73,5 68 73 51,5 75 76 60 56 00:30 250490 12:50 300490 14:15 050590 17:30 080590 19:55 080590 14:05 140590 73,5 70 69 67 25,5 25 47,5 54 28 27 27 21 28 68,5 67 68 17:10 230590 12:40 260590 18:55 310590 18:10 050690 17:35 13:55 120690 160690 26 26 20 27 25,5 46,5 51,5 44,5 40 ' 37 66,5 64 54 54 26,5 31 32 32 32 30 31 31 31 37 42 40,5 46,5 fS(T)131289/l iS(H) 170690 20:00 290690 66 65 67 15:00 300690 23:00 300690 260 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 H. L. FECHA t°C (D) HR% (D) t°C (C) HR% (C)COMENTARIO 14:00 070790 090790 120790 150790 210790 210790 240790 30 30 30 28 30 32 32 64 61 63 61 66 66 65 63 67 69 69 57 58 60 61 65 70 29 29 29 27 29 31 31 40 39 03:00 090790 10:00 06:15 39,5 39 42 42 20:00 14:30 15:00 15:00 fS(H) 170690-1 M iG(H) 180790 40,5 39,5 46,5 56 56 38 33,5 32 32,5 31 20:00 250790 05:30 280790 10:30 30,5 30 29,5 29 280790 040890 040890 150890 150890 190890 070990 080990 140990 140990 270990 290990 041090 271090 101190 111190 181190 181190 23:30 030890 01:15 10:00 15:30 23:15 21:45 12:30 00:15 12:30 33,5 33,5 32,5 32 31 1 32,5 32,5 31,5 38,5 39 39 31 30 29 40,5 61 68 fS(H)170690-2M 30 07:45 200890 29,5 28 27 26 30 30,5 71,5 71 72 72 71 71 28,5 27 26 25 29 29,5 65,5 70 70 09:00 080990 20:30 18:00 10:00 18:00 14:00 21:00 21:15 65,5 65,5 75 76 77 fS(H) 170690-3 M 27,5 27 24 24 23 73 74 26,5 26 23 23 22 20 75 69 70 70 78 75 76 75 10:15 061090 56 61 61 00:05 281090 21 18,5 20 21 21 17,5 19 20 20 79,5 77 00:30 21:00 78 77 261 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 H. L. FECHA t°C (D) HR% (D) t°C (C) HR%(C) COMENTARIO 10:30 22:15 231190 231190 16,5 16,5 16 16 74,5 73 15,5 15,5 15 15 76,5 75 02:45 241190 75,5 75 77 76 76 76 75 76 78 77,5 77 05:15 01:25 241190 251190 16,5 16,5 15,5 14 14 15 15 15 15 15 14 13 13 15 13 18 17 17 16 15 12 15 14,5 14 15 14 15 15,5 15,5 14,5 13 13 14 14 14 14 14 13 12 12 14 12 17 16 16 15 14 11 14 78,5 78 78 78 77 78 00:30 271190 21:15 271190 08:00 291190 11:00 021290 22:30 031290 10:15 051290 79.5 79 03:00 061290 77,5 78 80 79 79 77 80 80 10:05 01:25 12:15 05:00 06:45 071290 091290 111290 121290 151290 161290 301290 79,5 81 80 80 78,5 81 81 78 21:15 11:45 fS(T) 13 1289/2; fô(H)170690-6M 09:40 201290 76,5 79,5 80 75 75 01:20 010191 05:55 010191 80,5 81 77 77 00:15 18:15 11:00 12:35 15:25 09:25 040191 070191 130191 170191 180191 220191 260191 03:10 060191 74,5 76,5 77 78 76,5 78 13,5 13 14 13 14 78,5 79,5 79 iS(H)l 80191 77,5 79,5 79,5 79 21:15 01:10 80,5 80,5 80 82 00:00 310191 020291 14,5 14 13,5 13 22:00 020291 81,5 262 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 H. L, FECHA t°C (D) HR% (D) t°C (C) HR%(C) COMENTARIO 11:45 030291 130291 160291 170291 13,5 12 15 15 18 19 83 12,5 11 14 14 17 18 83 78 70 80 79 06:05 76,5 72 79 16:50 01:15 02:30 230291 77,5 74:5 72 21:30 240291 16:15 07:45 250291 280291 040591 76,5 70 79 77 ¡I(H)160391 19,5 17 20 18 18,5 16 19 17 77,5 75 00:10 18:00 03:30 00:00 16:50 050591 100591 110591 120591 120591 130591 140591 150591 150591 160591 170591 180591 190591 75,5 76,5 75,5 77,5 78 77,5 17,5 17 19 21 16,5 16 18 20 22 23 24 76.5 74 78 76 68 56 61 70 72,5 15:45 15:05 21:55 13:45 22:50 23 24 25 71,5 69 70 72 24,5 23 21 23,5 22 20 13:15 10:00 13:55 14:15 72,5 73.5 74 72 74 73 76 76 70 76 75 63 40 49 42 21,5 22 21 20,5 21 20 20 23 10:40 200591 09:35 22:50 210591 210591 21 24 70,5 64,5 67,5 18:30 220591 05:55 230591 25,5 23,5 27 28 28 24 26 27 24,5 22,5 26 27 14:00 230591 16:05 12:15 240591 250591 66 65 40,5 40,5 65,5 70 68 27 23 25 26 09:40 260591 61 17:30 260591 13:45 270591 51,5 44,5 66,5 263 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 H. L. FECHA t°C(D) HR% (D)t°C (C) HR%(C) COMENTARIO 11:20 280591 08:40 290591 25 23 25 25 25 25 27 70,5 72 69 71 70 72 24 22 24 63 70 56 16:45 300591 20:50 310591 24 24 24 26 65,5 61 70 63 76 70 72,5 17:30 010691 17:15 020691 16:20 030691 12:00 040691 22:15 02:20 040691 050691 70,5 74 72 25,5 25,5 25,5 26 26 26 24 24,5 24,5 24.5 25 72,5 72 12:10 060691 14:00 060691 17:15 060691 70 68 68 75 71,5 71,5 25 25 23 24,5 09:00 070691 22:45 070691 080691 73 25,5 27 28 28 28 28 29 28 29 29 72,5 69 67 68 65 68 64 72,5 56 18:45 26 27 27 27 27 28 27 19:00 090691 20:10 15:00 12:55 46,5 51,5 40,5 51.5 40 49 40 100691 110691 120691 130691 140691 140691 150691 150691 160691 170691 180691 180691 180691 200691 210691 19:05 00:45 67,5 64,5 61 64 18:55 18:00 23:00 28 28 39 40 ÍP(H?) 150691 28,5 29 26 25 25,5 25 27,5 28 25 24 18:35 21:00 03:00 65,5 66 40,5 42 54 40,5 49 68,5 65 13:15 22:00 24,5 24 67,5 71 73 68 15:15 02:45 25,5 25,5 28 24,5 24,5 27 65,5 75 11:00 220691 51,5 264 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 H. L. FECHA t°C (D) HR% (D) t°C (C) HR%(C) COMENTARIO 15:00 230691 23:45 230691 30 63,5 63,5 60 60 29 40 40 29,5 32 31 31 29 27,5 28,5 31 30 30 28 13:00 240691 21:15 19:15 250691 300691 22:00 260691 39 39 67,5 63 49 39,5 54 fS(H)l 70690- 12M 10:00 020791 11:00 040791 20:15 060791 14:55 070791 19:30 090791 14:40 11:45 100791 170791 68,5 65,5 64,5 57 57 59 26,5 27 29 30 32 33 30 28 30 31 33 34 31 40,5 40 38 38 38,5 49 40 67,5 64,5 64 62 15:00 230791 15:30 240791 16:40 260791 12:35 280791 00:05 300791 07:25 010891 20:55 020891 33,5 33,5 29 31 31 28,5 31 32,5 32,5 28 30 30 40 39,5 54 fí(H) 160391 68,5 72 66 70 42 27,5 30 66.5 64 66 44,5 40 42 40 13:15 060891 22:30 060891 34,5 33 33,5 32 19:10 070891 10:15 080891 13:00 080891 13:00 20:05 130891 130891 140891 170891 180891 300891 33,5 30,5 64,5 69,5 68 32,5 29,5 29 32 31 30 33 58,5 51,5 40 40 30 33 32 31 34 64,5 64 66 64 66 66 10:00 15:30 01:50 13:55 42 40 42 42 40 51,5 fP(H?) 150691 31,5 32 35 33 30,5 31 34 32 19:25 210891 12:10 010991 64,5 68 265 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 H. L. FECHA t°C(D) HR% (D) t°C (C) HR%(C) COMENTARIO 10:50 040991 30,5 30 31 30 30 32 30 29 29 25 68 67 29,5 29 30 29 29 51,5 iL(H)030991 11:10 070991 13:50 070991 16:40 22:45 17:25 46,5 40 64,5 65,5 72,5 65,5 70 72 140991 160991 180991 40,5 72,5 40,5 61 70 54 40 3.1 29 28 28 24 21:00 210991 10:00 230991 01:15 21:10 13:35 02:45 240991 68,5 64,5 65,5 75,5 71,5 74 70 70,5 22:10 280991 011091 051091 081091 101091 141091 181091 191091 231091 25,5 24,5 22,5 27,5 24 22 22 24,5 23,5 21,5 26,5 23 21 40,5 77,5 68 76 61 63 70 16:30 01:00 07:30 09:40 72 71 75 21 17,5 16:10 13:00 18,5 19 22 21 21 20 65,5 77 11:00 261091 291091 18 21 69,5 77 58,5 78,5 44,5 22:30 021191 20 20 19 18 18 15:30 061191 16:00 081191 18:05 11:50 02:05 141191 171191 191191 66,5 68 71 71 74 75 51,5 65,5 65,5 76 77 76 19 19 18,5 15 14 19 18 17,5 14 13 18 17 01:00 221191 10:20 251191 15:15 291191 73,5 79,5 80 80,5 81 11:30 301191 10:30 031291 18:35 21:05 071291 111291 16,5 15 80,5 77,5 84 15,5 14 81,5 79 84 13,5 12,5 266 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 H. L. FECHA t°C (D) HR% (D) t°C (C) HR%(C) COMENTARIO 12:30 20:15 23:55 22:45 141291 141291 161291 231291 261291 271291 100192 120192 160192 14 14,5 81 83 82 73 74 77 76 79 75 76 78 76 79 76 79 76 76 76 73 79 74.5 78 13 81,5 83 13,5 14 17 16 13 11 13 15 18 17 14 12 14 82,5 75 76 fS(H)l 70690- 18M 12:45 07:35 08:40 78.5 78 80 77 78 21:05 23:50 14,5 14 13,5 13 11 17 14 16 21:05 210192 11:20 230192 14:20 10:30 13:45 12:00 12:30 16:45 17:00 15:00 10:40 13:10 19:40 01:10 00:25 20:35 260192 270192 280192 290192 040292 090292 120292 160292 190292 190292 240292 250292 290292 080392 110392 120392 170392 170392 200392 240392 12 18 15 17 79,5 78 80 78 14,5 13,5 16 16 17 19 13 16 80 78 78 78 75 fG(H) 1 80790; fS(H) 180191 17 17 18 20 14 17 80 76,5 79,5 00:45 210292 13,5 15 15 17 12,5 14 14 76,5 78 78 80 82 79 78 79,5 81 16 15 18:10 050392 21:00 08:35 16 18 19 17 23 21 21 21 82.5 80 17 18 16 22 20 20 20 79,5 79,5 70 76 76 49 78,5 72 11:50 19:20 13:50 16:35 73,5 73,5 67,5 267 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 H. L. FECHA t°C (D) HR% (D) t°C (C) HR%(C) COMENTARIO 10:45 280392 060492 100492 100492 120492 160492 180492 250492 18 18 70 17 61 68 70 01:10 010492 19:35 11:10 13:40 03:10 12:40 01:45 71,5 72 17 19,5 20 21 18,5 19 20 75,5 70,5 73,5 70 77,5 63 76 61 68 68 56 20,5 22 19,5 21 18 22 24 23 20 23 26 25 25 28 19 23 25 24 21 24 27 71,5 71,5 69 68 23:10 200492 13:45 20:45 290492 51,5 76 75 42 42 54 12:50 020592 11:15 12:15 19:10 12:00 18:55 00:05 060592 090592 110592 140592 170592 180592 240592 270592 73.5 73 66 66 26 26 29 68,5 62 64 70 39,5 40 61 68 28,5 25,5 26 28 27,5 27 25 27,5 24,5 25 27 13:00 200592 17:45 18:15 71,5 67 70 70 73 46.5 61 61 75 49 68 75 61 61 56 58,5 16:45 300592 22:20 310592 14:05 26,5 26 24 25 21 21 010692 15:20 040692 11:30 070692 00:05 02:30 110692 140692 160692 160692 160692 170692 170692 26 22 22 25 67,5 71,5 73 70 70 69 24 26 27 26 28 28 01:30 16:20 23:30 27 28 27 29 29 69,5 65 65 13:25 16:30 40,5 40,5 268 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 H.L. FECHA t°C(D) HR% (D)t°C (C) HR%(C) COMENTARIO 22:40 1 70692 180692 29 27 23 68 70 72 72 63 28 26 22 51,5 61 fS(H)170690-24M 11:50 11:35 220692 00:35 240692 70 70 24,5 29,5 29,5 23,5 28,5 28,5 26,5 27 13:00 270692 21:05 280692 39,5 40 63,5 67 15:20 020792. 27,5 22:20 030792 46,5 49 68 68 44,5 28 67,5 71,5 71,5 66,5 63 62 60 62 67 20:15 050792 22:05 080792 120792 150792 180792 200792 230792 26,5 27 29 31 32 32 32 32 34 34 31 25,5 26 28 30 31 31 31 31 33 33 30 17:15 18:05 19:45 22:30 39,5 39,5 39 16:05 39,5 46,5 40 39 68 61 01:45 260792 01:20 280792 20:30 280792 63,5 60,5 71,5 70 00:30 010892 10:05 040892 09:35 090892 31,5 30 30 30 30,5 29 29 29 69,5 65,5 66 71 58,5 40,5 42 14:35 090892 20:20 09:40 120892 150892 1 80892 230892 27,5 32 31 33 26,5 31 30 32 29 29 27 25 29 29 65,5 56 13:25 22:55 69 67 62 46,5 39,5 38,5 40 68 76 40 56 12:00 250892 22:15 19:25 09:00 310892 30 30 28 26 30 30 58,5 64,5 71,5 18:30 040992 080992 120992 120992 130992 73,5 64 69 13:45 12:55 269 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 H. L. FECHA t°C(D) HR% (D) t°C (C) HR%(C) COMENTARIO 20:05 160992 190992 28,5 27 28 27 72 74 67 72 27,5 26 27 26 70 76 12:15 12:30 13:05 240992 260992 46,5 70 19:20 280992 21:10 011092 07:30 051092 20:20 081092 121092 181092 181092 25,5 26,5 23 62,5 71 71 24,5 25,5 22 39,5 65,5 65,5 68 75 77 21,5 21,5 19,5 20 20 71,5 73 75 20,5 20,5 18,5 19 19 10:05 09:25 19:35 69,5 76 74 73 77 75 58,5 78 76 75 19:50 201092 00:45 241092 02:50 291092 19,5 22,5 20,5 20 21 20 20 20 19 20 18 19 15,5 18 17 18,5 21,5 19,5 19 20 19 19 19 18 19 17 18 19:30 311092 78,5 77 19:50 051192 19:10 081192 11:Í5 23:00 141192 161192 231192 74,5 74,5 72,5 72,5 75 75 74 76,5 76,5 72,5 72,5 77 77 76 21:00 23:05 251192 22:00 301192 08:35 051292 07:25 071292 74,5 73,5 74,5 79 80 76,5 76 17:20 14:00 23:35 121292 151292 181292 241292 14,5 17 16 17 76,5 80 81 82 78 21:10 201292 19:45 19:20 271292 18:40 281292 16:40 311292 16:50 050193 18 17,5 17 81,5 76,5 78,5 72,5 77,5 16,5 16 15 16 79,5 72,5 79 iO(H)281292 15,5 15 14,5 14 270 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 H. L. FECHA t°C (D) HR% (D) t°C (C) HR%(C) COMENTARIO 19:00 ' 050193 17:55 05:30 090193 150193 170193 210193 13,5 17 16 78,5 74,5 78 77,5 12,5 16 15 79,5 76,5 79,5 79 68 21:50 17:45 16,5 17,5 19 17 17 15,5 16,5 18 16 16 71,5 71 74 74,5 14:00 240193 13:25 280193 65,5 76 19:20 030293 07:35 110293 140293 170293 200293 76,5 79,5 76,5 77,5 61 16,5 20 78 15,5 19 12:25 19:55 13:45 74,5 75.5 70 17,5 21 17 15 13 12 17 18 18 23 21 21 20,5 16,5 20 16 14 12 11 16 17 17 22 20 20 17:00 240293 10:20 280293 21:25 19:15 09:55 010393 020393 070393 130393 170393 69,5 78 78 58,5 79,5 79,5 80,5 78 79,5 76 00:15 08:30 75,5 80 68 76 74 77,5 81 14:50 200393 21:25 22:15 09:40 230393 070493 110493 120493 180493 51,5 78 76 78 63 61 75 61 68 76,5 70,5 70 19,5 21 15:10 14:10 22 22 22 21 21 19 25 21 21 21:30 210493 18:55 250493 20:40 280493 73 70 71,5 77 20 20 18 24 10:30 010593 22:20 170593 230593 300593 310593 78,5 44,5 58,5 51,5 46,5 66,5 69,5 68 67 15:35 02:05 25,5 27 24,5 26 27 12:45 28 271 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 H. L. FECHA t°C(D) HR% (D) t°C (C) 030693 060693 120693 160693 080698 110500 130500 170500 1 80500 200500 210500 210500 220500 220500 230500 HR%(C) COMENTARIO 22:30 26,5 69 67 65,5 25,5 56 46,5 40,5 42 fS(H)170690-36M 11:45 00:15 20:45 20:35 27 27 28 27 25 24 27,5 26 26 27 26 24 23 26,5 66 69,5 58,5 17:40 06:20 20:50 72 73 69 69 73 74.5 70 75 56 56 75 11:10 10:25 13:10 20:35 09:05 27 23,5 26 22,5 22 23 23,5 76,5 76 76 74 74 74,5 75,5 22,5 23 23,5 22 22,5 18:50 10:10 76,5 77,5 fS(H)280390; fL(H)03099 1 ; fO(H)281292 23 22 272 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Tablas ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 9.8. Graduación del papel brillante Brovira-Speed B 310 PE utilizado en la realización de positivos de electromicrografías C.A. BEW C.G. G.D. G.C. I.P. 0 1 2 3 4 . extra-suave mínimo suave especial normal duro extra-duro cuasi-mínimo medio-bajo medio-alto cuasi-máximo máximo * 5,3 14,4 12,0 13,9 22,4 BW BS BN BH BEH 5 Leyenda: C.A. = código alfabético, C.G. = código de grado, G.D. = grado de dureza. G.C. = grado de contraste. I.P. = índice predeterminado del fotómetro-temporizador Sixtolab®. *No utilizado en el Laboratorio de Electromicrografia (SCT-UB) debido a su poco contraste. 273 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 10. ADDENDUM UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 10.1. La Ciencia Como toda esfera de la actividad humana, la Ciencia (del lat. scientia, saber) posee un objeto, y un método para alcanzarlo. El objeto de la Ciencia es el conocimiento objetivo de la realidad (conocimiento científico), para alcanzar el cual se vale de un método propio (método científico). Para Bunge (1983), el conocimiento objetivo es "la experiencia intersubjetiva (transpersonal)", mientras que la realidad es "lo que existe en algún lugar del continuo espacio temporal de cuatro dimensiones". Sierra Bravo (1988) define la Ciencia como "un conjunto sistemático de conocimientos sobre la realidad observable, obtenidos mediante el método científico". Para Bunge (1983), la Ciencia es "un estilo de pensamiento y acción", tendente a construir reproducciones conceptuales de las estructuras de los hechos (teorías), que serían conjuntos de modelos contingentes (parciales y no infalibles) de la realidad. Por su parte, Poincaré (1854-1912) había definido la Ciencia como "una clasificación, un modo de relacionar hechos que las apariencias separan, aunque estén ligados por algún parentesco natural y oculto" o, más resumidamente, "un sistema de relaciones" (Poincaré 1964). Cada ciencia particular se caracteriza por tener un objeto material (aquello que estudia; p. ej. la sangre) y un objeto formal (aspecto desde el que lo estudia; p. ej. el aspecto histológico, genético, bioquímico, etc.); así, cada ciencia particular sería una disciplina que utiliza el método científico con la finalidad de hallar en su objeto material estructuras generales (leyes) referentes a su objeto formal. Siguiendo el modelo de las ciencias naturales, Eco (1982) considera que una investigación científica debe cumplir los cuatro requisitos siguientes: 1. Versar sobre un objeto -físico o intelectual- reconocible y definido de tal modo que también sea reconocible por los demás. Definir el objeto significa definir las condiciones bajo las cuales podemos hablar en base a unas reglas que nosotros mismos estableceremos o que otros han establecido antes que nosotros. 2. Decir sobre este objeto cosas que todavía no han sido dichas o bien revisar con óptica diferente las cosas que ya han sido dichas. 3. Ser útil a los demás. Es decir, añadir algo a lo que la comunidad ya sabía y que deberá ser tenido en cuenta por todos los trabajos futuros sobre el tema. 4. Suministrar elementos para la verificación y la refutación de las hipótesis que formula. Esto significa presentar pruebas e indicar cómo se ha procedido para hacer el hallazgo, 275 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 cómo habría que proceder para hacer otros y qué tipo de hallazgo refutaría la hipótesis formulada. 10.2. El conocimiento científico El conocimiento es un proceso de relación entre un sujeto cognoscente (aquel que conoce), un objeto de conocimiento (aquello que se trata de conocer) y determinadas estructuras lógicas: el concepto (cuya forma lógica es el término), el juicio (cuya forma lógica es la proposición) y el razonamiento (cuya forma lógica es la inferencia). El conocimiento científico es el conocimiento objetivo que se obtiene mediante los procedimientos del método científico. El término "conocimiento objetivo" no implica conocimiento absoluto o permanente, sino el conocimiento actual más digno de confianza, cuyo contenido cambia a medida que la investigación científica avanza y cambia; así, una teoría que coincide con hechos ya conocidos es siempre adecuada para sugerir la existencia de hechos aún no observados ni sospechados y para promover su investigación (Ford 2000; Hull 1981). En el proceso diacrónico de organización, en forma de teoría, de un conocimiento científico determinado, Lain Entralgo (1970) distingue cinco momentos: 1. El momento intuitivo o de realidad. Aquel en virtud del cual la teoría en cuestión expresa científicamente una experiencia directa del mundo real. Su temporeidad consiste en el paso de un "ahora" -el correspondiente a la percepción en que nace esa experiencia- a un "siempre" hipotético o condicional. 2. El momento conceptivo o de objetividad. Aquel por el cual la experiencia inmediata del mundo real y las creaciones intelectuales a ella subsiguientes se elevan a conceptos. Lo que era "objetual" se convierte así en "objetivo". Su temporeidad es el paso del "ahora" de la concepción a un "siempre" también hipotético o condicional. 3. El momento constructivo o de estructura. Aquel que otorga orden interno y figura a la teoría de que se trate. Su temporeidad es semejante a la anterior. 4. El momento interpretativo o de sentido. Aquel en que se manifiesta lo que la teoría significa, dentro del pensamiento de su creador, tanto para su persona singular como para el género humano, en cuanto aquella es declaración científica de una parcela de la realidad. Su temporeidad consiste en el paso del "ahora" del autor al "ahora" de quien más tarde descubre y comprende la interpretación. 276 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 5. El momento posesivo o de arraigo. Aquel que determina y mide la real implantación de la verdad de esa teoría en la personal existencia de quien la crea o la conoce. Su temporeidad propia es el paso del "ahora" de la posesión a un "siempre" absoluto que unas veces se juzgará posible y esperable y otras será tenido por imposible y absurdo. El conocimiento científico se organiza mediante la inferencia. La inferencia es el paso de un conjunto de proposiciones a otro; el primer conjunto puede llamarse la clase de las premisas, y el segundo la clase de las conclusiones (Bunge 1983; Vélez Cantareu 1960). Para la Lógica Formal sólo puede admitirse un tipo de inferencia (inferencia deductiva); la Lógica Material admite dos tipos de inferencia (deducctiva e incoada). El método científico depende de los dos tipos de inferencia de la Lógica Material: la deductiva o deducción, proceso que va de lo general a lo particular por medio del análisis (división del todo en sus partes) y la incoada o inducción, proceso inverso que va de lo particular a lo general por medio de síntesis (reunión del todo a partir de sus partes); combinando ambos tipos de inferencia, se pasa de la observación a la formulación de hipótesis (suposiciones), así como de la experimentación al establecimiento de tesis (postulados). En función de si se trata de una ciencia formal o experimental, en su aplicación del método científico predominará la deducción (Lógica, Matemáticas) o la inducción (Física, Química, Biología, Geología). 10.2.1. Inferencia deductiva 10.2.1.1. Generalidades La inferencia deductiva (silogismo) consiste en derivar enunciados, no de la observación de la realidad, sino de otros enunciados previamente formados. La inferencia deductiva se caracteriza porque en ella las conclusiones se derivan necesariamente de las premisas, y está formada por tres enunciados o proposiciones: premisa mayor, premisa menor y conclusión. Una de las tres proposiciones puede omititirse -por sobreentenderse-, quedando un silogismo abreviado denominado entimema (Rivano 1964). La inferencia deductiva es lógicamente válida y necesaria (las conclusiones se derivan necesariamente de las premisas). Entre los tipos más corrientes de inferencia deductiva están la sustitución (el cambio de variables), la separación (modus ponens) y la reyección (modus tollens), la ejemplificación y la generalización, además de gran número de esquemas de 277 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 inferencia específicos (no universales), como los que se usan en el cálculo aritmético. Cuando una inferencia deductiva válida parte de premisas que se consideran verdaderas o aceptadas por convención, la inferencia se llama una demostración (Bunge 1983). Dado que el silogismo pretende ser concluyente, se han formulado un conjunto de reglas para garantizar su legitimidad (reglas generales del silogismo), que son las ocho siguientes (Rivano 1964): 1. Un silogismo tiene tres y sólo tres términos. Esta regla resulta de la propia definición del silogismo. 2. El silogismo consta solamente de tres proposiciones. 3. El termino medio debe estar, una vez al menos, aplicado en toda su extensión (es decir, distribuido). Puesto que los extremos se relacionan entre si por la intervención del medio, no es necesaria ninguna conclusión cuando la relación de ambos extremos cae sobre una parte solamente del término medio. La parte del medio con que se relaciona un término puede no ser la misma con que se relaciona el otro, por lo cual no podemos concluir una relación entre ellos. Se exige, pues, la distribución del término medio. 4. Ningún término puede tener en la conclusión más extensión que en las premisas. Su trasgresión implicaría que hemos ido más allá de las premisas y que el silogismo no es válido por sí mismo; sería el caso de la inferencia incoada. 5. Nada se concluye de premisas negativas. En ellas o excluimos ambos extremos del medio, o el medio de ambos extremos, o un extremo del medio y el medio del otro extremo. Es fácil ver que no hay relación entre los extremos que pueda concluirse. Dicho de otra manera: las premisas negativas sólo establecen exclusiones; de lo cual no puede concluirse ni afirmativa ni negativamente. 6. Si una premisa es negativa la conclusión lo es asimismo. Porque un término está en relación de exclusión con el término medio; luego, no puede relacionarse de otra manera con el segundo. Esta regla, tiene recíproca, es decir: si la conclusión es negativa una premisa debe serlo. 7. De premisas particulares nada se infiere. La única premisa particular que distribuye un término es negativa. Este término distribuido debe ser el medio (regla 3.). La conclusión debe ser negativa (regla 6). Luego, el término mayor debe estar distribuido, lo que es imposible por hipótesis. 278 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 8. Si una premisa es particular la conclusión es también particular. Se prueba, también, mediante las reglas anteriores. Una premisa debe ser particular y la otra universal (regla 7). Si son ambas positivas sólo hay un término distribuido que debe ser el término medio (regla 3). Luego la conclusión es particular (regla 4). Si una es negativa y la otra positiva la conclusión debe ser negativa (regla 6); luego, el término mayor debe estar distribuido en la premisa. Además, debe estarlo el término medio (regla 3). Supongamos que la universal es negativa. La otra ha de ser particular afirmativa; luego, la conclusión debe ser particular (regla 4). Supongamos que la particular es negativa; también en este caso la conclusión es particular. Existen tres tipos fundamentales de silogismo, para describir los cuales nos basaremos en Rivano (1964) y Vélez Cantareu (1960). 10.2.1.2. Tipos fundamentales de inferencia deductiva 10.2.1.2.1. Silogismo categórico Es de la forma "todo/algún/ningún (tal) es/no es (cual)". Sus enunciados son simples (con un solo sujeto y predicado) y categóricos (es decir, afirmativos o negativos). Asimismo, el conjunto de sus enunciados está formado por tres términos: el sujeto (S) o término menor, el término medio (M) y el predicado (P) o término mayor. Las dos premisas deben contener M, y la conclusión solo S y P. Las premisas integran el antecedente, y la conclusión es el consecuente. Se denominan figuras del silogismo categórico las disposiciones que resultan del lugar ocupado por el término medio en las premisas: M-P/S-M, P-M/S-M, M-P/M-S, o PM/M-S. Se denominan modos del silogismo categórico las disposiciones que resultan del alcance cuantitativo de las proposiciones: todo, una parte, o nada. Aunque matemáticamente el número de combinaciones de figuras y modos sea 64, solo 19 de estas combinaciones son legítimas, al no vulnerar las reglas generales del silogismo. Si nos ceñimos a la combinación de la primera figura (sub-prae) con su primer modo (Barbara), tenemos: (premisa mayor) (premisa menor) (conclusión) Todo M es P S es M Luego S es P 279 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Ejemplo ad hoc: M = GRS, S = esta mancha, y P = sangre: Todo GRS es sangre, Esta mancha es de GRS, Luego esta mancha es sangre. 10.2.1.2.2. Silogismo hipotético Es de la forma "si (tal), entonces (cual)", es decir, con un enunciado condicional como premisa mayor. Una de las premisas es el antecedente, la otra el condicional y la conclusión el consecuente. Esta clase de razonamiento deductivo tiene una gran importancia en la Ciencia, porque es la que se usa para derivar consecuencias específicas de principios o hipótesis, que después se contrastan con la realidad. Puede adoptar dos formas válidas: A. Modus ponendo ponens Si p, entonces q pes Luego q es B. Modus tullendo tollens Si p, entonces q q no es Luego p no es Ejemplos ad hoc: p = observar GRS, q = observar sangre: Modus ponendo ponens Si observamos GRS, entonces observamos sangre Observamos GRS Luego observamos sangre Modus tollendo tollens Si observamos GRS, entonces observamos sangre No observamos sangre Luego no observamos GRS 280 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 10.2.1.2.3. Silogismo disyuntivo Es de la forma "o (tal) o (cual)" o bien "no (tal) y (cual) a la vez", es decir, con un enunciado disyuntivo como premisa mayor. Su forma en modus (oliendo ponens es: S es o p o q S no es p Luego S es q S no es p y q a la vez S no es p Luego S es q Ejemplos ad hoc: p = nucleado, q = mamífero, y S = este GRS: te GRS es o nucleado o de mamífero te GRS no es nucleado Luego este GRS es de mamífero Este GRS no es nucleado _y de mamífero a la vez Este GRS no es nucleado Luego este GRS es de mamífero 10.2.2. Inferencia incoada ¡0.2.2.1. Generalidades La inferencia incoada consiste en derivar enunciados, no de otros enunciados previamente formados, sino de la observación de la realidad. En la inferencia incoada, las conclusiones se derivan probablemente de las premisas; es decir, no tienen carácter necesario sino únicamente probable (probabilidad lógica), por lo que son lógicamente no válidas, pero sí plausibles. Aísa Moreu (1997), bajo el nombre de "razonamiento inductivo", la define como "un argumento ampliativo, aquel cuya conclusión va más allá de las premisas, cuya conclusión, por tanto, no se deduce lógicamente de ellas" y que "puede ir del pasado al futuro, de lo particular a lo general, de lo particular a lo particular, etc."; en nuestro caso podríamos añadir que también puede ir del presente al pasado, como acontece en la Actuopaleontología o la Medicina Forense Criminalística y que se halla subyacente en el Principio del Actualismo de Lyell ("el presente es la clave del pasado") y en el Principio de Intercambio de Locard ("todo contacto deja huellas"). Aunque la Lógica Formal no la admita dentro del razonamiento, la inferencia incoada es aplicada frecuentemente en la investigación científica, siendo el objeto formal de la Lógica Inductiva (Bunge 1983). Existen dos tendencias principales en Lógica Inductiva: la probabilística o de la inducción enumerativa pascaliana (p. ej., Carnap 1950), cuya sintaxis se 281 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 ajusta al cálculo de la probabilidad matemática, y la neoclásica o de la inducción eliminativa baconiana (p. ej., Cohén 1977), cuya sintaxis se ajusta al cálculo de la probabilidad lógica. Según Bunge (1983), el papel de la inferencia incoada en la Ciencia es el siguiente: 1. Se presenta en la formulación de proposiciones de nivel bajo, tanto en el conocimiento ordinario cuanto en la ciencia. 2. Da a veces lugar a la conjetura de hipótesis de nivel alto. 3. Especialmente junto con las formas de inferencia deductiva, se presenta en las inferencias practicadas para contrastar hipótesis y teorías. Existen diez tipos fundamentales de inferencia incoada, para describir los cuales nos basaremos en Bunge (1983). 10.2.2.2. Tipos fundamentales de inferencia incoada 10.2.2.2.1. Analogía sustantiva Es la semejanza de componentes: a es />/, P2,..., Pn b es P,, P2,..., Pn-i Luego es probable que b sea Pn Ejemplo ad hoc: a = preservación de GRS sobre sílex, b - preservación de GRS sobre caliza, y P\ — 1 año, P2 = 4 años, Pn..¡ = 1 años, Pn= 10 años: Hubo preservación de GRS sobre sílex tras 1 año, 4 años, 7 años y 10 años, Hubo preservación de GRS sobre caliza tras 1 año, 4 años y 7 años, Luego es probable que haya también preservación de GRS sobre caliza tras 10 años. 10.2.2.2.2. Analogía estructural Es la semejanza de forma: aesPi,P2,...Pn-i b es P,, P2,... /V/ Luego es probable que a y que b sean también Pn 282 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Ejemplo ad hoc: a = GRS del cerdo, b = GRS del pécari, y PI = bicóncavo, circular, Pn-i = 6,0 (am de diámetro medio, Pn = VSG: Los GRS del cerdo son bicóncavos, circulares y de 6,0 um de diámetro medio, Los GRS del pécari son bicóncavos, circulares y de 6,0 jam de diámetro medio, Luego es probable que los GRS del pécari y del cerdo tengan también la misma VSG. 10.2.2.2.3. Inducción de primer grado Es la que va de los ejemplos a una generalización de nivel bajo: a,, a2,... an-i es P b es an Luego es probable que b sea también P Ejemplo ad hoc: a¡ = mancha de sangre sobre sílex, 02 — mancha de sangre sobre obsidiana, an-i - mancha de sangre sobre caliza, an = mancha de sangre sobre grauvaca, b muestra, P = preservación de GRS: Las manchas de sangre sobre sílex, obsidiana y caliza mostraron preservación de GRS, Esta muestra es una mancha de sangre sobre grauvaca, Luego es probable que esta muestra también muestre preservación de GRS. ¡0.2.2.2.4. Inducción de segundo grado Es la que va de generalizaciones de nivel bajo a generalizaciones de nivel más alto: a/, a?, ... an es P a,, a2, ... an es Q Luego es probable que todo Q sea P Ejemplo ad hoc: ai = hombre, 02 - pécari, an = gacela, P ~ preservación de GRS en manchas de sangre, Q — mamífero: Hombre, pécari y gacela mostraron preservación de GRS en manchas de sangre, Hombre, pécari y gacela son mamíferos, Luego es probable que todo mamífero muestre preservación de GRS en manchas de sangre. 283 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 ¡0.2.2.2.5. Generalización estadística Es la inferencia de la muestra a la población: La frecuencia relativa observada de P en una muestra a de la población A es/ a es una muestra al azar de la población A Luego la frecuencia relativa esperada de P en la población A es aproximadamente/ Ejemplo ad hoc: a = cien primeras herramientas líticas recuperadas en la excavación = 100, A = total de herramientas líticas recuperadas en la excavación = 2000,/= herramientas del conjunto a manchadas de sangre/a = 5/100 = 0,05 = 5%, P - herramienta manchada de sangre: La frecuencia relativa observada de herramientas manchadas de sangre en la muestra de las cien primeras herramientas del total de 2000 es 5%, Las cien primeras herramientas líticas recuperadas en la excavación es una muestra al azar de la población total de 2000, Luego la frecuencia relativa esperada de herramientas manchadas de sangre del total de 2000 es aproximadamente 5%. 10.2.2.2.6. Especificación estadística Es la inferencia de la población a la muestra: La frecuencia relativa observada de P en la población A es/ a es una muestra al azar de la población A Luego la frecuencia relativa esperada de P en a es aproximadamente/ Ejemplo ad hoc: a = doscientas últimas herramientas líticas recuperadas en la excavación = 200, A = total de herramientas líticas recuperadas en la excavación = 2000,/= total de herramientas manchadas de sangre/A = 100/2000 = 0,05 = 5%, P = herramienta manchada de sangre: La frecuencia relativa observada de herramientas manchadas de sangre en la población total de 2000 es 5%, Las doscientas últimas herramientas líticas recuperadas en la excavación es una muestra al azar de la población total de 2000, Luego la frecuencia relativa esperada de herramientas manchadas de sangre en las doscientas últimas herramientas es aproximadamente 5%. 284 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 10.2.2.2.7. Modus Ponens débil Es la separación débil del consecuente en base a una afirmación débil del condicional y/o el antecedente: Esquema 7a Si/?, entonces q p es verosímil q es verosímil Esquema 7b "Si/?, entonces q" es verosímil p es q es verosímil Esquema 7c "Si/?, entonces q" es verosímil p es verosímil q es verosímil Esquema 7a: p = observar GRS, q = observar sangre: Si observamos GRS, entonces observamos sangre Es verosímil que estemos observando GRS Luego es verosímil que estemos observando sangre Esquema 7b:p = observar una mancha de sangre, q = observar GRS preservados: Es verosímil que si observamos una mancha de sangre, entonces observemos GRS preservados, Estamos observando una mancha de sangre, Luego es verosímil que observemos GRS preservados. Esquema 7c: p = observar una mancha de sangre, q - observar GRS preservados: Es verosímil que si observamos una mancha de sangre, entonces observemos GRS preservados, Es verosímil que estemos observando una mancha de sangre, Luego es verosímil que observemos GRS preservados. 10.2.2.2.8. Modus Tollens débil Es la recusación débil del antecedente en base a afirmación fuerte o débil del condicional y negación débil o fuerte del consecuente: Esquema 8a Sip, entonces q no q es verosímil no p es verosímil Esquema 8b "Si/?, entonces q" es verosímil no q no /? es verosímil Esquema 8c "Si/?, entonces q" es verosímil no q es verosímil no p es verosímil 285 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Ejemplos ad hoc Esquema 8a: p — observar GRS, q = observar sangre: Si observamos GRS, entonces observamos sangre Es verosímil que no estemos observando sangre Luego es verosímil que no estemos observando GRS Esquema 8b:p = observar una mancha de sangre, q = observar GRS preservados: Es verosímil que si observamos una mancha de sangre, entonces observemos GRS preservados, No observamos GRS preservados, Luego es verosímil que no estemos observando una mancha de sangre. Esquema 8c: p = observar una mancha de sangre, q = observar GRS preservados: Es verosímil que si observamos una mancha de sangre, entonces observemos GRS preservados, Es verosímil que no estemos observando GRS preservados, Luego es verosímil que observemos una mancha de sangre. 10.2.2.2.9. Reducción fuerte Es la afirmación débil del antecedente en base a afirmación del consecuente: Si p, entonces q p es verosímil Ejemplo ad hoc: p = observar GRS, q = observar sangre: Si observamos GRS, entonces observamos sangre Observamos sangre Luego es verosímil que observemos GRS 10.2.2.2.10. Reducción débil Es la afirmación débil de antecedente en base a afirmación del consecuente y afirmación fuerte o débil del condicional: 286 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Esquema 10a Si/? entonces q q es verosímil p es verosímil Ejemplos ad hoc Esquema I Ob "Si/?, entonces q" es verosímil q p es verosímil Esquema lOc "Si/?, entonces q" es verosímil q es verosímil p es verosímil Esquema 10a: p = observar GRS, q = observar sangre: Si observamos GRS, entonces observamos sangre Es verosímil que estemos observando sangre Luego es verosímil que estemos observando GRS Esquema 10b: p - presentar restos de sangre una herramienta lítica, q - presentar huellas de uso una herramienta lítica: Es verosímil que si una herramienta lítica presenta restos de sangre, entonces presente huellas de uso, Esta herramienta lítica presenta huellas de uso, Luego es verosímil que esta herramienta lítica presente restos de sangre. Esquema Wc: p = presentar restos de sangre una herramienta lítica, q = presentar huellas de uso una herramienta lítica: Es verosímil que si una herramienta lítica presenta restos de sangre, entonces presente huellas de uso, Es verosímil que esta herramienta lítica presente huellas de uso, Luego es verosímil que esta herramienta lítica presente restos de sangre. 10.3. El método científico El método científico es el procedimiento para situar el conocimiento dentro de un esquema lógico, por lo que es estudiado por el subcampo de la Lógica Material denominado Metodología (Ford 2000; Vélez Cantareu 1960). El postulado básico del método científico es el Principio de Objetividad de la Naturaleza, que niega la validez de toda interpretación de los fenómenos dada en términos de causas finales ("proyecto") (Monod 1981). Podemos modelizar el método científico en las ciencias experimentales como una secuencia de cuatro etapas, donde, en un proceso de flujo positivo de retroalimentación 287 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 (feedback), cada una ellas es consecuencia de la inmediatamente anterior o bien de cualquiera de las posteriores, debiendo conducir a la inmediatamente posterior o bien a cualquiera de las anteriores (Fig. 15). »• ObservaciónI i Hipótesis men — Experimentación I; Tesis _ It Figura 15. Modelo y diagrama de flujo del método científico en las ciencias experimentales. Basándonos en Bunge (1983), podemos describir las cuatro etapas del método científico en las ciencias experimentales del siguiente modo: 1. Observación. Puede ser una observación cualitativa o cuantitativa, propia o procedente de la literatura científica. Al principio se trata de reconocer los elementos que puedan ser pertinentes o relevantes, a través del examen y de la clasificación preliminar de los hechos disponibles. De ahí se pasa al descubrimiento del problema. A veces, tal problema surge de la identificación de una incoherencia en el cuerpo de conocimientos 'de una disciplina, de una falla en alguna teoría admitida; con mucha mayor frecuencia, el problema es simplemente la ubicación de una laguna que se tratará de llenar partiendo de las teorías disponibles. Por fin, se trata de delimitar la cuestión, formulándola de modo que el problema quede planteado en términos que puedan hacerlo verificable. 2. Hipótesis. Es la proposición que se toma como explicación provisional de un fenómeno, es decir, una suposición. Una vez planteada la hipótesis, es preciso deducir sus consecuencias particulares comprobables. Algunas de ellas pueden haber sido ya comprobadas en el campo científico de que se trata, o en campos próximos. Otras, tomarán la forma de predicciones que, partiendo del modelo teórico y envolviendo datos empíricos, se someterán a la prueba según las técnicas de verificación existentes o según otras nuevas 288 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 que se propongan. La hipótesis puede llevar subordinadas otras hipótesis, y también preguntas. Ejemplo ad hoc: aceptando secuencialmente las hipótesis "El hombre prehistórico manufacturaba herramientas" y "Las herramientas que manufacturaba el hombre prehistórico podían ser de material lítico", se puede plantear la pregunta "Qué materiales Uticos utilizaba el hombre prehistórico para manufacturar herramientas?". Para Popper (1968), las hipótesis no son verificables porque no es posible su comprobación en todos los casos, sino simplemente refutables (faisables) puesto que se puede demostrar que no se ajustan a todos los casos; es decir, que el criterio válido no es el de verificabilidad, sino el de refutabilidad (falsification). 3. Experimentación. El observador prepara de manera activa unas circunstancias para producir un determinado fenómeno cuantitativo (directamente cuantificable) o cualitativo (indirectamente cuantificable). El investigador científico tiene que planear cómo someterá las predicciones hechas a partir de las hipótesis a verificaciones mediante experimentos, observaciones, mediciones, etc.; seguidamente realizará las operaciones programadas, recolectando en esta fase una serie de datos empíricos que serán criticados, evaluados, clasificados, analizados, procesados y finalmente interpretados a la luz del modelo teórico planteado anteriormente. 4. Tesis. Es la proposición consecuencia de aplicar el razonamiento lógico a los resultados de la experimentación, es decir, la hipótesis contrastada experimentalmente. El investigador tratará de comparar los resultados de la prueba con las consecuencias que había deducido de sus hipótesis, considerando entonces si éstas resultaron confirmadas o refutadas, en su totalidad o en parte. Una vez la experimentación ha verificado o refutado las hipótesis trazadas ante la observación de los hechos, las conclusiones pasan a convertirse en tesis. Un conjunto de tesis sobre un hecho puede dar lugar a modelos y teorías que lo expliquen y a leyes que permitan predecir resultados (predictibilidad). Para Kuhn (1970), una tesis no puede refutarse hasta que no se dispone de otra tesis alternativa, que pueda ocupar su lugar. 289 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 10.4. Referencias Aísa Moreu, D. 1997 El Razonamiento Inductivo en la Ciencia y en la Prueba Judicial. Zaragoza: Prensas Universitarias de Zaragoza. Bunge, M. 1983 La Investigación Científica. Su estrategia y su filosofía. T edición corregida. Traducción de M. Sacristán. Barcelona: Ariel. Carnap, R. 1950 Logical Foundations of Probability. Chicago: The University of Chicago Press. Cohen, L. J. 1977 Eco, U. 1982 The Probable and the Provable. Oxford: Clarendon Press. Cómo se hace una tesis. Técnicas y procedimientos de estudio, investigación y escritura. 4a edición. Traducción de L. Baranda y A. Clavería. Barcelona: Gedisa. Ford, E. D. 2000 Scientific Method for Ecological Research. Cambridge [etc.]: Cambridge University Press. Hull, L. W. H. 1981 Historia y Filosofía de la Ciencia. 5a edición. Traducción de M. Sacristán. Barcelona-Caracas-México: Ariel. Kuhn, T. S. 1970 The Structure of Scientific Revolutions. 2nd. edition. Chicago: The University of Chicago Press. 290 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez Addendum ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 Lain Entralgo, P. 1970 Ciencia y Vida. Madrid: Seminarios y Ediciones. Monod, J. 1981 El Azar y la Necesidad. Ensayo sobre la filosofia natural de la biología moderna. Traducción de F. Ferrer, revisada por A. Cortés. Barcelona: Turquets. Poincaré, J. H. 1964 El Valor de la Ciencia. 3a edición. Traducción, prólogo y notas de A. B. Besio y J. Banfí. Madrid: Espasa-Calpe. Popper, K. R. 1968 The Logic of Scientific Discovery. 2nd. edition. New York [etc.]: Harper &Row. Rivano, J. 1964 Curso de Lógica. Moderna y antigua. Santiago de Chile: Editorial Universitaria. Sierra Bravo, R. 1988 Tesis Doctorales y Trabajos de Investigación Científica. Metodología general de su elaboración y documentación. 2a edición. Madrid: Paraninfo. Vélez Cantareu, J. M. 1960 Fundamentos de Filosofía. In Alcobé, S. et alii, Directores: Enciclopedia Labor. Tomo 9: La sociedad. El pensamiento. Dios. Barcelona [etc.]: Labor, 533-611. 291 UNVERSITAT ROVIRA I VIRGILI MORFOLOGÍA DE ERITROCITOS DE MAMÍFERO EN MANCHAS DE SANGRE: ESTUDIO SOBRE MATERIALES LÍTICOS DE INTERÉS TECNOPREHISTÓRICO Policarp Hortolà i Gómez ISBN:978-84-691-1906-8/D.L: T-356-2008 •ESTA-TESIS-DOCTORAL-SE-TERMINÓ•DE-REDACTAR•EL-DÎA-11-DE-MAYO-DE-2001-